Saggio di migrazione delle cellule staminali del tumore cerebrale (BTSC) per studi di trattamento farmacologico: una tecnica di imaging in vitro di cellule vive per analizzare l'effetto del trattamento farmacologico sulla migrazione delle BTSC

Le cellule staminali tumorali cerebrali o BTSC, una sottopopolazione di cellule tumorali cerebrali, possono avviare la crescita e la metastasi del tumore, rendendole bersagli promettenti per la terapia del cancro. Per studiare l'effetto dei farmaci sulla migrazione di BTSC in vitro, in primo luogo, preparare sospensioni uniformi di BTSC in un terreno adatto. Trattare una delle sospensioni con il farmaco di interesse.

Nel frattempo, ottenere una piastra per chemiotassi a più pozzetti costituita da inserti membranosi che separano ciascun pozzetto nelle camere superiore e inferiore. Pipettare la proteina della matrice extracellulare desiderata nelle camere inferiori e negli inserti membranosi. Incubare per facilitare la polimerizzazione della proteina.

Aggiungere un terreno basale adatto contenente il chemioattrattivo desiderato nelle camere inferiori e posizionarlo sopra gli inserti membranosi. Quindi, seminare la sospensione di BTSC trattata con il farmaco e non trattata in inserti membranosi. Visualizzare la lastra per una durata prolungata utilizzando la microscopia su cellule vive.

In coltura, le BTSC aderiscono alla matrice proteica dell'inserto. In risposta al gradiente di conc