Creazione del Modello reversibile Rat colestatico
21 maggio 2011
Colestasi è una condizione clinica comunemente incontrate dai chirurghi e gastroenterologi. Creazione di un modello reversibile ratto colestatico può essere difficile in vista della taglia più piccola e unica anatomia hepatopancreatobiliary nei ratti. In questo articolo il video dimostra la creazione di un modello colestatico reversibile.
Creazione di un modello ratto reversibile di colestasi. Salve a tutti. Sono un specializzando in Chirurgia Generale presso l'Ospedale e i Centri Medici di Providence a Southfield, Michigan.
Oggi dimostrerò la creazione di un modello reversibile di ratto con colestasi. Il ratto viene anestetizzato utilizzando isoflurano nella camera e successivamente con una maschera. Durante l'intervento, si usa un tubo in poliestere con un diametro esterno di 0,9 millimetri e un diametro interno di 0,6 millimetri, con un'estremità aperta e l'altra sigillata. Gli strumenti utilizzati includono un set standard di strumenti microchirurgici per ratto, spatole oftalmiche, bastoncini di ovatta e nylon 8-0. L'intervento viene eseguito utilizzando un microscopio operatorio.
Alternativamente, può essere eseguito utilizzando loupes chirurgici. Qui viene applicato un campo operatorio stabile. Questa procedura viene eseguita rispettando tutte le precauzioni sterili.
Si pratica un'incisione mediana di due centimetri a partire dallo sterno zip. I tessuti sottocutanei e la fascia vengono aperti con le forbici. Qui viene aperto il peritoneo, esponendo il fegato.
Assicurare l'emostasi utilizzando una cauterizzazione manuale. Questa è la porzione mediana e il lobo sinistro del fegato. Anatomia biliare del ratto. Questo è un diagramma schematico dell'anatomia biliare del ratto.
Il fegato del ratto è diviso in lobi mediano destro, sinistro e caudato. Questo è il nu e lo stomaco, e questa è la via biliare. Qui si osserva che una porzione significativa della via biliare non è associata alla vena porta e all'arteria epatica.
È questa porzione del dotto biliare che viene utilizzata per l'aggancio e la creazione della colangite ostruttiva. I lobi epatici vengono retratti utilizzando un retraore a pinza e un bastoncino di cotone per tirare verso il basso il num. Il dotto biliare viene quindi agganciato mediante uno strumento microchirurgico in prossimità delum.
Questo è lo stesso passaggio di aggancio del dotto biliare, che viene dimostrato in un diverso modello di ratto. Ancora una volta, si tratta dello stesso passaggio di aggancio del dotto biliare, registrato dall'esterno del microscopio operatorio. Per la creazione della colestasi, un filetto polisub suture viene quindi passato al di sotto del dotto biliare e il dotto biliare viene messo in trazione.
Questo è il dotto biliare sotto trazione. Questa è una vista ingrandita. Il dotto biliare viene aperto qui.
Il bordo del tubo poli viene quindi inserito in questo dotto biliare. Utilizziamo uno strumento microchirurgico per alimentatori a tubo per assistenza in questo procedimento. È necessario fare attenzione a inserire delicatamente il tubo.
Viene quindi praticata un'apertura nel dotto biliare prossimale. Un filo di sutura in nylon numero otto viene quindi passato attraverso questa apertura. Il filo di sutura ATO viene quindi legato con tre nodi quadrati per fissare il tubo in posizione.
Viene creata una seconda finestra al di sotto del dotto biliare prossimale, vicino al primo punto di sutura. Un altro filo di sutura ATO viene utilizzato per fissare il tubo in posizione prossimale. Successivamente, viene praticata una finestra nella parte distale del dotto biliare e il filo di sutura ATO viene fatto passare attraverso di essa.
Questo viene utilizzato inizialmente per legare il dotto biliare. Il punto viene quindi avvolto intorno al tubo e annodato intorno ad esso, assicurando così saldamente il tubo. Il punto viene tagliato qui; successivamente, il punto di trazione viene rimosso.
Qui stiamo eseguendo nuovamente uno zoom indietro. Il tubo viene quindi riposizionato all'interno della cavità peritoneale e disposto in posizione confortevole. L'addome viene quindi lavato utilizzando due ml di soluzione fisiologica.
