Name: Neurogenesi corticale: Transizione dai progressi nel laboratorio di terapie basate sulle cellule (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-19T00:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 38 s
Description: Scopri l'elettroporazione in utero per studiare la neurogenesi corticale e la migrazione neuronale nel cervello in via di sviluppo. Questa tecnica consente esperimenti di guadagno e perdita di funzione sui geni coinvolti nella generazione dei neuroni.

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Gli autori non hanno nulla da dichiarare.

neurogenesi corticale: transizione dai progressi nel laboratorio di terapie basate sulle cellule

Cortical Neurogenesis: Transitioning from Advances in the Laboratory to Cell-Based Therapies

Neurogenesi corticale: Transizione dai progressi nel laboratorio di terapie basate sulle cellule

Mi chiamo Arnold Krickstein. Sono il direttore dell'Istituto di Medicina Rigenerativa qui all'UCSF e il mio campo di interesse è la neurobiologia dello sviluppo. In particolare, siamo molto interessati alle fasi iniziali dello sviluppo corticale e abbiamo studiato le cellule staminali neurali e le cellule progenitrici, analizzando il modo in cui generano i neuroni e come questi ultimi migrano e iniziano a formare circuiti nel cervello in via di sviluppo, specialmente nella corteccia.Bene, l'avvento dell'elettroporazione in utero, penso sia stata una di quelle tecnologie trasformative introdotte da SDO e dai suoi colleghi per lo studio delle fasi iniziali dello sviluppo cerebrale, poiché consente di effettuare esperimenti di acquisizione e perdita di funzione per una vasta gamma di geni. E di farlo in modo relativamente semplice introducendo direttamente tali geni nelle cellule staminali neurali e nelle cellule progenitrici che generano neuroni durante lo sviluppo corticale precoce. La tecnica consiste essenzialmente nell'iniettare DNA sotto forma di un plasmide nei ventricoli cerebrali di un animale in stadio embrionale, per poi applicare una breve corrente elettrica che spinge tal

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Biologia

Cellule staminali neurali raccolte dal cervello adulto sono in aumento utilizzati in applicazioni che vanno dalla ricerca di base dello sviluppo del sistema nervoso ad esplorare potenziali applicazioni cliniche in medicina rigenerativa. Questo rende rigoroso controllo delle condizioni di isolamento e di coltura utilizzate per coltivare queste cellule fondamentali per suonare i risultati sperimentali.

Crescere cellule staminali neurali da Regioni convenzionali e non convenzionali del cervello adulto Roditore

Gli astrociti fenotipicamente wild-type e le cellule staminali neurali raccolte da topi ingegnerizzati con alleli oncogenici condizionali e trasformati tramite ricombinazione virale Cre-mediata possono essere utilizzati per modellare la patogenesi dell'astrocitoma in vitro e in vivo mediante iniezione ortotopica di cellule trasformate in cervelli di compagni di cucciolata singenici e immunocompetenti.

Modellazione Astrocitoma Patogenesi In Vitro E In Vivo Utilizzo corticale astrociti o cellule staminali neurali da condizionale, topi geneticamente ingegnerizzati

Questo studio descrive una piattaforma sperimentale per caratterizzare rapidamente le cellule staminali ingegnerizzate e i loro comportamenti prima della loro applicazione in studi di trapianto in vivo a lungo termine per il salvataggio e la riparazione del sistema nervoso.

High Throughput Caratterizzazione di cellule staminali adulte Engineered per consegna di fattori terapeutici per le strategie neuroprotettive

La formazione immagine dal vivo è un potente strumento per studiare i comportamenti cellulari in tempo reale. Qui, descriviamo un protocollo per time-lapse video-microscopia delle cellule della corteccia cerebrale primario che consente un esame dettagliato delle fasi promulgata durante la progressione di lignaggio da cellule staminali neurali primarie a differenziato neuroni e cellule gliali.

Immagini di corteccia cerebrale primario celle utilizzando un sistema 2D cultura dal vivo

Riprogrammazione neuronale diretto genera neuroni che mantengono l'età della cellula somatica partenza. Qui, descriviamo un metodo basato su vettori per generare neuroni indotti dai fibroblasti cutanei ottenuti da donatori umani adulti.

Semplice generazione di una cultura ad alto rendimento dei neuroni indotti da fibroblasti umani della pelle adulta

L'obiettivo di questo protocollo è descrivere un approccio per l'analisi del comportamento delle cellule staminali/progenitrici neurali adulte in risposta alla manipolazione chemiogenetica di uno specifico circuito neurale locale.

Assaying Circuit Specific Regulation of Adult Hippocampal Neural Precursor Cells

Qui presentiamo un protocollo, progettato per utilizzare strumenti chemiogenetici per manipolare l'attività dei progenitori interneuroni corticali trapiantati nella corteccia dei primi topi postnatali.

Trapianto di progenitori interneuroni corticali chemiogeneticamente ingegnerizzati nei primi cervelli dei topi postnatali

Descriviamo un protocollo per riprogrammare i fibroblasti derivati dalla pelle umana in cellule progenitrici neuronali indotte (INPC) e la loro successiva differenziazione in Astrociti indotti (iA). Questo metodo porta a una generazione rapida e riproducibile di iNPC e iA in grandi quantità.

Modellazione in vitro per malattie neurologiche utilizzando la conversione diretta dai fibroblasti alle cellule progenitrici neuronali e la differenziazione in astrociti

In questo studio, forniamo una tecnica dettagliata per un sistema di coltura organoide corticale semplice ma robusto che utilizza colture hPSC standard prive di alimentatore. Questo è un protocollo rapido, efficiente e riproducibile per la generazione di organoidi che modellano aspetti della senescenza cerebrale in vitro.

Generazione robusta e altamente riproducibile di organoidi cerebrali corticali per la modellazione della senescenza neuronale cerebrale in vitro

Questo protocollo descrive colture organotipiche a lungo termine di corteccia umana adulta combinate con trapianto intracorticale ex vivo di progenitori corticali derivati da cellule staminali pluripotenti indotte, che presentano una nuova metodologia per testare ulteriormente terapie basate su cellule staminali per malattie neurodegenerative umane.

Colture organotipiche della corteccia umana adulta come modello ex vivo per il trapianto e la validazione di cellule staminali umane

Qui, descriviamo un protocollo per il trapianto e il tracciamento di cellule neurali marcate in organoidi cerebrali umani.

Un modello di organoide cerebrale umano di trapianto di cellule neurali

Scopri l'elettroporazione in utero per studiare la neurogenesi corticale e la migrazione neuronale nel cervello in via di sviluppo. Questa tecnica consente esperimenti di guadagno e perdita di funzione sui geni coinvolti nella generazione dei neuroni.

Neurogenesi corticale: Transizione dai progressi nel laboratorio di terapie basate sulle cellule

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