Name: Creazione del Modello reversibile Rat colestatico (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-21T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Impara a creare un modello colestatico reversibile nel ratto utilizzando tecniche microchirurgiche e anestesia con isoflurano. Questo metodo consente di studiare la fisiopatologia della colestasi e le sue implicazioni cliniche.

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1. Rat anatomia biliare Il diametro del condotto biliare e la lunghezza media è stato di 1 mm e 29 mm, rispettivamente. La distanza media tra il piloro e la papilla duodenale era di 28 mm. Ci sono due dotti pancreatici principali che si aprono nel dotto biliare - il condotto anteriore si apre sul lato sinistro e il condotto posteriore si apre sul lato destro. Oltre a questi canali principali, una serie di canali minori che drenano tutte e tre le parti del pancreas aperta direttamente al dotto biliare 6. 2. Tecnica Tutti gli esperimenti sugli animali sono stati eseguiti in accordo con il National Institutes of linee guida Salute per la ricerca etica e sono stati approvati dal comitato di ricerca dell&#39;istituzione e Cura Comitato degli animali. Maschi Sprague-Dawley di 8 settimane sono stati utilizzati per questa dimostrazione. I ratti sono stati ottenuti da Charles River Laboratories a Wilmington, MA e tutti sono stati oltre 300 grammi. Ratti ha avuto accesso alla dieta standard di laboratorio e sono stati alloggiati insieme in condizioni standard di laboratorio. I ratti sono stati anestetizzati con isofluorane inizialmente e tenute sotto anestesia durante l&#39;intervento chirurgico con isofluorane attraverso una maschera. Una linea mediana incisione di 2 cm è stata fatta a partire dal xiphisternum. Una volta che la fascia è stata aperta, i lobi del fegato sono stati retratto cranialmente con arrotolatore uno Sen, e il duodeno era ritirato caudalmente con Q-Tips. Il dotto biliare è stato identificato come una struttura tubolare entrare nel duodeno. Il dotto biliare è stato messo sotto tensione e in parte a cielo aperto. Un tubo in polietilene sterile 5 cm di lunghezza con un diametro interno di 0,6 mm e un diametro esterno di 0,9 mm è stata utilizzata. Una fine di questo tubo è stato termosaldato e l&#39;altra estremità era dolcemente smussati. La fine smussato è stato poi passato nel dotto biliare. Questo è stato fissato in posizione con 8-0 punti di sutura in nylon sia prossimale e distale per l&#39;apertura del dotto biliare. Il tubo rimanenti insieme con l&#39;estremità sigillata è stata posta nella cavità peritoneale. La sede operativa è stata irrigata con soluzione fisiologica. L&#39;addome è stato poi chiuso in 2 strati, con sutura poliglactina 4-0. La linea alba si è chiusa con sutura continua e le suture interrotte cutanea sono stati collocati. Colla pelle è stata poi applicata sulla pelle. I ratti sono stati autorizzati a recuperare in condizioni di laboratorio standard con il monitoraggio quotidiano del peso corporeo per assicurare una corretta idratazione. Per l&#39;operazione di inversione colestasi, i ratti sono stati anestetizzati con isofluorane come descritto in precedenza. L&#39;addome è stato aperto il sito di incisione precedente. Il tubo è stato identificato e portato fuori dalla cavità peritoneale. Aderenze omento attorno al tubo vengono liberati mediante dissezione smussa e taglienti. Un sito nel duodeno è stato poi identificato per un posizionamento confortevole del tubo duodenostomia. Una sutura stringa borsa, 2-3 mm di diametro, è stato poi messo in nylon con 8-0. Il duodeno è stato poi inaugurato all&#39;interno di questa sutura stringa borsa. La fine sigillata del tubo è stato poi tagliato a misura appropriata. Libero flusso della bile è stata assicurata. Questa estremità del tubo è stato poi messo nel duodeno e la sutura stringa di borsa è stato serrato. L&#39;addome era irrigata e chiuso a strati. In uno studio precedente, in cui choledochoduodenostomy è stata effettuata utilizzando una tecnica diversa, i topi erano sopravvissuti per 12 settimane, i topi erano sani durante quel periodo. Anche questo studio ha confermato l&#39;inversione di cambiamenti biochimici e istologici dopo choledochoduodenostomy nei ratti sottoposti ad occlusione del dotto biliare per un periodo di 2 settimane 7.

