Misurare Coordinamento motore in Mouse

L'obiettivo generale di questa procedura è misurare la coordinazione motoria nei topi. Ciò si ottiene effettuando prima un test sull'asta del rotore acceleratore. Successivamente viene testata la coordinazione motoria sulla barra onale.

L'animale può essere testato anche su aste statiche. Infine, è possibile misurare le prestazioni sulle parallele. In definitiva, è possibile ottenere risultati che mostrano se il topo ha menomazioni nella coordinazione motoria.

In generale, gli individui che non conoscono questa tecnica avranno difficoltà a causa della difficoltà di posizionare correttamente il mouse sull'apparecchio per tutti i test seguenti. Porta i topi nella stanza sperimentale da cinque a 20 minuti prima del test per assicurarti che siano completamente svegli. La scena delle barre del rotore qui è stata costruita presso l'Università di Oxford.

L'asta ha un diametro di tre centimetri con una serie di creste parallele sulla sua superficie, che aiutano i topi ad afferrarla in modo più efficace. Una flangia su ciascun lato impedisce al mouse di lasciare l'asta. Hanno un diametro di 30 centimetri e una distanza di sei centimetri

L'asta è fissata a 30 centimetri dalla base dell'apparecchio. Alla base è posta una morbida superficie imbottita per attutire eventuali cadute prima di iniziare la prova. Preparare l'asta del rotore impostando una velocità iniziale di quattro rotazioni al minuto e una velocità di accelerazione di 20 rotazioni al minuto.

Per iniziare, tieni il mouse per la coda e portalo verso l'asta con un angolo di 45 gradi sotto l'orizzontale. Rilascia rapidamente l'animale quando sta quasi toccando l'asta. In alternativa, il topo può essere abbassato su un tassello e il tassello verrà utilizzato per trasferire l'animale sull'asta.

Avvia l'accelerazione 10 secondi dopo aver posizionato il mouse sull'asta e nota la velocità con cui il mouse cade. Se il mouse cade prima di cinque secondi ed è probabilmente dovuto a un cattivo posizionamento da parte dello sperimentatore, il risultato non deve essere registrato e la prova deve essere riavviata se il mouse cade prima di 10 secondi. Prendi nota del tempo e concedi all'animale altri due tentativi.

Per gli animali che rimangono in posizione oltre i 10 secondi, registrare la velocità con cui l'animale cade. Occasionalmente il topo può smettere di camminare e, di conseguenza, un po' di assalto intorno all'asta prima di cadere. È utile notare la velocità di questo evento.

Le prestazioni sono calcolate come la velocità media tra le prove. Ad esempio, un mouse che cade prima di 10 secondi una volta e poi rimane acceso fino a 12 rotazioni al minuto. La seconda volta segna quattro più 12 diviso per due pari a otto rotazioni al minuto.

La barra orizzontale misura la forza e la coordinazione degli arti di caduta, mentre una barra di due millimetri di diametro è la più comunemente usata. Le barre di diametro maggiore possono fornire punteggi di prestazione più raffinati. Barre di ottone lunghe 38 centimetri sono tenute a 49 centimetri sopra la superficie del banco da una colonna di supporto in legno.

Le barre sono tenute in tensione quando sono inserite nelle tacche dei supporti che sono leggermente uniti. Iniziare il test con la barra da due millimetri. Tenere il mouse per la coda e posizionarlo sulla panca di fronte all'apparecchio.

Fallo scorrere velocemente. All'indietro di circa 20 centimetri per allineare rapidamente il suo corpo perpendicolarmente alla barra. Solleva l'animale permettendogli di afferrare la barra orizzontale al centro con solo i suoi quattro pori.

Rilasciare la coda e contemporaneamente avviare un cronometro. Se il mouse non riesce ad afferrare la barra e il posizionamento dello sperimentatore potrebbe essere la causa. Non registrare la caduta e ripetere il test dell'animale dopo un breve riposo.

Se il mouse cade prima di cinque secondi, e questo apparentemente non è dovuto a un cattivo posizionamento da parte dello sperimentatore, ripetere fino a tre volte nel tentativo di ottenere un punteggio superiore a cinque secondi. Registra il tempo in cui il mouse cade o il tempo fino a quando uno quattro povero tocca una colonna con un tempo massimo di test di 30 secondi, prendi il punteggio migliore come il datu Diritto per segnare la barra orizzontale. Se la massa diminuisce tra uno e cinque secondi, segna uno tra sei secondi e 10 secondi.