Il liquido viene quindi drenato utilizzando una garza due per due. Viene quindi effettuata un'ultima verifica per confermare la corretta e confortevole posizione del tubo e l'emostasi prima della chiusura dell'addome. La fascia viene chiusa con una sutura continua in poliattina 5-0.
La cute viene quindi chiusa con punti di sutura dermici interrotti. Il rigurgito della colestasi viene invertito addestrando il cubo di poliestere nell'odume. L'inversione della colestasi viene dimostrata nel ratto nello stesso contesto. Qui. La cute e la fascia vengono tagliate con le forbici.
Il fegato viene retratto e si esercita una trazione sul retto. Con i bastoncini di cotone, identifichiamo un punto nel retto in cui posizionare comodamente il tubo in poliestere. Successivamente, posizioniamo suture a scoppio con filo 8/0 o nylon attorno al sito precedentemente selezionato per l'inserimento del tubo.
Assicuriamo che vengano prelevati campioni del muscolo sieroso durante ogni punto di sutura. Il tubo in polietilene (NEP) viene quindi estratto dalla cavità peritoneale. Nei casi in cui il tubo sia stato lasciato in sede per un periodo più lungo, potrebbe esserci una notevole adesione tissutale o adesione mentale attorno al tubo, che dovrà essere delicatamente liberata.
Il tubo viene quindi tagliato con le forbici sopra un tampone per raccogliere il drenaggio biliare. Nei casi in cui il tubo è stato lasciato in sede per un periodo più lungo, si osserva una quantità significativa di bile che fuoriesce. Quando il tubo viene aperto, il duramadre viene quindi inciso al centro del punto di sutura con filo a impulsi, utilizzando le forbici, assicurandosi che tutta la spessore del duramadre sia stato completamente aperto.
Il tubo viene quindi inserito nel nu e verifichiamo che giaccia comodamente e sia allineato nella direzione corretta. La sutura di fissaggio viene quindi stretta con tre nodi quadrati per ancorare il tubo nel dynam. La ferita viene poi irrorata per rimuovere la bile, che potrebbe essersi fuoriuscita durante la procedura, e l'ADOS viene quindi chiuso per assicurare che il tubo giaccia comodamente e che vi sia un'adeguata emostasi prima della chiusura.
Dimostrazione del drenaggio biliare qui, solo a scopo dimostrativo, stiamo estraendo il tubo dal Jordan per dimostrare che c'è un drenaggio libero di bile dal tubo. Applicazione di questo modello, applicazione di questo modello. Questo modello può essere utilizzato per studiare le alterazioni fisiologiche, patologiche e istologiche del sistema biliare e del tratto gastrointestinale associate alla colestasi. Questo modello può essere impiegato per studiare gli effetti della colestasi sull'intervento chirurgico epatico e può inoltre essere utilizzato per analizzare i cambiamenti dello stato nutrizionale associati alla colestasi.
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Panoramica
Questo articolo video dimostra la creazione di un modello ratto di colestasi reversibile, essenziale per lo studio della colestasi, una condizione spesso riscontrata in ambito clinico. La procedura prevede tecniche anestesiologiche specifiche e strumenti microchirurgici adatti all'anatomia unica dei ratti.
Componenti Chiave dello Studio
Area della Scienza
- Neuroscienze
- Gastroenterologia
- Tecniche chirurgiche
Sfondo
- La colangite è una condizione clinica che altera la funzione epatica.
- La creazione di modelli animali per la colangite può risultare complessa a causa delle differenze anatomiche.
- I ratti sono comunemente utilizzati nella ricerca, ma presentano sfide specifiche.
- I modelli reversibili permettono una migliore comprensione e terapia della colangite.
Scopo dello studio
- Dimostrare un metodo per creare un modello reversibile di colestasi nei ratti.
- Fornire una guida visiva ai ricercatori sulle tecniche chirurgiche.
- Migliorare la comprensione della colestasi e delle sue implicazioni.
Metodi Utilizzati
- I ratti vengono anestetizzati utilizzando isoflurano.
- Per la procedura viene utilizzato un tubo di poliestere.
- Vengono impiegati strumenti microchirurgici standard.
- La procedura viene eseguita sotto un microscopio operatorio.
Risultati principali
- Il metodo crea con successo un modello di colestasi reversibile.
- Le tecniche dimostrate sono riproducibili in un ambiente di laboratorio.
- La documentazione visiva facilita la comprensione del processo chirurgico.
