JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:23 min. • July 8th, 2025
Nei topi, lo strato mucoso del colon è costituito da cellule immunitarie contenenti lamina propria, circondate da un epitelio strettamente imballato che protegge la mucosa. Il trattamento chimico con destrano solfato di sodio interrompe le giunzioni strette, causando danni alle cellule epiteliali e consentendo ai microbi luminali di penetrare nella lamina propria.
Il riconoscimento microbico nel colon innesca la secrezione di chemochine, portando all'infiltrazione di cellule immunitarie e al rilascio di citochine pro-infiammatorie. Questa risposta immunitaria esagerata provoca infiammazione del colon o colite.
Per valutare la colite indotta da sostanze chimiche, iniziare con un vetrino che trasporta una sezione fissa e pretrattata di tessuto del colon di topo che presenta colite indotta da sostanze chimiche. Trattare la sezione con un cocktail di anticorpi primari specifici per i recettori delle cellule immunitarie che si legano alle rispettive cellule immunitarie.
Lavare per rimuovere gli anticorpi non legati. Incubare la sezione di tessuto con anticorpi secondari biotinilati, che si legano specificamente agli anticorpi primari. Incubare con i coniugati streptavidina-enzima, che i
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