Name: Una procedura 1,5 ore per lidentificazione di Enterococcus Specie Direttamente da emocolture (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-02-10T20:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 2 s
Description: Scopri l'identificazione rapida di Enterococcus da emocolture con PNA FISH. Questo protocollo di 1,5 ore utilizza sonde fluorescenti e microscopia per diagnosticare infezioni del sangue e guidare terapie tempestive contro la sepsi.

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Gli studi sono stati sponsorizzati da AdvanDx.

1. Raccolta e preparazione <ol><li> Raccogliere il sangue venoso da pazienti con sospetto di sepsi e mettere in due BACTEC (BD, Sparks, MD) bottiglie di emocoltura, uno aerobici e anaerobici uno, insieme composto da un set di emocoltura. </li><li> Posizionare le bottiglie nel 9240 BACTEC strumento a 35 ° C. </li><li> Incubare fino a quando lo strumento viene attivato in allarme a causa della crescita di organismi in bottiglia emocoltura. </li><li> Rimuovere bottiglia dallo strumento emocoltura. </li></ol> 2. Preparazione dei reagenti prima della colorazione <ol><li> Preparare la soluzione di lavaggio con l'aggiunta di 4 ml di soluzione di lavaggio 60x seguito da 240 ml di fresca acqua deionizzata o distillata direttamente al piatto colorazione. </li><li> Mettere il piatto nella colorazione ° 55 C a bagno d'acqua calda. </li><li> Conservare il concentrato rimanente a 2-8 ° C. </li><li> Rimuovere il liquido di montaggio dal frigorifero e riscaldare a temperatura ambiente. </li></ol> 3. Colorazione di Gram <ol><li> Capovolgere delicatamente il flacone cultura del sangue. </li><li> Utilizzando un ago e la siringa o un apparato subcolture, rimuovere il sangue (circa 5 ml) dalla bottiglia e posto in una provetta sterile con tappo a vite. </li><li> Utilizzando una pipetta sterile, posizionare una goccia di sangue su un vetrino per microscopio. </li><li> Aria secca il vetrino e fissare in metanolo per 10 secondi. </li><li> Lasciare scorrere asciugare all'aria. </li><li> Eseguire una colorazione di Gram sul film del sangue per determinare la morfologia dell'organismo in crescita nella bottiglia emocoltura. </li><li> Utilizzando una lente immersione in olio, visualizzare diapositive. Cocchi Gram-positivi in ​​coppie e catene brevi osservati sul colorazione di Gram è più coerente con specie Enterococcus. </li><li> Questo risultato colorazione di Gram unità allora la scelta del proprio kit sonda PESCE PNA da utilizzare per l'identificazione batterica. Questa cultura del sangue saranno testate in base alla E. faecalis / OE PESCE PNA macchia. </li></ol> 4. PESCE PNA Stain <ol><li> Mescolare la provetta contenente il sangue delicatamente agitando prima della preparazione striscio. </li><li> Porre una goccia di soluzione di fissaggio sul pozzo di un vetrino da microscopio PESCE PNA. </li><li> Trasferire 10 L o una piccola goccia dal tubo con la cultura del sangue positivo per la soluzione di fissaggio e mescolare delicatamente per emulsionare. </li><li> Fissare gli strisci di riscaldamento per 20 min. a 55 ° C su una piastra di riscaldamento. </li></ol> 5. Controllo Qualità del materiale Uno positivo e uno negativo vetrino di controllo di qualità deve essere provato con ogni lotto di vetrini per la colorazione. <ol><li> Usa E. faecalis / OE controllo Slides acquistato da AdvanDx a tale scopo o preparare strisci da colture liquide di ceppi di riferimento di E. faecalis e E. faecium come controllo positivo sia su diapositive separate o in comune in uno scivolo e Staphylococcus spp e Streptococcus spp come materiale di controllo negativo. </li></ol> I risultati QC dovrebbe essere in grado di monitorare le condizioni per esami appropriati, in particolare quelle che riguardano rigore ibridazione e la penetrazione della parete cellulare, dal momento che la metodologia PNA è progettato per ottimizzare la penetrazione della parete cellulare 6. Ibridazione <ol><li> Aggiungere una goccia di E. faecalis / OE PNA al pozzo sul vetrino con lo striscio. </li><li> Aggiungi coprioggetto. Evitare bolle d'aria. </li><li> Incubare per 30 ± 5 min. a 55 ± 1 ° C sulla piastra di riscaldamento </li><li> A seguito di luogo di incubazione i vetrini in vettore scivolo </li></ol> 7. Lavaggio stringente <ol><li> Vettore scorrere immergere nella soluzione di lavaggio preriscaldato a 55 ° C e rimuovere con attenzione il coprioggetto. Spesso, il coprioggetto scivola delicatamente agitando il vetrino nella soluzione di lavaggio. Occasionalmente, il coprioggetto deve essere delicatamente spinto fuori con