Name: Morris Maze prova dacqua per deficit di apprendimento e memoria in topi modello della malattia di Alzheimer (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-07-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Impara il test del labirinto di Morris per valutare apprendimento e memoria dipendenti dall'ippocampo nei topi. Questo metodo neurobiologico aiuta a studiare deficit cognitivi e effetti dei trattamenti.

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Questo lavoro è stato sostenuto dal Canadian Institutes of Health Research (CIHR), la Famiglia Townsend, e Jack Brown e Famiglia Alzheimer Research Foundation (a WAS). WS è titolare del Canada Research Chair nella malattia di Alzheimer. PL è stato sostenuto da un NSERC Premio Alexander Graham Bell Canada Graduate Research Borsa di studio di dottorato e un Michael Smith Fondazione per Studentship Graduate Research Salute Senior.

1. Preparazione <ol><li> Attrezzature di preparazione <ol><li> Ottenere una vasca circolare con un diametro di 150 centimetri e una profondità di 50 cm (Fig. 1). Se si utilizzano topi neri, una piscina bianco deve essere utilizzata, se si utilizzano topi bianchi, uno stagno nero dovrebbe essere usato. </li><li> Disporre la stanza in modo tale che l'animale in fase di test non può vedere il sperimentatore durante il test. Questo può essere realizzato con tende o divisori. </li><li> Luogo spunti alto contrasto spaziale per la stanza, e / o l'interno della piscina in un luogo che sarebbe al di sopra della superficie dell'acqua. </li><li> Inserire una piattaforma di 10cm di diametro in piscina - bianco per una piscina bianca, plexiglass trasparente per una piscina nera. Riempire la piscina con acqua fino a quando la piattaforma è di 1 cm al di sopra della superficie dell'acqua. Lasciate che l'acqua a temperatura ambiente (22 ° C). A seconda della temperatura dell'acqua potrebbero essere necessari 1-3 giorni, o in alternativa l'acqua calda possono essere aggiunti per accelerare il raggiungimento dell'equilibrio. </li></ol></li><li> Software per la preparazione <ol><li> Calibrare la piscina nel software di computer in modo la macchina fotografica in grado di creare informazioni fisiche distanza dal pixel-based informazioni. Dividere la piscina in 4 quadranti. Specificare la zona di piattaforma come zona variabile che può cambiare ad ogni prova. Creare 5 sottozone piattaforma - uno in ogni quadrante, e una al centro della piscina. Salvare la calibrazione e usarlo per i giorni di test rimanenti. (Vedi Fig. esempio. 2). </li><li> Impostare il tempo massimo di prova di 60 sec. Se il mouse si trova la piattaforma prima di questo momento, programmare il software per fermare il processo quando la piattaforma è stata trovata. </li><li> Specificare il programma per iniziare a tracciare automaticamente, quando lo sperimentatore esce dall'area di prova. Utilizzare qualsiasi "riflessione minimizzazione" delle opzioni del pacchetto software fornisce. </li><li> Traccia lunghezza del percorso, la latenza di fuga, e il tempo trascorso in ogni quadrante. </li></ol></li></ol> 2. Giorno 1: Piattaforma visibile <ol><li> Programma del computer <ol><li> Caricare la calibrazione piscina nel software di monitoraggio. </li><li> Creare 5 prove, con un inter-trial intervallo appropriato per l'esperimento. Programma la posizione della piattaforma e la direzione iniziando a variare con ogni prova. Vedi Tabella 1 per un protocollo di esempio. </li></ol></li><li> Procedura di prova <ol><li> Trasferire i topi dalle loro struttura alloggiativa nella stanza comportamento. Tenere il mouse in una zona dove non riescono a vedere la piscina o indizi spaziali. Lasciate che adattarsi al nuovo ambiente per almeno 30 minuti prima del test. </li><li> Mettere una bandiera sulla piattaforma per aumentare la sua visibilità. </li><li> Per iniziare il test, sollevare il mouse dalla gabbia casa dalla base della coda. Sostenere il mouse come lo si porta alla zona test. Sollevare il mouse alla base della coda, leggermente posizionare il mouse in acqua, di fronte al bordo della piscina. Presto lasciare l'area test. </li><li> Se il mouse si trova la piattaforma prima del 60 sec cut-off, permettere al topo di rimanere sulla piattaforma per 5 secondi poi tornare a casa sua gabbia. Se il mouse non trova la piattaforma, posizionare il mouse sulla piattaforma e permettono di rimanere lì per 20 secondi prima di tornare alla sua gabbia casa. </li><li> Ripetere l'operazione per tutti i mouse