Trapianto ortotopico a lungo termine di cellule tumorali in embrioni di zebrafish: un metodo efficiente per fornire cellule tumorali nel quarto ventricolo di embrioni di zebrafish per l'analisi a lungo termine del comportamento delle cellule tumorali

Durante il trapianto ortotopico, le cellule tumorali o il tessuto di un donatore portatore di tumore vengono trapiantati nel tessuto corrispondente di un ricevente della stessa specie. In primo luogo, preparare una sospensione uniforme - in un tampone adatto - di cellule tumorali cerebrali marcate in fluorescenza raccolte da un pesce zebra portatore di tumore. Utilizzando una punta di caricamento in gel fine, caricare questa sospensione cellulare in un ago per microiniezione.

Quindi, fissare l'ago caricato nel supporto di un micromanipolatore. Successivamente, trasferire un embrione di zebrafish anestetizzato su una piastra di iniezione prefabbricata. Per un facile accesso durante la microiniezione, posizionare l'embrione lateralmente per visualizzare i ventricoli cerebrali, una rete di cavità piene di liquido cerebrospinale all'interno del cervello.

Regolare la punta dell'ago per iniettare la sospensione di cellule tumorali nel quarto ventricolo, la cavità a forma di diamante del rombencefalo dell'embrione. Le cellule tumorali occupano lo spazio vuoto all'interno del ventricolo. Ritrarre l'ago. Trasferire l'embrione in una piastra di coltura contenente soluzione fisiologica. Osser