le pinze. </li><li> Incubare la soluzione di lavaggio per 30 ± 5 min. a 55 ± 1 ° C. </li><li> Rimuovere le diapositive dalla soluzione di lavaggio </li><li> Lasciare che il vetrino di aria secca </li></ol> 8. Montaggio <ol><li> Aggiungere una goccia di liquido di montaggio ad ogni diapositiva </li><li> Aggiungi coprioggetto. Evitare bolle d'aria. </li><li> Esaminare il vetrino di un microscopio a fluorescenza entro 2 ore. </li><li> Non esporre le diapositive a luce solare diretta o altre fonti di luce forte come questo può portare alla estinzione di fluorescenza. </li></ol> 9. Interpretazione dei risultati Il microscopio a fluorescenza utilizzato per l'esame diapositive devono essere equipaggiati con il filtro AdvanDx Dual Band e un obiettivo olio 60x o 100x. I vetrini QC devono essere esaminati prima di confermare che l'ibridazione si è verificato. E. faecalis dovrebbe apparire come luminosi verdi fluorescenti cocchi in molteplici campi di vista e la E. faecium apparirà come rosso brillante cocchi. Non enterococchi vetrino di controllo dovrebbe apparire nonfluorescent. Dopo aver confermato il sistema dei controlli, le diapositive paziente può essere esaminato. In un primo momento il sangue film appare rossastro, ma il rosso e il verde cocchi sarà molto evidente. <img src="/files/ftp_upload/2616/2616fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1788238805000" data-alt="Figura 1"> Esempi rappresentativi Figura 1. Verdi-positivi E. faecalis (a sinistra), rosso positivo E. faecium (al centro), e negative (a destra) i risultati dei test. 10. Rappresentante Risultati Tre istituzioni sono stati inclusi in uno studio multicentrico studio clinico di valutazione del presente PESCE PNA macchia e confrontando un protocollo di 2,5 ore al ridotto 1,5 protocollo ora che è appena stato recensione. Un totale di 152 routine cocchi Gram-positivi in ​​coppie e catene (GPC) positivo bottiglie di emocoltura sono stati inclusi negli studi. Ci è stata del 100% (152/152) l'accordo tra i risultati delle modificati e la procedura di test originale per E. faecalis / OE PNA PESCE: 41/41 E. faecalis; 33/33 altri enterococchi e 78/78 GPC altri (Tabella 1). Questo metodo di colorazione era squisita sensibilità e specificità nel corso di questo studio clinico (Tabella 2). <table border="1"><tbody><tr><td></td><td> Metodi di routine </td><td> E. faecalis / OE PNA PESCE Procedura Standard </td><td> E. faecalis / OE PNA procedimento FISH breve </td></tr><tr><td> E. faecalis </td><td> 41 </td><td> 41 (Verde Positivo) </td><td> 41 (Verde Positivo) </td></tr><tr><td> E. faecium </td><td> 27 </td><td> 27 (Red Positivo) </td><td> 27 (Red Positivo) </td></tr><tr><td> E. casseliflavus </td><td> 2 </td><td> 2 (rosso positivo) </td><td> 2 (rosso positivo) </td></tr><tr><td> E. gallinarum </td><td> 2 </td><td> 2 (rosso positivo) </td><td> 2 (rosso positivo) </td></tr><tr><td> Altri Enterococcus spp. </td><td> 2 </td><td> 2 (rosso positivo) </td><td> 2 (rosso positivo) </td></tr><tr><td> S. pneumoniae </td><td> 17 </td><td> 17 (negativo) </td><td> 17 (negativo) </td></tr><tr><td> S. viridans </td><td> 33 </td><td> 33 (negativo) </td><td> 33 (negativo) </td></tr><tr><td> S. mitis </td><td> 1 </td><td> 1 (negativo) </td><td> 1 (negativo) </td></tr><tr><td> S. pyogenes </td><td> 3 </td><td> 3 (negativo) </td><td> 3 (negativo) </td></tr><tr><td> S. bovis </td><td> 2 </td><td> 2 (negativo) </td><td> 2 (negativo) </td></tr><tr><td> S. salivarius </td><td> 1 </td><td> 1 (negativo) </td><td> 1 (negativo) </td></tr><tr><td> S. sanguinis </td><td> 2 </td><td> 2 (negativo) </td><td> 2 (negativo) </td></tr><tr><td> S. agalagtae </td><td> 7 </td><td> 7 (negativo) </td><td> 7 (negativo) </td></tr><tr><td> Altri Streptococcus spp. </td><td> 7 </td><td> 7 (negativo) </td><td> 7 (negativo) </td></tr><tr><td> Abiotrophia spp. </td><td> 3 </td><td> 3 (negativo) </td><td> 3 (negativo) </td></tr><tr><td> Peptostrepococcus spp. </td><td> 2 </td><td> 2 (negativo) </td><td> 2 (negativo) </td></tr><tr><td> Totale </td><td> 152 </td><td> 152/152 100% di accordo </td><td> 152/152 100% di accordo </td></tr></tbody></table> Elenco Tabella 1. Dei batteri testati utilizzando sia lo standard (2.5hr) e rapido (1,5 h) protocollo. <table border="1"><tbody><tr><td> Sensibilità E.faecalis </td><td> Sensibilità Altri Enterococcus spp. </td><td> Specificità </td></tr><tr><td> 100% (41/41) 95% CI (93,0-100) </td><td> 100% (33/33) 33/33 95% CI (91,3-100) </td><td> 100% (78/78) 95% CI (96,2-100) </td></tr></tbody></table> Tabella 2. Sensibilità e Specificità del 1,5 ore protocollo FISH PNA.