della pista. Iniziare ogni prova successiva con una posizione diversa piattaforma e la direzione di partenza, come avete programmato sul software. </li><li> Quando il test è completo, restituire i topi alla loro struttura alloggiativa. I topi sono asciugati e normotermia è assicurata prima di tornare a stabulario. </li><li> In preparazione per il giorno seguente, togliere la bandiera dalla piattaforma e aggiungere altra acqua alla piscina di immergere la piattaforma a 1 cm sotto la superficie. </li></ol></li></ol> 3. Giorni 2-5: Piattaforma Nascosto <ol><li> Programma del computer <ol><li> Caricare la calibrazione piscina nel software di monitoraggio. </li><li> Creare 5 prove, con un inter-trial intervallo appropriato per l'esperimento. Programma la posizione della piattaforma di rimanere nella stessa posizione in tutte le prove e giorni, ma hanno la direzione iniziale si differenziano ogni prova, ogni giorno. </li></ol></li><li> Procedura di prova <ol><li> Per i topi neri, aggiungere non tossico, bianco, vernice in polvere tempera alla piscina e mescolare accuratamente. Uso abbastanza vernice in modo che la piattaforma sommersa non è visibile dalla superficie dell'acqua. Per i topi bianchi, una piscina nera con acque limpide e una piattaforma di plexiglas trasparente dovrebbe essere usato. </li><li> Seguire i punti da 2.2.3 a 2.2.6. </li></ol></li></ol> 4. Giorno 6: Sonda di prova <ol><li> Programma del computer <ol><li> Caricare la calibrazione piscina nel software di monitoraggio. </li><li> Creare 1 prova con nessuna zona della piattaforma, e una direzione di partenza. La direzione di partenza più lontano dal quadrante piattaforma utilizzata per 2-5 giorni è preferibile. Impostare la lunghezza sentiero per 60 sec. </li></ol></li><li> Procedura di prova <ol><li> Rimuovere la piattaforma dalla piscina. </li><li> Seguire i punti da 2.2.3 a 2.2.6. </li></ol></li></ol> 5. Analisi dei dati <ol><li> Per ogni giorno e di ciascuno, la media del mouse di 5 studi per dare una sola lunghezza percorso e la latenza di fuga per ogni soggetto di prova. Calcolare l'errore combinato in modo appropriato. Per il giorno 6, semplicemente raccogliere la lunghezza del percorso, la latenza di fuga, e il tempo trascorso nel quadrante piattaforma per ogni mouse. </li><li> Se le differenze esistono tra i gruppi al giorno 1, è probabile un problema con la visione piuttosto che apprendimento e memoria. Procedere solo con l'analisi delle differenze se non si vedono il giorno 1. </li><li> Confrontare le curve di apprendimento per giorni 2-5 utilizzando statistiche appropriate per il set di dati. Una curva più ripida rappresenta acquisizione compito più veloce; una curva meno profonda rappresenta un deficit nella acquisizione delle attività. I dati dal giorno 2 al giorno 5 vengono analizzati utilizzando ANOWA. </li><li> Per il giorno 6, confrontare la percentuale di tempo trascorso nel quadrante piattaforma precedentemente appreso, utilizzando statistiche appropriate per il set di dati. Una percentuale più alta di tempo trascorso nel quadrante piattaforma viene interpretato come un più alto livello di ritenzione della memoria. </li></ol> 6. Rappresentante Risultati Abbiamo usato il test di Morris Water Maze di esaminare effetti dell'ipossia sul patogenesi dell'Alzheimer (7) e l'acido valproico (VPA) 's potenziale farmaceutica per il trattamento d. (6) in topi transgenici modello di AD. La Figura 3 è il risultato di rappresentanza abbiamo riportato nel nostro studio sull'effetto VPA sul deficit di memoria nel modello del mouse APP23 dC (6). Il giorno 1 (prove piattaforma visibile), non vi è alcuna differenza tra il VPA trattati e gruppi di controllo in latenza (Fig. 3A) e la lunghezza del percorso (Fig. 3A) che indica che entrambi i gruppi motore sono simili e le capacità visive. Da questo si assume i topi sono in grado di vedere la contrassegnato-piattaforma e gli spunti in ambiente circostante, e può fare il bagno accettabile. Per i giorni 2-5 (Giorno 1 a 4 di prove piattaforma nascosta) l'esempio mostra la differenza nella latenza fuga (Fig. 3C) e la lunghezza del percorso (Fig. 3D) tra i gruppi, suggerendo che i topi trattati con VPA risultati significativamente migliori rispetto ai controlli nel tempo. La sonda risultati pista l'ultimo giorno (giorno 6) mostrano che il numero di volte in cui i topi viaggiato nel terzo quadrante, in cui la piattaforma di nascosto era già piazzata, è risultata significativamente maggiore con il trattamento con VPA rispetto ai controlli (Fig. 3E). Questi dati indicano che il trattamento con VPA migliora significativamente i deficit di memoria visto in APP23 topi. