Macrodissezione del tessuto tumorale FFPE: una tecnica per ottenere tessuto tumorale specifico da campioni non colorati

Per iniziare la macrodissezione, prelevare un vetrino con un campione di tessuto. Inoltre, prelevare un vetrino di riferimento contenente lo stesso campione di tessuto e colorarlo utilizzando ematossilina ed eosina per la colorazione H&E.

Nelle cellule normali, l'ematossilina conferisce una colorazione blu agli acidi nucleici, mentre la controcolorazione dell'eosina mostra le proteine cellulari rosa. La colorazione blu intenso del nucleo aiuta a differenziare le cellule tumorali dalle cellule normali.

Sovrapporre il vetrino colorato H&E con il vetrino non colorato per allineare i campioni di tessuto. Individuare la parte contenente le cellule tumorali sul vetrino colorato con H&E. Contrassegnare l'area corrispondente sul vetrino non colorato.

Raschiare il tessuto desiderato dal vetrino non colorato. Utilizzando una punta della pipetta bagnata, raccogliere il tessuto raschiato, in modo da garantire un facile trasferimento del campione di tessuto. Trasferire il tessuto in una provetta contenente un tampone di lisi. I componenti del tampone di lisi digeriscono il tessuto, rilasciando i costituenti della cellula.

Trattare il lisato con una proteasi adatta e incubare ad alta temperatura