<ol><li>Rapid identification and differentiation of Enterococcus faecalis and other Enterococcus species directly from positive blood cultures by dual color fluorescence in situ hybridization using PNA probes. Oliveira, K., Chapin, K. C., Musgnug, M. C., Haase, G., Weber-Heynemann, J., DeGirolami, P. C., Dakos, J., Stender, H. 42rd Interscience Conference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 2002, San Diego, , (2002).</li>
<li>Multicenter evaluation of E. faecalis PNA FISH for rapid identification and differentiation of Enterococcus faecalis and other Enterococcus species directly from positive blood cultures. Chapin, K. C., Musgnug, M. C., Oliveira, K., DeGirolami, P. C., Dakos, J., Johansen, J. T., Procop, G. W., Wilson, D., Padilla, E., Gonzalez, V., Stender, H. 103rd Annual Meeting of American Society, 2003, Washington DC, , (2003).</li>
<li>Direct identification of Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, and Candida albicans from blood cultures using fluorescence in situ hybridization with nucleic acid probes. Rausei, V., Youssef, E., Morgan, M. 104th Annual Meeting of American Society for Microbiology, 2005, New Orleans, LA, , (2005).</li>
<li>Validation of S. aureus PNA FISH, E. faecalis PNA FISH & C. albicans PNA FISH for Rapid Identification of Positive Blood Culture Bottles. Novak-Weekley, S. M., LaForga, M., Carey, L., Frazier, L. 106th Annual Meeting of American Society for Microbiology, 2006, Orlando, FL, , (2006).</li>
<li>Rapid Identification of Enterococcus Species in Positive Blood Cultures with Therapeutic Implications. Johnson, J. K., Roberts, A. A., Forrest, G. N., Lincalis, D. P., Venezia, R. A. 106th Annual Meeting of American Society for Microbiology, 2006, Orlando, FL, , (2006).</li>
</ol>

La produzione di questo video-articolo è stato sponsorizzato da AdvanDx. Benjamin Crystal è un dipendente di AdvanDx, che rende gli strumenti e reagenti utilizzati in questo articolo.