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig1.jpg" alt="Figura 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 1"> Figura 1. L'installazione delle attrezzature per la giornata di test d'acqua Morris visibile piattaforma Maze. La piscina è al riparo dal sperimentatore con divisori. Indizi spaziali si trovano sulle pareti, e forse sul posto all'interno della piscina, al di sopra della superficie dell'acqua, se lo si desidera. La piscina è riempita con acqua pulita, con la piattaforma situata 1 cm sopra la superficie. Una bandiera è stato messo sulla piattaforma per migliorare la visibilità. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig2.jpg" alt="Figura 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 2"> Figura 2. Cattura dello schermo dal Qualsiasi-Maze ™ Video System Monitoraggio dimostrando di calibrazione piscina. La piscina è visto dall'alto da una telecamera in bianco e nero monitoraggio analogico con un digitalizzatore RTV24. Varie zone sono definite all'interno del software e la piscina totale è suddivisa in 4 quadranti. A, quinta zona piattaforma viene inserito, che può variare tra le prove, con cinque posizioni possibili: NW, NE, S, SE, o Centro. Una linea di calibrazione (linea spuntata sul centro) viene aggiunto per consentire al software per convertire i pixel in distanze distanze fisiche. <img src="/files/ftp_upload/2920/2920fig3.jpg" alt="Figura 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Figura 3"> Figura 3. Risultati rappresentativi per la Maze Acqua Morris. Il 7 mesi APP23 topi transgenici portatori del gene mutante umano svedese APP sono stati testati dopo un mese di giorno VPA (n = 30 topi) o soluzione di veicolo (n = 30 topi) iniezioni. (A) durante il primo giorno di test della piattaforma visibile, il VPA trattate e di controllo APP23 topi mostravano una latenza simile a fuggire sulla piattaforma visibile. P&gt; 0,05 da studente t-test. (B) Il VPA-trattamento e di controllo APP23 topi simili distanze nuoto prima di fuggire sulla piattaforma visibile nel test piattaforma visibile. P&gt; 0,05 da studente t-test. (C) Nei test piattaforma nascosta, VPA trattati APP23 topi ha rilevato una latenza più breve per uscire sulla piattaforma nascosto il 3 e il 4 ° giorno, p &lt;0,001 per ANOVA. (D) VPA APP23 topi trattati avevano una lunghezza più corta di nuoto prima di fuggire sulla piattaforma nascosto sul 3 ° e 4 ° giorno, P &lt;0,01 da ANOVA. (E) Nello studio sonda sul 6 ° giorno, il VPA trattati APP23 topi viaggiato nel terzo quadrante, in cui la piattaforma di nascosto era già piazzata, tempi significativamente più rispetto ai controlli. * P &lt;; 0,005 da studente t-test. (Adattato e ristampato da The Journal of Experimental Medicine 205, 2781-2789, 2008, Rockefeller University Press, originariamente pubblicato nel Exp Med J. doi:... 10.1084/jem.20081588) (6). <table border="1"><tbody><tr><td> </td><td colspan="2"> Giorno 1 </td><td> 2 ° giorno </td><td> 3 ° giorno </td><td> 4 ° giorno </td><td> 5 ° giorno </td><td> Giorno 6 </td></tr><tr><td></td><td> Piattaforma di posizione </td><td> Direzione di partenza </td><td colspan="4"> Piattaforma Località: SO A partire Località come segue: </td><td> Nessuna piattaforma. </td></tr><tr><td> Prova 1 </td><td> SW </td><td> S </td><td> W </td><td> N </td><td> N </td><td> E </td><td> N </td></tr><tr><td> Prova 2 </td><td> NO </td><td> N </td><td> S </td><td> W </td><td> E </td><td> S </td><td></td></tr><tr><td> Prova 3 </td><td> NE </td><td> S </td><td> N </td><td> E </td><td> W </td><td> W </td><td></td></tr><tr><td> Studio 4 </td><td> Centro </td><td> E </td><td> E </td><td> W </td><td> S </td><td> E </td><td></td></tr><tr><td> Prova 5 </td><td> SE </td><td> W </td><td> S </td><td> S </td><td> N </td><td> N </td><td></td></tr></tbody></table> Tabella 1. Campione di acqua labirinto * protocollo * Si noti come sia la posizione della piattaforma di partenza e cambiare direzione al giorno 1, mentre nei giorni 2-5 la posizione della piattaforma rimane costante mentre la direzione cambia di partenza. Il giorno 6, non esiste una piattaforma e un singolo trial. La direzione di partenza per il giorno 6 è più lontano dalla posizione della piattaforma precedente (SW) in modo che i topi devono percorrere una certa distanza prima di entrare nel quadrante piattaforma precedentemente apprese.

