Name: In Utero iniezione intraventricolare e Elettroporazione di E15 embrioni di topo (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 26 min 17 s
Description: Scopri la tecnica di iniezione intrauterina ed elettroporazione in embrioni di topo E15 per studiare lo sviluppo cerebrale. Questo metodo consente l'introduzione mirata di DNA plasmidico nel ventricolo laterale.

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in utero iniezione intraventricolare e elettroporazione di e15 embrioni di topo

In Utero Intraventricular Injection and Electroporation of E15 Mouse Embryos

In utero in vivo iniezione ed elettroporazione della neocorteccia embrionali di topo fornisce un potente strumento per la manipolazione di singoli progenitori che ricoprono le pareti del ventricolo laterale. Questa tecnica è ormai ampiamente utilizzata per studiare i processi coinvolti nella corticogenesis da sovra-espressione o abbattere i geni e osservando gli effetti sulla proliferazione cellulare, la migrazione e differenziazione. Rispetto alle tradizionali strategie di eliminazione diretta, in utero elettroporazione fornisce un mezzo rapido per manipolare una popolazione di cellule durante una specifica finestra temporale. In questo protocollo video descritta la metodologia sperimentale per la preparazione di topi per la chirurgia, esponendo le corna uterine attraverso laporatomy, iniettando il DNA nei ventricoli laterali dell&#39;embrione in via di sviluppo electroporating DNA nel progenitori rivestimento della parete laterale, e la cura per gli animali post-operatorio . Il nostro laboratorio utilizza questo protocollo per interventi chirurgici sulla E13-E16 topi, tuttavia, è più comunemente eseguita a E15, come mostrato in questo video.

In Utero iniezione intraventricolare e Elettroporazione di E15 embrioni di topo

L'iniezione in vivo in utero e l'elettroporazione della neocorteccia embrionale del topo forniscono uno strumento potente per la manipolazione di singoli progenitori...

Ciao, sono William Tis del laboratorio di Krete. Oggi, io e gli altri vi mostreremo iniezioni intrauterine di embrioni di topo E 15. Ciao, mi chiamo Laura Elias.Oggi vi mostrerò come preparare le pipette per microiniezione e come caricarle per le iniezioni intraventricolari ed elettroporazione che eseguiremo. Mi chiamo David Castaneda e oggi assisterò nelle iniezioni in vivo in utero di embrioni di topo. Inietteremo DNA plasmidico nel ventricolo laterale di embrioni di topo in via di sviluppo.Abbiamo come bersaglio la corteccia CE di questi embrioni in modo da ottenere l'espressione di diverse molecole da parte delle cellule gliali, che in seguito allo sviluppo diventeranno neuroni. Quando si eseguono queste iniezioni intrauterine, ci sono alcuni strumenti importanti che dovrete utilizzare e ve li mostrerò ora. Utilizziamo un freer, un paio di pinzette adin.Uno, una coppia dentata e un'altra coppia con un piccolo dente all'estremità. Utilizziamo una pinza emostatica. Queste sono un paio di forbici.E poi usiamo queste due graffiatrici. Questa è quella più grande, che utilizziamo per i ratti. Questa è quella più piccola che usiamo per i topi.Utilizza un puntino di dimensione sette e

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In Utero iniezione intraventricolare e Elettroporazione di embrioni di ratto E16

Nella chirurgia in utero sopravvivenza in topi permette la manipolazione molecolare dell'espressione genica durante lo sviluppo. Qui si descrive l'utilizzo di alta frequenza ecografia per guidare l'iniezione di vettori retrovirali nel cervello di topo al giorno embrionale (E) 9.5.

Ultrasound-Guided Microiniezione nel proencefalo mouse In Utero A E9.5

Elettroporazione in utero permette per la consegna rapida in un gene-spazialmente e temporalmente modo controllato nello sviluppo del sistema nervoso centrale (SNC). Qui descriviamo altamente adattabile a protocollo di elettroporazione utero che possono essere usati per fornire costruisce espressione in più domini embrionale del SNC, tra cui il diencefalo telencefalo, e della retina.

Gene consegna efficiente in più territori SNC utilizzo In Utero Elettroporazione

Un metodo di trasferimento genico nel cervello del mouse di sviluppo è descritta utilizzando un metodo unico chirurgico e la forma speciale di elettrodi. Questa tecnica unica consente la trasfezione di DNA plasmidico temporalmente e spazialmente, che aiuterà molti neuroscienziati a studiare lo sviluppo del cervello.

Mouse in Utero elettroporazione: controllato Transefection Gene spazio-temporale

Controllare l'espansione delle cellule staminali somatiche è un freno notevole loro studio e l'uso in terapia. Qui si descrive un sistema per controllare temporalmente neurale espansione delle cellule staminali durante lo sviluppo e adulta, che può essere utilizzato per aumentare il numero di neuroni generati nel cervello di topo.

Ampliamento della embrionali e cellule staminali neurali adulte per<em&gt; In Utero</em&gt; Elettroporazione o Viral iniezione stereotassica

Questo video dimostra la consegna di DNA plasmidico nelle cellule neuronali cerebellari di embrioni murini utilizzando l'elettroporazione in utero. Questo metodo è utile per comprendere la funzione in vivo dei geni nel normale sviluppo cerebrale e i cambiamenti nell'espressione genica delle cellule neuronali durante la progressione tumorale.

Consegna genica basata sull'elettroporazione in utero: una tecnica per iniettare DNA plasmidico nelle cellule cerebellari embrionali di embrioni murini

Nonostante l'importanza funzionale e mediche...

La manipolazione genetica del topo sviluppo dell&#39;ipotalamo attraverso<em&gt; In utero</em&gt; Elettroporazione

Questo protocollo descrive in dettaglio come trasfettare in modo specifico diverse regioni del sistema nervoso centrale C57BL/6 tramite elettroporazione in utero. Incluso in questo protocollo ci sono istruzioni dettagliate per le trasfezioni delle regioni che si sviluppano nella corteccia, nell'ippocampo, nel talamo, nell'ipotalamo, nel nucleo del setto laterale e nello striato.

Cortex, Hippocampus-, Thalamus-, Hypothalamus-, laterale del setto Nucleus- e Striatum specifici<em&gt; In Utero</em&gt; Elettroporazione in C57BL / 6 del mouse

La doppia elettropozione in utero consente di colpire le popolazioni cellulari separate spazialmente e temporaneamente. Questa tecnica è utile per visualizzare le interazioni tra quelle popolazioni cellulari utilizzando proteine fluorescenti in condizioni normali, ma anche dopo esperimenti funzionali per perturbare i geni di interesse.

Doppia elettroporazione in utero per colpire le popolazioni di cellule temporali e separate spazialmente

In questo protocollo, descriviamo come iniettare lentivirus nella cavità amniotica del topo a E7.5, portando a una trasduzione uniforme dell'intera piastra neurale, con effetti dannosi minimi sulla sopravvivenza o sullo sviluppo embrionale.

Targeting della placca neurale murina mediante nano-iniezione in utero (NEPTUNE) al giorno embrionale 7.5

Scopri la tecnica di iniezione intrauterina ed elettroporazione in embrioni di topo E15 per studiare lo sviluppo cerebrale. Questo metodo consente l'introduzione mirata di DNA plasmidico nel ventricolo laterale.

In Utero iniezione intraventricolare e Elettroporazione di E15 embrioni di topo

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