<ol><li>Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+nutritional+status+associated+with+obstructive+jaundice+and+biliary+drainage+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Clin+Nutr%22%5BJournal%5D)">Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats.</a> Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).</li>
<li>Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutrophil-mediated+sinusoidal+endothelial+cell+injury+after+extensive+hepatectomy+in+cholestatic+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats.</a> Hepatology. 25, 636-641 (1997).</li>
<li>Abe, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kupffer+cell-derived+interleukin+10+is+responsible+for+impaired+bacterial+clearance+in+bile+duct-ligated+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice.</a> Hepatology. 40, 414-423 (2004).</li>
<li>Saiki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preoperative+internal+biliary+drainage+is+superior+to+external+biliary+drainage+in+liver+regeneration+and+function+after+hepatectomy+in+obstructive+jaundiced+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surg%22%5BJournal%5D)">Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats.</a> Ann Surg. 230, 655-662 (1999).</li>
<li>Subhas, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+methylprednisolone+on+warm+ischemia-reperfusion+injury+in+a+cholestatic+rat+liver%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Surg%22%5BJournal%5D)">Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver.</a> Am J Surg. 199, 377-380 (2010).</li>
<li>Kara, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+anatomical+study+on+the+rat+pancreas+and+its+ducts+with+emphasis+on+the+surgical+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Anat%22%5BJournal%5D)">The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach.</a> Ann Anat. 187, 105-112 (2005).</li>
<li>Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Choledochoduodenostomy+in+the+rat+with+obstructive+jaundice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice.</a> J Surg Res. 23, 321-331 (1977).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi dichiarati.

Colestasi porta ad una miriade di cambiamenti nel sistema gastrointestinale. Gli studi sono stati fatti guardando i cambiamenti nel sistema immunitario e lo stato nutrizionale. Colestasi 1-3 possono influenzare gli esiti di interventi di chirurgia epatica. Sono stati condotti studi per migliorare gli esiti di interventi chirurgici epatica in presenza di colestasi. 4-5 Con il miglioramento della medicina e della ricerca, ulteriori studi saranno fatto su colestasi. Quindi è necessario avere un buon m...

creazione del modello reversibile rat colestatico

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Colestasi è una condizione clinica comunemente incontrate dai chirurghi e gastroenterologi. Colestasi può causare diversi cambiamenti fisiologici e influenzano lo stato nutrizionale e risultati chirurgici. Studio delle alterazioni fisiopatologiche che si verificano nel fegato e altri organi è di importanza. Vari studi sono stati condotti in modelli di ratto colestatico. Abbiamo usato un modello reversibile ratto colestatico nel nostro recente studio guardando il ruolo di metilprednisolone nel danno da riperfusione ischemia. Varie tecniche per la creazione di un modello reversibile colestatico sono stati descritti. Creazione di un modello reversibile ratto colestatico può essere difficile in vista della taglia più piccola e unica anatomia hepatopancreatobiliary nei ratti. In questo articolo il video dimostra la creazione di un modello colestatico reversibile. Questo modello può essere utilizzato in vari studi, come ad esempio guardando i cambiamenti nutrizionali, fisiologici, patologici, alterazioni istologiche e immunologiche nel tratto gastrointestinale. Questo modello può essere utilizzato anche per vedere gli effetti di colestasi e vari interventi terapeutici sui principali interventi di chirurgia epatica.

Colestasi è una condizione clinica comunemente incontrate dai chirurghi e gastroenterologi. Creazione di un modello reversibile ratto colestatico può essere difficile in vista della taglia più piccola e unica anatomia hepatopancreatobiliary nei ratti. In questo articolo il video dimostra la creazione di un modello colestatico reversibile.

Creazione del Modello reversibile Rat colestatico

La colestasi è una condizione clinica comunemente riscontrata sia dai chirurghi che dai gastroenterologi. La colestasi può causare varie alterazioni fisiologiche e...

Creazione di un modello ratto reversibile di colestasi. Salve a tutti. Sono un specializzando in Chirurgia Generale presso l'Ospedale e i Centri Medici di Providence a Southfield, Michigan.Oggi dimostrerò la creazione di un modello reversibile di ratto con colestasi. Il ratto viene anestetizzato utilizzando isoflurano nella camera e successivamente con una maschera. Durante l'intervento, si usa un tubo in poliestere con un diametro esterno di 0,9 millimetri e un diametro interno di 0,6 millimetri, con un'estremità aperta e l'altra sigillata. Gli strumenti utilizzati includono un set standard di strumenti microchirurgici per ratto, spatole oftalmiche, bastoncini di ovatta e nylon 8-0. L'intervento viene eseguito utilizzando un microscopio operatorio.Alternativamente, può essere eseguito utilizzando loupes chirurgici. Qui viene applicato un campo operatorio stabile. Questa procedura viene eseguita rispettando tutte le precauzioni sterili.Si pratica un'incisione mediana di due centimetri a partire dallo sterno zip. I tessuti sottocutanei e la fascia vengono aperti con le forbici. Qui viene aperto il peritoneo, esponendo il fegato.Assicurare l'emostasi utilizzando una cauterizzazione m

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L'interruzione del flusso biliare provoca un grave danno epatico colestatico infiammatorio con una caratteristica sequenza di alterazioni morfologiche tempo-dipendenti. Qui presentiamo un protocollo per la legatura chirurgica del dotto biliare comune nei topi che permette di indurre una forte risposta fibrotica dopo 21-28 giorni.