<ol><li>Morris, R. G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatial+localization+does+not+require+the+presence+of+local+cues%5BTitle%5D)+AND+%22Learning+and+Motivation%22%5BJournal%5D)">Spatial localization does not require the presence of local cues.</a> Learning and Motivation. 12, 239-260 (1981).</li>
<li>O'Keefe, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+the+hippocampal+place+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">A review of the hippocampal place cells.</a> Prog Neurobiol. 13, 419-439 (1979).</li>
<li>Scoville, W. B., Milner, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+recent+memory+after+bilateral+hippocampal+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurol+Neurosurg+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Loss of recent memory after bilateral hippocampal lesions.</a> J Neurol Neurosurg Psychiatry. 20, 11-21 (1957).</li>
<li>Eichenbaum, H., Stewart, C., Morris, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hippocampal+representation+in+place+learning%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Hippocampal representation in place learning.</a> J Neurosci. 10, 3531-3542 (1990).</li>
<li>Block, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+ischemia+and+behavioural+deficits%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Global ischemia and behavioural deficits.</a> Progress in Neurobiology. 58, 279-295 (1999).</li>
<li>Qing, H., He, G., Ly, P. T., Fox, C. J., Staufenbiel, M., Cai, F., Zhang, Z., Wei, S., Sun, X., Chen, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Valproic+acid+inhibits+Abeta+production%2C+neuritic+plaque+formation%2C+and+behavioral+deficits+in+Alzheimer%27s+disease+mouse+models%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Med%22%5BJournal%5D)">Valproic acid inhibits Abeta production, neuritic plaque formation, and behavioral deficits in Alzheimer's disease mouse models.</a> J Exp Med. 205, 2781-2789 (2008).</li>
<li>Sun, X., He, G., Qing, H., Zhou, W., Dobie, F., Cai, F., Staufenbiel, M., Huang, L. E., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+facilitates+Alzheimer%27s+disease+pathogenesis+by+up-regulating+BACE1+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Hypoxia facilitates Alzheimer's disease pathogenesis by up-regulating BACE1 gene expression.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , 18727-18732 (2006).</li>
<li>D'Hooge, R., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+the+Morris+water+maze+in+the+study+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Applications of the Morris water maze in the study of learning and memory.</a> Brain Research Reviews. 36, 60-90 (2001).</li>
<li>Brandeis, R., Brandys, Y., Yehuda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+the+Morris+Water+Maze+in+the+study+of+memory+and+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">The use of the Morris Water Maze in the study of memory and learning.</a> Int J Neurosci. 48, 29-69 (1989).</li>
<li>Lipp, H. P., Wolfer, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+modified+mice+and+cognition%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Genetically modified mice and cognition.</a> Curr Opin Neurobiol. 8, 272-280 (1998).</li>
<li>Sandi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+and+mechanisms+of+action+of+glucocorticoid+involvement+in+memory+storage%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plast%22%5BJournal%5D)">The role and mechanisms of action of glucocorticoid involvement in memory storage.</a> Neural Plast. 6, 41-52 (1998).</li>
</ol>