La E. faecalis / OE saggio FISH PNA per enterococco può fornire l&#39;identificazione 2-3 giorni prima di metodi di coltura tradizionali. La procedura abbreviata per il test (1,5 hourr) fornisce una rapida identificazione che può essere utilizzato per un migliore approccio alla terapia antimicrobica e la prognosi del paziente. Uno studio a sostegno di questa è stata eseguita da Forrest, et al. (6). Oltre due anni consecutivi a partire dal 2005 il laboratorio di microbiologia identificato cocchi Gram-positivi in coppie e catene in crescita in bottiglie di emocoltura con metodi microbiologici tradizionali e nel 2006, aggiungendo la E. faecalis / OE PNA FISH. Inoltre, un algoritmo di trattamento sviluppato dal team istituzioni antimicrobici (AMT) di utilizzare efficacemente i dati PESCE ANP generati dal laboratorio in modo tempestivo. L&#39;outcome primario valutato era giunto il momento di emocoltura attingere per l&#39;attuazione di un&#39;efficace terapia antibiotica prima e dopo PESCE PNA è stato istituito nel flusso di lavoro dei laboratori. Gravità della malattia, la posizione del paziente e la terapia antimicrobica empirica sono stati misurati. Un totale di 224 pazienti con batteriemia enterococciche acquisite in ospedale sono stati valutati con 129 nel periodo pre-intervento e 95 nel periodo PESCE PNA. PESCE PNA identificato E. faecalis 3 giorni prima di culture tradizionali (1,1 vs 4,1 giorni, p &lt;0,001). PESCE PNA identificato E. faecium in media 2,3 giorni prima (1,1 vs 3,4 giorni, p &lt;0,001) ed era associata a una riduzione statisticamente significativa nel tempo di iniziare la terapia efficace (1,3 vs 3,1 giorni, p &lt;0,001) e una diminuzione 30 giorni mortalità (26% vs 45%, p = 0,04). Questo gruppo ha concluso che la E. faecalis / OE saggio PESCE PNA in combinazione con un algoritmo di trattamento AMT ha portato nelle precedenti l&#39;inizio di una appropriata terapia antimicrobica empirica per i pazienti con acquisite in ospedale E. faecium batteriemia. <ol><li> I reagenti non devono essere utilizzati dopo la data di scadenza stampata sulle etichette e reagenti non deve essere modificato in alcun modo. Dovrebbero rimanere in frigorifero quando non in uso o che potrebbero perdere potenza. </li><li> Bottiglie cultura del sangue devono essere miscelati prima del campionamento. </li><li> E &#39;importante non permettere che la punta del flacone contagocce di toccare uno striscio di sangue, perché questo potrebbe causare la contaminazione crociata di materiale tra le diapositive, o causare la contaminazione del reagente. </li><li> Assicurarsi che il bagno d&#39;acqua e il blocco di riscaldamento sono mantenuti alla temperatura costante di 55 ° C. </li><li> Non utilizzare filtri diversi da quelli del filtro Dual Band o colori non sarà chiaramente discernere. </li><li> Non utilizzare vetrini da microscopio diversi preparati microscopici o ibridazione non si verificherà. </li><li> E &#39;importante che il microscopio sta funzionando correttamente. Assicurarsi che il bulbo microscopio è approvato entro il numero di ore di utilizzo. </li></ol><ul><li> Alcune rare le specie Enterococcus non vengono rilevati dalla sonda di PNA ibridare le specie Enterococcus altri, come ad esempio E. asinii, E.dispar, E. haemoperoxidus, E. cecorum, E. columbae, saccharolyticus E., E. solitarius ed E . sulfuree. </li><li> Moraviensis E. è identificato come E. faecalis a causa di similarità di sequenza. </li><li> Alcuni ceppi di Streptococcus anginosus produrre una fluorescenza verde falso positivo a causa di somiglianze sequenza. </li><li> VersaTREK bottiglie cultura del sangue non sono state valutate nel corso degli studi clinici. Le prestazioni per rilevare E. Enterococcus faecalis ed altre spp. con bottiglie di emocoltura VersaTREK è sconosciuta. </li><li> Falsi positivi autofluorescenza verde può verificarsi se uno standard FITC filtro viene utilizzato al posto del filtro Dual Band. </li><li> Risultati falsi negativi possono verificarsi raramente a causa della crescita misti o causa di un errore nella tecnica di analisi. </li><li> Il tipo e la condizione della strumentazione utilizzata influenzerà l&#39;aspetto visivo dell&#39;immagine ottenuta. La fluorescenza può varydue al tipo di microscopio impiegato, della fonte di luce e il livello di rRNA nelle cellule </li><li> Isolamento su terreni solidi è necessario per differenziare la crescita mescolato con altri organismi e di identificare emocolture positive ottenendo un risultato negativo. </li><li> Il prodotto non è stato convalidato con campioni diversi da emocolture. </li></ul>

