30 luglio 2007
In questo rapporto, proponiamo una nuova applicazione di resine dentali fotopolimerizzabili per la base di montaggio degli elettrodi o sonde di microdialisi in esperimenti cronica. Questo materiale permette legame diretto al cranio.
Negli esperimenti cronici di elettrofisiologia o di microdialisi, il cemento dentale autopolimerizzante è stato ampiamente utilizzato come base di montaggio per elettrodi o sonde di microdialisi. Poiché queste resine acriliche non aderiscono alla superficie ossea, sono state utilizzate viti come ancoraggi. Tuttavia, in animali di piccole dimensioni come i FIE o i topi, il cranio è molto fragile e non riesce a trattenere con successo le viti.
A volte queste viti per le caviglie causano infezione e infiammazione del tessuto. In questo rapporto, proponiamo una nuova applicazione del riempimento dentale destro come sua base di sollevamento per il montaggio. Questo materiale permette un legame diretto con il cranio.
Pertanto, non sono necessarie viti di ancoraggio e il campo chirurgico può essere ridotto notevolmente. Il peso totale di una sonda, di una cannula guida, di un alloggiamento e della base di montaggio era inferiore a un grammo. Le esperienze precedenti mostrano che l'effetto adesivo persiste per più di due mesi.
Questa tecnica può essere utilizzata anche con altri animali sperimentali, come il pesce, il topo e così via. Due implementazioni su due barre sono state registrate in video. In questa dimostrazione video, per ogni passaggio del protocollo sono state selezionate e utilizzate le riprese migliori.
Questi sono separati stereotassici e una camera di recupero controllata estiva. Questi sono cento strumenti per interventi chirurgici. Prime PR a sinistra e micro problema.
I suoi accessori sulla destra. Se un programma principale non è disponibile, si può utilizzare al posto di esso una spatolina micro. Questo è un set di resina dentale fotopolimerizzabile.
Il primer AP e un agente adesivo sono stati conservati in questi flaconi per farmaci. Abbiamo scelto questo prodotto perché è un sistema autopolimerizzante e a doppia polimerizzazione. Se si scelgono alternative, modificare la procedura dettagliata in base alle istruzioni del prodotto; lo strumento a forma di pistola sul lato sinistro è un'unità di polimerizzazione visibile a destra.
È possibile assemblare un'unità luminosa LED fatta a mano come mostrato a destra. Si prega di consultare la documentazione per i dettagli. Successivamente, è stata indotta l'anestesia chirurgica, è stata rimossa ulteriore area chirurgica e la testa è stata fissata al telaio stereotassico.
Prima dell'inserimento delle EVA, l'infortunio DI è stato applicato alle estremità delle EVA per prevenire il dolore. La testa dell'animale è stata fissata al telaio e l'angolo della testa è stato regolato adeguatamente. Dopo aver disinfettato la zona chirurgica con iodio, una micropipetta è stata fissata al supporto dell'elettrodo.
Questo micropipetta è stato utilizzato per creare un punto di riferimento in un esperimento non riuscito. Il punto Lambda Y è stato utilizzato come punto di riferimento. È stata effettuata una piccola incisione cutanea per esporre il punto di riferimento.
Segnare il punto con una micropipetta di vetro riempita con un colorante. Tagliare la cute per esporre la superficie cranica, quindi pulire la superficie dell'osso con un bastoncino di cotone per rimuovere sangue e umidità. È necessaria una superficie pulita e asciutta per garantire un'adesione resistente.
Dopo aver individuato la posizione del bersaglio, si è praticata una piccola craniotomia mediante pinzette fini. È possibile utilizzare anche micro-punti o pinzette per ossa per eseguire la craniotomia. Successivamente, il microtubo grezzo è stato rimosso dal supporto e l'ago guida, la cannula o l'elettrodo è stato fissato al supporto.
La punta della cannula guida è stata allineata al punto di riferimento e quindi spostata con attenzione fino al punto bersaglio. È stata eseguita la più piccola incisione nel tessuto cerebrale mediante un ago da iniezione da 30 gauge. La guida dell'ago è stata spostata nella posizione bersaglio.
La seconda procedura di screening sulla superficie ossea ha previsto l'applicazione del primer Supp. Questo primer è composto dalle parti rigide A e B. Una goccia di ciascuna componente rigida è stata depositata su una capsula e mescolata con un pennello, quindi il primer è stato applicato sull'area di contatto. Anche la superficie della canula guida è stata tamponata.
È stato fornito un leggero soffio d'aria per distribuire ed asciugare l'adesivo, quindi si è cambiato il pennello ed è stato applicato un agente adesivo sull'area. Questo agente adesivo è fotosensibile, pertanto deve essere protetto durante la procedura. Anche la superficie della cannula guida è stata tamponata.