Tutti gli esperimenti sono stati condotti in conformità con l&#39;Università di cura degli animali Columbia britannica e il comitato Usa e le linee guida CIHR.

Età, sesso, specie, e le differenze ceppo influenza le prestazioni MWM (8). Gli studi indicano che i topi di età compresa hanno scarse prestazioni nella MWM, mentre i roditori maschi prestazioni migliori rispetto alle femmine, in più, flottante è più marcato nei topi rispetto ai ratti (9, 10). Pertanto, questi elementi dovrebbero essere equiparata in tutti i test. L&#39;evidenza suggerisce anche che gli animali hanno sottolineato eseguire più male nel MWM (11), quindi i fattori ambientali che possono causare stress, quali temperatura, luce e rumore, deve essere monitorata e mantenuta costante durante tutto il compito.

<table border="1"><tbody><tr><th> Nome del reagente </th><th> Azienda </th><th> Commenti (opzionale) </th></tr><tr><td> AnyMaze Video Tracking System </td><td> Azienda Stoelting </td><td></td></tr><tr><td> Tempera Pittura </td><td> Reeves &amp; Poole Gruppi </td><td> Bianco, in polvere </td></tr></tbody></table>

morris maze prova d&#39;acqua per deficit di apprendimento e memoria in topi modello della malattia di alzheimer

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

La Morris water maze (MWM) è stata istituita dal neuroscienziato Richard G. Morris nel 1981 al fine di testare l&#39;apprendimento ippocampo-dipendente, inclusa l&#39;acquisizione di dati spaziali memoryand memoria a lungo termine spaziale 1. Il MWM è una procedura relativamente semplice costituiti in genere da sei prove al giorno, il vantaggio principale è la differenziazione tra i spaziale (nascosto-piattaforma) e non-spaziale (visibile piattaforma) le condizioni 2-4. Inoltre, l&#39;ambiente di test MWM riduce le interferenze pista odore 5. Ciò ha portato il compito di essere ampiamente utilizzato nello studio della neurobiologia e neurofarmacologia di apprendimento e la memoria spaziale. Il MWM svolge un ruolo importante nella validazione di modelli di roditori per i disturbi neurocognitivi come la malattia di Alzheimer 6, 7. In questo protocollo abbiamo discusso la procedura tipica di MWM per l&#39;apprendimento e la memoria di test e analisi dati comunemente utilizzati nella malattia di Alzheimer nei topi modello transgenico.