Reagenti E. faecalis / OE PESCE PNA è costituito dai seguenti componenti del kit: <ul><li> Soluzione Soluzione fissazione Fixation 3 ml PBS con un detergente. </li><li> E. faecalis / OE PNA E. faecalis / OE PNA 1,5 ml sonde di PNA in ibridazione. soluzione. Contiene il 30% formammide. </li><li> Lavare 60x 60x soluzione di soluzione di lavaggio 50 mL Tris-salina tamponata con detergente </li><li> Media montaggio Mezzo di montaggio 3 inibitore mL photobleaching in glicerolo </li><li> Controllo di qualità diapositive </li><li> <a href="http://www.advandx.com">AdvanDX</a> </li></ul>

una procedura 1,5 ore per l&#39;identificazione di enterococcus specie direttamente da emocolture

A 1.5 Hour Procedure for Identification of Enterococcus Species Directly from Blood Cultures

Gli enterococchi sono una causa comune di batteriemia con E. faecalis è la specie predominante seguito da E. faecium. Perché la resistenza alla ampicillina e vancomicina in E. faecalis è ancora raro in confronto alla resistenza in E. faecium, lo sviluppo di test rapidi consentono la differenziazione tra le specie enterococchi è importante per la terapia appropriata e sorveglianza della resistenza. La E. faecalis OE saggio PESCE PNA (AdvanDx, Woburn, MA) utilizza specie-specifico acido nucleico del peptide (PNA) delle sonde in una fluorescenza in formato ibridazione in situ ed offre un tempo per i risultati di 1,5 ore e il potenziale di fornire informazioni importanti per le specie-specifiche trattamento. Studi multicentrici sono stati condotti per valutare le prestazioni del 1,5 ore E. faecalis / OE procedimento FISH PNA rispetto alla originaria procedura di test 2,5 ore e di batteriologia metodi standard per l&#39;identificazione degli enterococchi direttamente da una bottiglia positiva cultura del sangue.

Un protocollo rapido per l&#39;identificazione diretta di Enterococcus faecalis ed Enterococcus altre specie da una emocoltura positiva con un Peptide Nucleic Acid test di ibridizzazione fluorescente in situ (FISH PNA).

Una procedura 1,5 ore per l&#39;identificazione di Enterococcus Specie Direttamente da emocolture

Gli enterococchi sono una causa comune di batteriemia, con E. faecalis come specie predominante, seguita da E. faecium. Poiché la resistenza all'ampicillina e...

