Modello di cellule staminali di glioma marcate con luciferasi: un metodo mediato da lentivirus per preparare cellule staminali di glioma marcate con luciferasi per studi terapeutici in vitro

0 visualizzazioni • 3:17 min. • April 30th, 2023

Le cellule staminali del glioma o GSC sono una sottopopolazione del glioma, un cancro delle cellule gliali nel cervello.

L'etichettatura di queste GSC con enzimi bioluminescenti come la luciferasi aiuta a stabilire saggi di imaging ad alto rendimento per lo screening dei farmaci.

Per preparare le GSC marcate con luciferasi, iniziare con una coltura di GSC in un terreno di crescita adatto.

Centrifugare la coltura per ottenere un pellet cellulare e rimuovere il surnatante.

Aggiungere enzimi digestivi adatti al pellet. Questi enzimi dissociano i cluster cellulari e degradano qualsiasi traccia di tessuto connettivo per ottenere una sospensione unicellulare.

A questo punto, centrifugare la sospensione a cellula singola e rimuovere il surnatante. Risospendere il pellet in un mezzo nuovo.

Quindi, seminare la concentrazione desiderata di cellule in una piastra di coltura.

Incubare la coltura e lasciare che le cellule aderiscano alla piastra di coltura.

Successivamente, aggiungere il titolo desiderato di un costrutto genico contenente virus per la proteina fluorescente verde potenziata con luciferasi o EGFP e incubare.

Il virus interagisce con i recettori di superficie delle GSC, innescando

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Consegna genica mediata da lentivirus