Il Labirinto d&#39;acqua Morris è un compito comportamentale per testare dell&#39;ippocampo-dipendente apprendimento e la memoria. E &#39;stato ampiamente utilizzato nello studio della neurobiologia, neurofarmacologia e disturbi neurocognitivi in ​​modelli di roditori.

Morris Maze prova d&#39;acqua per deficit di apprendimento e memoria in topi modello della malattia di Alzheimer

Il Morris Water Maze (MWM) è stato introdotto per la prima volta dal neuroscienziato Richard G. Morris nel 1981 per testare l'apprendimento dipendente dall'ippocampo, inclusi...

L'obiettivo generale del seguente esperimento è testare l'apprendimento e la memoria dipendenti dall'ippocampo. Nel primo giorno, il topo viene addestrato a trovare una piattaforma rialzata contrassegnata da una bandierina, posizionata casualmente in una vasca piena di acqua trasparente, in modo che impari che il compito ha un punto di fuga raggiungibile. Come secondo passaggio, nei giorni successivi il topo viene addestrato immergendolo in una vasca piena di acqua opaca partendo da diverse posizioni, con la piattaforma sommersa e fissata in una posizione stabilita.Questo permette al topo di imparare la posizione della piattaforma utilizzando gli indizi circostanti. Successivamente, l'ultimo giorno la piattaforma viene rimossa e il percorso di nuoto del topo viene tracciato per un minuto al fine di valutare l'acquisizione del compito. In questo modo, si ottengono i risultati relativi all'apprendimento e alla memoria.Questo mostra deficit nell'apprendimento spaziale e nella memoria, in base alle latenze di fuga e alla lunghezza del percorso osservate nelle tre diverse condizioni di prova. Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti è che è relativamente semplice distinguere tra la condizione con piattaforma nascosta specifica e quella con piattaforma visibile non specifica. In generale, le persone nuove a questo metodo potrebbero incontrare difficoltà poiché il metodo è sensibile alla manipolazione sperimentale.È necessario assicurarsi che i topi non siano stressati durante le procedure, poiché ciò potrebbe influenzare i risultati. A dimostrare questa procedura saranno la dottoressa Kelly Bromley e le studentesse laureate Miss Sweden dei miei laboratori. Prima di tutto, fissare una piscina circolare. Se i topi sperimentali sono neri, utilizzare una piscina bianca; se i topi sono bianchi, utilizzare una piscina nera. Ora.Disporre la stanza con divisori in modo che gli animali in fase di test non vedano l'esperimentatore durante la procedura. Collocare indicazioni spaziali ad alto contrasto nella stanza e all'interno della piscina in una posizione che rimarrà al di sopra della superficie dell'acqua. Riempire la piscina con acqua e portarla in equilibrio alla temperatura ambiente.Quindi posizionare una piattaforma di 10 centimetri di diametro nella vasca, a un centimetro sopra la superficie dell'acqua, di colore bianco per una vasca bianca, o in plexiglass trasparente per una vasca nera. Calibrare la vasca nel software del computer in modo che la telecamera possa generare informazioni sulla distanza fisica a partire da dati basati sui pixel.Dividere il bacino in quattro quadranti. Specificare la zona della piattaforma come una zona variabile, che può cambiare in ogni prova. Quindi creare cinque sottozone della piattaforma, una in ciascun quadrante e una al centro del bacino.Salvare la calibrazione e utilizzarla per i giorni successivi del test. Successivamente, impostare il tempo massimo del tentativo a 60 secondi. Se il topo raggiunge la piattaforma entro questo intervallo, programmare il software in modo da interrompere il tentativo quando la piattaforma viene trovata.Specificare inoltre il programma per iniziare automaticamente il tracciamento quando l'operatore esce dall'area di prova. Utilizzare tutte le opzioni di riduzione dei riflessi fornite dal pacchetto software. Infine, tracciare il percorso, la lunghezza, la fuga, la latenza e il tempo trascorso in ciascun quadrante.Nel giorno del test, trasferire i topi dal loro ambiente di allevamento alla stanza per i comportamenti, in un'area in cui non possano vedere la piscina o i riferimenti spaziali. Lasciarli adattare al nuovo ambiente per almeno 30 minuti. Prima del test, caricare la calibrazione della piscina nel software di tracciamento.Crea