Imaging intravitale basato su finestra cranica in un modello murino: una tecnica di imaging per studiare il comportamento delle cellule tumorali pre-iniettate nel cervello di un modello murino

L'imaging intravitale attraverso finestre di imaging ottico facilita il tracciamento ad alta risoluzione delle singole cellule per studiare il loro comportamento nel microambiente nativo in un animale vivo.

Per iniziare, prendete un topo anestetizzato con il cervello pre-iniettato con cellule tumorali e con una finestra cranica impiantata che si inserisce all'interno di un anello di metallo. Le cellule tumorali esprimono proteine fluorescenti nucleari

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Posizionare il mouse, rivolto verso l'alto, in una scatola di imaging. Il supporto magnetico nella scatola di imaging aiuta a fissare la finestra cranica impiantata.

Ora, trasferisci la scatola di imaging all'interno della camera di imaging controllata dall'ambiente di un microscopio invertito per analizzare il comportamento delle cellule tumorali nel cervello.

In modalità multifotone, impostare il laser su una lunghezza d'onda adeguata. Concentrati sulla regione tumorale per rilevare la fluorescenza dalle cellule tumorali.

Definisci uno z-stack per ogni posizione per acquisire più immagini intravitali di cellule tumorali in diversi piani ottici.

Questo passaggio consente di catturare una percentuale significativa di cellule tumorali