- Sono evidenziate potenziali applicazioni nella ricerca futura sulla colestasi.
Conclusioni
- Il modello ratto con colestasi reversibile è uno strumento prezioso per la ricerca.
- Tecniche appropriate possono facilitare risultati migliori negli studi.
- Questo modello può portare a progressi nella comprensione della colestasi.
Domande frequenti
Rilevanza Industriale del Progetto
I modelli reversibili di colestasi nel ratto permettono una riduzione del rischio meccanicistica degli interventi epatobiliari, fornendo un sistema rilevante per la malattia in cui studiare i cambiamenti fisiologici e patologici associati a un flusso biliare compromesso. Questo approccio supporta la validazione degli obiettivi terapeutici e lo sviluppo di saggi per strategie terapeutiche rivolte alle complicanze legate alla colestasi nella ricerca chirurgica e gastrointestinale. Il modello aumenta la fiducia predittiva nella valutazione preclinica di interventi che influenzano la funzione biliare e lo stato nutrizionale.
Applicazioni Strategiche nella Ricerca e Sviluppo in Biopharma
Scoperta Precoce e Validazione del Bersaglio
- Valore scientifico: Consente l'analisi di ipotesi terapeutiche relative all'ostruzione delle vie biliari e alla fisiopatologia della colostasi.
- Valore operativo: Fornisce un sistema reversibile per la validazione funzionale di bersagli nelle vie epatopancreaticobiliari.
Sviluppo di screening e saggi
- Valore scientifico: Supporta la preparazione di sistemi biologici validati per la valutazione del drenaggio biliare e delle risposte epatiche.
- Valore operativo: Facilita la standardizzazione dei saggi mediante la creazione chirurgica riproducibile di colestasi e la sua inversione.
Ricerca Translazionale e Preclinica
- Valore scientifico: Offre un allineamento rilevante per lo studio dei cambiamenti nutrizionali, fisiologici e istologici nel tratto gastrointestinale durante la colostasi.
- Valore operativo: Permette una continuità dalla scoperta alla validazione preclinica di interventi sugli esiti chirurgici epatici.
Integrazione di Pipeline e Flusso di Lavoro
Il modello si integra nei flussi di lavoro della biologia della scoperta supportando la verifica delle ipotesi sui meccanismi della colangite e consentendo una valutazione quantitativa dei cambiamenti biliari e gastrointestinali.
- Biologia della scoperta: Supporta la chiarificazione dei percorsi e la riduzione del rischio biologico dei bersagli coinvolti nella regolazione del flusso biliare.
- Screening: Garantisce la prontezza del saggio attraverso la creazione e il ripristino standardizzati dello stato colostatico per la valutazione dei composti.
- Analisi: Fornisce misurazioni quantitative di variabili dipendenti come il drenaggio biliare, lo stato nutrizionale e il punteggio istologico.
- Ricerca traslazionale: Si collega alla continuità preclinica modellando gli effetti della colostasi su interventi chirurgici epatici maggiori.
- Riutilizzo aziendale: Rappresenta una capacità riutilizzabile per test iterativi di interventi terapeutici in diversi studi.
Impatto Operativo ed Aziendale
- Valore scientifico: Affidabilità predittiva nella validazione degli obiettivi grazie a un'analisi meccanicistica dei cambiamenti fisiologici indotti dalla colangite.
- Valore operativo: Standardizzazione e riproducibilità mediante un modello chirurgico reversibile con protocollo di inversione definito.
- Valore strategico: Miglioramento delle decisioni di avanzamento o interruzione riducendo il rischio biologico in fase avanzata nei programmi epatobiliari.
- Impatto sul portafoglio: Prioritizzazione corretta rispetto al rischio basata sulle risposte del sistema rilevanti per la malattia ai candidati terapeutici.
Considerazioni sull'implementazione
- Richiede competenze di microchirurgia e l'uso del microscopio operatorio per una manipolazione precisa dei dotti biliari.
- Richiede strumentazione specializzata, inclusi tubi in poliestere, suture in nylon e strumenti microchirurgici.
- Necessita di una standardizzazione condivisa tra i team delle tecniche chirurgiche e dei protocolli di cura postoperatoria.
- Comporta considerazioni di adattamento a causa dell'anatomia epatopancreatobiliare unica del ratto.
- I limiti pratici includono la complessità tecnica della cannullazione del dotto biliare e della procedura di inversione.