Bile Duct Ligation in topi: Induzione infiammatoria epatica Lesioni e fibrosi da colestasi ostruttiva

Indurre ipertrofia epatica rapida utilizzando associando i fegato partizione e legatura della vena portale per un'epatectomia Staged (ALPPS) è stato proposto per la resezione dei tumori del fegato resecabile limite. Questo modello può delucidare i meccanismi coinvolti nell'ipertrofia rapido e permette di testare farmaci che promuovono o bloccano l'accelerazione della rigenerazione.

Modello del ratto della partizione del fegato associando i e legatura della vena portale per procedura di messa in scena epatectomia (ALPPS)

Qui descriviamo un metodo comune per indurre la lesione cronica del fegato nei topi di alimentazione di una dieta di colina-carenti ed etionina-completati (CDE). Dimostriamo che la sorveglianza sanitaria, aspersione epatica, isolamento e conservazione. Un corso di sei settimane di tempo può informare circa il disturbo al fegato, pathohistology, fibrosi, infiammatoria e risposte delle cellule progenitrici del fegato.

La murino colina-carenti, etionina-completati (CDE) dieta modello della lesione epatica cronica

Qui, presentiamo la legatura dei dotti biliari parziale come un modello chirurgico della lesione del fegato e la rigenerazione in roditori.

Legatura del dotto biliare parziale nel topo: un modello radiocomandato di colestasi ostruttiva localizzata

Qui descriviamo un protocollo dettagliato per misurazioni invasive dei parametri emodinamici, compreso pressione portale, flusso sanguigno intestinale ed emodinamica sistemica al fine di caratterizzare la sindrome iperteso in ratti.

Emodinamico invasivo caratterizzazione della sindrome Portal-ipertesi in ratti cirrotici

Il modello animale acuto di insufficienza epatica sviluppato nell'attuale studio presenta un'alternativa fattibile per lo studio di potenziali terapie. L'attuale modello utilizza l'effetto combinato di lesioni epatiche fisiche e farmacologiche e fornisce una finestra temporale adatta per studiare il potenziale di nuove terapie.

Generazione di un modello di ratto di insufficienza epatica acuta combinando il 70% di epatitectomia parziale e acetaminofene

Questo protocollo descrive un metodo comune e fattibile per indurre lesioni epatiche acute (ALI) tramite l'esposizione di CCl4 attraverso un tubo orogastrico. L'esposizione a CCl4 induce ALI attraverso la formazione di specie reattive dell'ossigeno durante la sua biotrasformazione nel fegato. Questo metodo viene utilizzato per analizzare la fisiopatologia di ALI ed esaminare diverse strategie eaptoprotettive.

Indurre lesioni acute al fegato nei ratti tramite Carbon Tetrachloride (CCl4) Esposizione attraverso un tubo orogastrico

Modelli animali per la pancreatite acuta grave consentono lo studio dei cambiamenti fisiopatologici nella fase iniziale, facilitando l'osservazione dell'evoluzione degli eventi infiammatori. Qui forniamo un protocollo per l'induzione della pancreatite biliare acuta grave mediante infusione retrograda di taurocolato di sodio nel dotto pancreatico di topi C57BL/6 anestetizzati.

Pancreatite acuta grave indotta da taurocolato di sodio nei topi C57BL/6

La pancreatite cronica (CP) è una malattia caratterizzata da infiammazione e fibrosi del pancreas, spesso associata a dolori addominali intrattabili. Questo articolo si concentra sul perfezionamento della tecnica per generare un modello murino di CP tramite infusione del dotto biliare con acido 2,4,6 -trinitrobenzene solfonico (TNBS).

Un modello murino per la pancreatite cronica tramite infusione di TNBS del dotto biliare

Un modello murino di pancreatite acuta grave è descritto qui. La procedura qui presentata è molto rapida, semplice e accessibile, consentendo così potenzialmente lo studio dei meccanismi molecolari e dei diversi interventi terapeutici nella pancreatite acuta in modo conveniente.

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Abbiamo stabilito un modello murino di fibrosi epatica cronica, che fornisce un modello animale adatto per lo studio meccanicistico della fibrosi epatica indotta da virus dell'atresia biliare (BA) e una piattaforma per futuri trattamenti BA.

Un modello murino di fibrosi epatica cronica per lo studio dell'atresia biliare

Impara a creare un modello colestatico reversibile nel ratto utilizzando tecniche microchirurgiche e anestesia con isoflurano. Questo metodo consente di studiare la fisiopatologia della colestasi e le sue implicazioni cliniche.

Creazione del Modello reversibile Rat colestatico

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