cinque prove con un intervallo interprova appropriato, in modo che la posizione della piattaforma e la direzione di partenza varino in ciascuna prova. Posiziona una bandierina sulla piattaforma per aumentarne la visibilità. Per iniziare il test, solleva il topo dalla gabbia di partenza alla base della coda, sostenendolo durante il trasferimento nell'area di prova.Quindi posizionare delicatamente il topo nell'acqua rivolto verso il bordo della vasca. Lasciare rapidamente l'area di prova. Se il topo trova la piattaforma prima del limite di 62 secondi, permettergli di rimanere sulla piattaforma per cinque secondi, quindi riportarlo nella sua gabbia di mantenimento.Se il topo non trova la piattaforma, posizionare il topo sulla piattaforma e lasciarlo rimanere lì per 20 secondi prima di riportarlo nella sua gabbia di provenienza. Ripetere per tutti i topi del test. Iniziare ogni prova successiva con una posizione diversa della piattaforma e una direzione di partenza differente, secondo il software del programma.Al termine dei test, riportare i topi presso il loro allevamento in preparazione per il giorno successivo. Rimuovere la bandierina dalla piattaforma e aggiungere ulteriore acqua nella vasca per immergere la piattaforma di un centimetro sotto la superficie. Caricare la calibrazione della vasca nel software di tracciamento e creare cinque prove con un intervallo interprova appropriato.Quindi impostare la posizione della piattaforma in modo che rimanga nella stessa posizione durante tutte le prove e tutti i giorni, ma fare in modo che la direzione di partenza vari ad ogni prova di ogni giorno. Per i topi neri, aggiungere alla vasca una vernice tempera bianca non tossica in polvere e mescolare accuratamente. Utilizzare una quantità sufficiente di vernice in modo che la piattaforma sommersa non sia visibile dalla superficie dell'acqua.Procedere al test individuale dei topi nell'acqua come descritto in precedenza per la prova finale. Caricare la calibrazione della vasca nel software di tracciamento. Creare un'unica prova senza zona della piattaforma e con una singola direzione di partenza.Preferibilmente la direzione di partenza più lontana dal quadrante in cui era posizionata la piattaforma nei giorni due-cinque. Impostare inoltre la durata della prova a 60 secondi. A questo punto rimuovere la piattaforma dalla vasca e sottoporre ogni topo singolarmente alla prova in acqua come descritto in precedenza; calcolare la media delle cinque prove per ciascun topo, ottenendo un singolo valore di lunghezza del percorso e latenza di fuga per ogni soggetto in esame.Inoltre, analizzare e interpretare i dati come descritto nel manoscritto allegato utilizzando il labirinto acquatico di Morris. Topi transgenici PP 23 di sette mesi portatori del gene A PP umano con mutazione svedese sono stati sottoposti a test dopo un mese di iniezioni quotidiane di acido valproico o di soluzione veicolare durante il primo giorno dei test con piattaforma visibile. I topi PP 23 trattati con VPA e i controlli hanno mostrato una latenza simile per raggiungere la piattaforma visibile.I topi APP23 trattati con VPA e i controlli hanno percorso distanze simili a nuoto prima di raggiungere la piattaforma visibile. Nel test con piattaforma visibile e nei test con piattaforma nascosta del terzo e quarto giorno, i topi APP23 trattati con VPA hanno mostrato una minore latenza nel raggiungere la piattaforma nascosta. Al terzo e al quarto giorno, i topi APP23 trattati con VPA hanno percorso una distanza minore a nuoto prima di raggiungere la piattaforma nascosta.Nella prova di sonda del sesto giorno, rispetto ai topi del gruppo di controllo, i topi trattati con VPA e PP 23 hanno attraversato significativamente più volte il terzo quadrante in cui in precedenza era posizionata la piattaforma nascosta. Durante il tentativo di eseguire questa procedura, è importante ricordare di monitorare i fattori ambientali che potrebbero causare stress, come rumore, temperatura e luce. Dopo questa procedura, possono essere eseguiti altri metodi, come il condizionamento al timore contestuale e associato a stimoli specifici, per rispondere ad ulteriori domande, ad esempio se i deficit di apprendimento siano specifici dell’ippocampo o se facciano parte di un problema neurocognitivo più ampio, che potrebbe coinvolgere l’amigdala.