L'aria mite è stata fornita ed è stata eliminata la luce blu visibile per accelerare la reazione chimica dell'agente di legame. Per proteggere gli occhi dell'operatore, si dovrebbe utilizzare il seme trasparente Orange Coral. Se necessario, agli occhi degli animali non si dovrebbe applicare un allineamento diretto.
Un foro in alluminio viene utilizzato per proteggere gli occhi degli animali. Una piccola quantità di resina composita è stata applicata sulla superficie cranica e sulla cannula guida mediante un tappo semplice. Successivamente, la luce blu visibile è stata eliminata per polimerizzare la resina durante il montaggio incrementale.
Un agente adesivo è stato applicato prima di ogni montaggio. L'area dell'intervento è stata mantenuta costantemente in posizione corretta a causa della videoregistrazione. Tuttavia, è preferibile evitare una pressione eccessiva perché potrebbe ridurre il periodo di tempo in cui i materiali sono utilizzabili.
Il montaggio progressivo e il riposizionamento sono raccomandabili per garantire una reazione completa del regime. È possibile riformare la forma fino a quando non diventa visibile. Sono stati somministrati antibiotici o è stato applicato un trattamento all'area chirurgica per prevenire infezioni.
Ora che l'intervento chirurgico era terminato, l'adattatore stereotassico è stato sganciato dal portaelettrodi. L'adattatore stereotassico è stato rimosso. Al suo posto è stata inserita una cannuccia DAMing e l'animale è stato liberato dal telaio stereotassico.
Infine, l'animale è stato trasferito nella camera di controllo estiva per il recupero dall'anestesia. Era il giorno successivo all'intervento chirurgico. Rispetto all'applicazione della tradizionale tecnica autopolimerizzante, la tecnica introdotta presenta diversi vantaggi importanti.
Prima di tutto, si lega direttamente all'osso. L'acrilico autopolimerizzante può essere fissato all'osso mediante filo metallico, ma non aderisce all'osso. Al contrario, il materiale fotopolimerizzabile può legarsi direttamente all'osso.
Aderisce inoltre ad alcuni materiali, inclusi plastica e metalli, se utilizzato insieme a un primer per metalli. Questa caratteristica di adesione a materiali diversi consente un'ampia gamma di applicazioni. In secondo luogo, la facilità di manipolazione: la finestra temporale di lavorazione delle resine convenzionali è relativamente breve.
In pochi minuti presenta un'elevata fluidità e non è facile da manipolare rapidamente. Tuttavia, una volta iniziata la reazione chimica, questa viene accelerata dal calore esotermico. Calore e resina induriscono in breve tempo.
Le finestre temporali di lavorazione per la resina indurente corretta sono significativamente più ampie e regolabili. Fondamentalmente, le resine rimangono costantemente in uno stato lavorabile dall'inizio fino al momento dell'indurimento ottimale. La terza reazione indurita non genera calore.
La reazione di polimerizzazione della resina autopolimerizzante è esotermica. Quando la base di montaggio è spessa, questo calore si accumula e provoca danni. La reazione tissutale della resina fotopolimerizzabile non genera calore ed il materiale è biocompatibile.
Il costo dei materiali e delle attrezzature speciali, come l'unità luminosa, può rappresentare un problema. Nel documento supplementare presentiamo un'unità luminosa a LED fatta in casa che non ha un costo elevato. Consultare rapidamente il documento per i dettagli.
Questa tecnica è applicabile all'implementazione di un elettrodo o di una microsonda in altri animali sperimentali come pesce, topo, coniglio, gatto e scimmia.
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Questo rapporto presenta una nuova applicazione di resine dentali fotopolimerizzabili per il fissaggio sicuro di elettrodi o sonde per microdialisi in esperimenti cronici. Il materiale proposto consente un legame diretto con il cranio, risolvendo i limiti dei metodi tradizionali.
Il collegamento diretto di elettrodi o sonde per microdialisi mediante resina adesiva dentale polimerizzata con luce risolve una sfida critica negli studi cronici di neurofisiologia che coinvolgono modelli animali di piccole dimensioni con cranio fragile. Questo approccio elimina la necessità di viti di ancoraggio, riducendo la complessità chirurgica e minimizzando il rischio di infiammazione dei tessuti. Il metodo migliora la continuità e l'affidabilità sperimentale nei flussi di valutazione preclinica nel campo delle neuroscienze e nella sperimentazione di dispositivi.
Questa tecnica di montaggio si inserisce nel percorso che va dalla fase iniziale di scoperta alla validazione preclinica di dispositivi e biomarcatori, in particolare nella ricerca nel campo delle neuroscienze e della neurofarmacologia.