L'obiettivo generale di questa procedura è identificare rapidamente le specie di enterococco da flaconi di emocoltura positivi mediante ibridazione fluorescente con acido peptidonucleico e ibridazione C due. Una volta che le emocolture sono state preparate e sottoposte a colorazione di Gram per confermare la presenza di enterococchi in coltura, i campioni vengono fissati su vetrini da microscopio per ibridazione PNA FISH. Successivamente, i vetrini vengono incubati con sonde PNA specifiche per gli organismi di interesse.Dopo l'ibridazione delle sonde, si esegue un lavaggio stringente per rimuovere l'eccesso di sonda non ibridata. Si aggiunge un mezzo di montaggio ai vetrini, che vengono quindi sigillati con coprioggetti. Le specie di enterococco presenti nel campione possono essere identificate mediante microscopia a fluorescenza.Questo protocollo di identificazione PNA Fish è unico perché fornisce un metodo rapido e specifico per l'identificazione di enterococco proveniente da paralisi. Incubare due flaconi per emocoltura, uno aerobico e uno anaerobico, contenenti sangue venoso prelevato da un paziente sospetto di sepsi, in uno strumento automatizzato per emocolture a 35 gradi Celsius. Una volta che l'apparecchio indica di aver rilevato una crescita microbica, rimuovere il flacone e agitare delicatamente i flaconi per emocoltura per risospendere uniformemente i batteri.Quindi, utilizzando una siringa sterile e un ago, trasferire asetticamente circa cinque millilitri di sangue da ciascuna bottiglia in un tubo distinto con tappo a vite. Una volta assegnati tutti i campioni, utilizzare una pipetta sterile per trasferire una goccia di sangue da ciascun tubo su un vetrino da microscopio in vetro separato. Lasciare asciugare l'intero vetrino all'aria per circa 15 minuti.Successivamente, una volta che il vetrino è completamente asciutto, immergerlo nel metanolo per fissare il campione. Dopo che i vetrini sono stati fissati, lavarli ed eseguire una colorazione Gram standard per determinare la morfologia degli organismi presenti in ciascuna coltura ematica. Esaminare i vetrini colorati utilizzando un microscopio con obiettivo ad immersione in olio.Un'eventuale specie di *Caucas* apparirà come cocchi gram-positivi generalmente assemblati in coppie o brevi catene. Posizionare una goccia di soluzione fissante nella cavità di un vetrino da microscopio per analisi P e pesce. Mescolare delicatamente il tubo di emocoltura da sottoporre a test.Quindi trasferire 10 microlitri di coltura sulla goccia di soluzione fissativa ed aspirare e rilasciare più volte per emulsionare il campione. Posizionare i vetrini su una piastra riscaldante a 55 gradi Celsius per 20 minuti per fissare gli strisci in ogni test. Assicurarsi di includere vetrini di controllo positivo e negativo per la valutazione della qualità del saggio.Lestrini di controllo per calloso possono essere acquistati da un fornitore Van DX oppure preparati utilizzando colture di riferimento. Una volta pronto lo striscio, aggiungere una goccia di EFI callous O-E-P-N-A nel pozzetto contenente il campione ematico in coltura, nonché nei pozzetti di controllo positivo e negativo. Per evitare la contaminazione della soluzione madre della sonda, accertarsi che la punta del flacone con contagocce non entri in contatto con lo striscio ematico.Posizionare un coprioggetto sopra il campione, avendo cura di non creare bolle d'aria. Quindi incubare il vetrino su un blocco riscaldante a 55 gradi Celsius per 30 minuti. Dopo l'incubazione, per consentire l'ibridazione del PNA, inserire i vetrini in un portavetrini.Immergere il portavetrino caricato in una vaschetta di colorazione contenente soluzione di lavaggio preriscaldata a 55 gradi Celsius. Rimuovere l'eccesso di PNA dal campione e staccare delicatamente il coprioggetto agitando il vetrino nel tampone o utilizzando pinzette. Incubare il vetrino a 55 gradi Celsius nella soluzione di lavaggio per 30 minuti.Quindi rimuovere il vetrino dalla vaschetta di colorazione e lasciarlo asciugare all'aria. Una volta che il vetrino è asciutto, aggiungere una goccia di mezzo di montaggio a temperatura ambiente sul vetrino e posizionare con attenzione un coprioggetti sul campione. Esaminare i vetrini al microscopio a fluorescenza utilizzando un filtro a doppia banda entro due ore dalla preparazione.Utilizzando questo metodo, iffy, calloso, mostrato in verde a sinistra, può essere distinto da eum in rosso. Nel pannello centrale a destra si osserva un risultato negativo. Tre aspetti da ricordare per ottenere risultati soddisfacenti sono che le temperature dello strumento devono essere mantenute alle temperature impostate.È necessario seguire attentamente la procedura di colorazione come indicato nel foglietto illustrativo. Infine, è fondamentale disporre di un operatore esperto che esegua un'analisi accurata del vetrino. Questo protocollo è utile per prendere decisioni terapeutiche nel trattamento della sepsi causata da enterococco.Grazie per aver guardato e buona fortuna con i vostri esperimenti.

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Immunologia e Infezioni

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Un giorno Scheme flusso di lavoro per batterica Rilevazione dei patogeni e test di resistenza antimicrobica dalle emocolture

Abbiamo recentemente riportato un nuovo approccio per generare sonde DNAzyme fluorogenici che possono essere applicati per impostare un semplice, "mix-e-leggere" test di fluorescenza per la rilevazione batterica. Queste sonde di DNA specifiche catalizzare il clivaggio di un cromoforo-modificato DNA-RNA chimerico substrato in presenza della miscela grezza extracellulare (CEM) prodotta da un batterio specifico, così traducendo rilevamento batterica nella generazione del segnale di fluorescenza.

Rilevazione di batteri utilizzando DNAzimi fluorogenici

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Rapida identificazione dei batteri Gram-negativi dal sangue brodo di coltura Uso MALDI-TOF

Una rapida preparazione pellet batterico da una emocoltura positiva può essere utilizzato come campione per le applicazioni quali l'identificazione mediante MALDI-TOF, colorazione di Gram, test di sensibilità agli antibiotici e test di PCR-based. I risultati possono essere tempestivamente ai medici di migliorare la prognosi dei pazienti affetti da infezioni del sangue.

Preparazione di un Sangue cultura pellet per il Rapid batterica identificazione e test di sensibilità agli antibiotici

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Scopri l'identificazione rapida di Enterococcus da emocolture con PNA FISH. Questo protocollo di 1,5 ore utilizza sonde fluorescenti e microscopia per diagnosticare infezioni del sangue e guidare terapie tempestive contro la sepsi.

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