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Il labirinto ad acqua di Morris è un ben accettato strumento utilizzato per documentare il coinvolgimento dell'ippocampo in un compito comportamentale.

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Low-stress Learning percorso con la Maze Lashley III nel Mice

Acque poco profonde (Paddling) Varianti di test labirinto d&#39;acqua nei topi

Disturbi cognitivi derivanti dalla gestione radioterapeutico tumori cerebrali rappresenta una condizione clinica intrattabile che gli impatti negativamente la qualità della vita. La capacità di valutare criticamente gli interventi possibili per ameliorating indotto dalle radiazioni decrementa cognitiva dipende in ultima analisi la capacità di effettuare rigorose valutazioni quantitative della cognizione.

Quantificare Decrementa cognitivi causati da radioterapia craniale

In questo video, descriviamo il test del labirinto d'acqua di Morris con il trasferimento della piattaforma, un compito di navigazione utilizzato per studiare la memoria di lavoro nei roditori.

Il labirinto d'acqua con riposizionamento della piattaforma: un metodo per valutare la memoria di lavoro

Questo manoscritto descrive un protocollo di labirinto d'acqua Morris (MWM) su misura per l'uso con un modello murino di Alzheimer comunemente usato. L'MWM è ampiamente utilizzato nei modelli murini transgenici. L'implementazione di una procedura sensibile alla deformazione di fondo del modello murino è essenziale per rilevare le differenze di gruppo.

Morris water maze Test: Ottimizzazione per ceppo di topi e Ambiente di prova

Per studiare la malattia di co-morbidità di Alzheimer (AD) e la condizione ictus in un nuovo modello, tre compiti di comportamento sono descritte che valutare sia il controllo del motore e comportamenti cognitivi. Queste attività includono il compito fascio-passeggiata, compito cilindro e labirinto d'acqua di Morris.

Motore e ippocampale Dependent apprendimento spaziale e valutazione della memoria di riferimento in un transgenici ratto modello di malattia di Alzheimer con ictus

Qui presentiamo un protocollo per una prova specifica del topo di cognizione che non richiede nuoto. Questo test può essere utilizzato per distinguere con successo i topi traumatici e lesioni cerebrali indotte da impatto corticale controllato dai controlli di sangue.

Valutare l&#39;alterazione della memoria spaziale in un modello di topi di lesioni traumatiche del cervello usando un labirinto radiale

Qui, viene descritto un protocollo per condurre i test del labirinto d'acqua Morris per valutare la capacità di apprendimento e la memoria dei topi modello di malattia di Alzheimer e per valutare l'effetto dell'agopuntura manuale per il trattamento di loro è descritto.

Analisi della capacità di apprendimento e memoria in un modello di mouse malattia di Alzheimer utilizzando il Morris Water Maze

Vi presentiamo un metodo a basso costo di progettare e costruire una luce headstage pre-amplificatore sistema con registrazione simultanea neurali e la capacità di stimolazione. Questo dispositivo può essere impermeabilizzati utilizzare in animali nuoto.

Progettazione e Costruzione di un Headstage conveniente per simultanea Stimolazione Neurale e registrazione nel Labirinto d&#39;acqua

Impara il test del labirinto di Morris per valutare apprendimento e memoria dipendenti dall'ippocampo nei topi. Questo metodo neurobiologico aiuta a studiare deficit cognitivi e effetti dei trattamenti.

Morris Maze prova d'acqua per deficit di apprendimento e memoria in topi modello della malattia di Alzheimer

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