Segna due tra 11 secondi e 20 secondi. Segna tre tra 21 secondi e 30 secondi. Segna quattro cadendo dopo 30 secondi o semplicemente rimanendo sulla barra fino a 30 secondi.

Segna cinque e anche il mouse segna cinque se tocca un'estremità. Supporto con le sue quattro porte in qualsiasi momento durante il test. Se si ottiene un punteggio di cinque sulla barra da due millimetri, l'animale può essere testato su barre più spesse dopo un breve riposo.

Il sistema di punteggio per le barre da quattro e sei millimetri è lo stesso della barra da due millimetri e il punteggio finale è il totale cumulativo. Così, un mouse che segna cinque sulla barra da due millimetri ma cade dalla barra da quattro millimetri dopo 13 secondi. Punteggi cinque più fa otto.

In questo test per la coordinazione motoria, dows o aste di legno di vario spessore, 35, 28, 22, 15 e nove millimetri di diametro ciascuna, 60 centimetri di lunghezza, fissate da un morsetto G a uno scaffale da laboratorio a 60 centimetri dal pavimento. Viene fatto un segno a 10 centimetri dall'estremità vicino alla panchina per indicare il traguardo. Per iniziare, posiziona il topo all'estremità più larga dell'asta più larga rivolta lontano dallo scaffale, registra il tempo impiegato dall'animale per orientarsi verso lo scaffale e il tempo totale di transito.

Se il mouse si capovolge e si aggrappa sotto l'asta durante l'orientamento, assegnalo arbitrariamente al punteggio massimo di 120 secondi. L'animale non viene testato sulle altre aste e riceve anche un valore massimo di transito. Se il mouse cade o raggiunge il tempo massimo di prova di 120 secondi dopo l'orientamento, non testarlo su aste più strette.

Viene assegnato un punteggio massimo anche se il mouse si capovolge mentre si sposta l'asta dopo l'orientamento, riporta il mouse nella gabbia di casa e lo lascia riposare prima del test. La canna più piccola successiva. Posiziona l'animale sull'asta più piccola come mostrato in precedenza.

Se il mouse cade prima di cinque secondi, sostituirlo e consentire fino a due altri tentativi. Registra il tempo per invertire l'asta o fino a quando il mouse non cade. Per l'installazione delle parallele appoggiare due barre, di un metro di lunghezza e quattro millimetri di diametro, distanti 30 millimetri l'una dall'altra su supporto in legno.

Colonne a 60 centimetri dal pavimento. Posizionare il mouse al centro delle due barre con il suo asse longitudinale perpendicolare alle barre. Entrambi i pori anteriori dovrebbero essere su una barra con entrambi i pori posteriori sull'altra barra.

L'incisione è simile a quella delle aste statiche. Vengono prese due misure: il tempo fino a quando il mouse si orienta di 90 gradi rispetto alla posizione iniziale e il tempo fino a quando non raggiunge uno dei supporti terminali. Allo stesso modo, l'orientamento e il transito devono essere raggiunti senza che l'animale si capovolga, altrimenti viene assegnato il tempo massimo.

Se l'animale cade prima di cinque secondi, probabilmente è dovuto a un posizionamento errato e l'animale dovrebbe essere sottoposto a un nuovo test. Un'asta statica è stata originariamente utilizzata per monitorare il progresso della malattia nei topi mutanti con o senza arricchimento ambientale nelle loro gabbie domestiche. Il programma di arricchimento ha ritardato drasticamente l'insorgenza della disfunzione motoria sull'asta, che è stata parallela a un ritardo nell'insorgenza dello scarso serraggio posteriore.

Un segno generale di neurologia: i topi infetti da scrapy mentale hanno mostrato una diminuzione delle prestazioni delle barre orizzontali dalla settimana 16 dopo l'iniezione nel test dell'asta del rotore dalla settimana 18 e nelle barre statiche almeno dalla settimana 19. Le lesioni dell'ippocampo non hanno avuto alcun effetto su alcuna misura della capacità motoria, ma 1 2 9 s due topi SV sono stati compromessi rispetto al C 57 nero sei ceppo sull'asta del rotore e sulle aste statiche Dopo il suo sviluppo. Questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori della malattia di Huntington per studiare gli effetti dell'arricchimento ambientale nei topi mutanti della malattia di Huntington.