Name: Estrazione RNA da cellule Neuroprecursor Utilizzando il Bio-Rad RNA totale Kit (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-10-31T23:51:30.000+00:00
Duration: 17 min 25 s
Description: Impara l'estrazione di RNA da cellule neuroprecursori utilizzando il kit Bio-Rad RNA totale. Questo metodo garantisce rese elevate e risultati coerenti per studi di espressione genica in neuroscienza.

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estrazione rna da cellule neuroprecursor utilizzando il bio-rad rna totale kit

RNA Extraction from Neuroprecursor Cells Using the Bio-Rad Total RNA Kit

Estrazione RNA da cellule Neuroprecursor Utilizzando il Bio-Rad RNA totale Kit

Ciao, sono Josh Sh, studente laureato del laboratorio del dottor Ed Maki presso l'Università della California di Irvine. Vi mostrerò come estrarre l'RNA da cellule precursori neuronali utilizzando il kit BioRad To RNA Mini. Utilizzo questo kit da alcuni anni ormai in questo laboratorio e mi ha sempre fornito risultati costanti con rese elevate.Le cellule che utilizziamo sono cellule precursori neuronali Eton e mezzo, acutamente dissociate da cortecce embrionali, e le seminiamo di solito in una piastra da coltura tissutale a 24 pozzetti, trattata e rivestita con PD L e laminina; le semino a una densità di centomila cellule per pozzetto. Prima di iniziare, devo ricordarvi che dovete lavorare su un banco appositamente dedicato al lavoro con RNA. La prima cosa da fare è assicurarsi che il banco per l'RNA sia pulito.Il modo corretto per pulire il bancone è utilizzare questo RNA zap. Fondamentalmente, elimina qualsiasi RNA poiché l'RA distrugge i tuoi RNA. Un'altra cosa importante è indossare sempre i guanti quando si esegue l'estrazione, perché la pelle è ricca di questi RNA.Quindi è assolutamente da evitare. Ok, quello che ho qui è il kit mini per RNA totale BioRad. Ne ho estratto il c

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Vi presentiamo un metodo per la generazione di cDNA da mRNA ambientale. In generale, l'RNA totale viene prima raccolto dall'ambiente, è selettivamente rimosso rRNA, mRNA è selettivamente amplificato, e cDNA sintetizzato dalla piscina mRNA arricchito è sequenziato. Sequenze recuperato può essere annotati utilizzando le normali tecniche di bioinformatica per identificare i geni espressi.

Analisi di espressione genica da comunità microbiche marine utilizzando Trascrittomica Ambientale

Descriviamo un processo che utilizza laser-capture microdissezione per isolare ed estrarre l'RNA da una popolazione omogenea di cellule, neuroni piramidali, nello strato III del giro temporale superiore nel cervello umano post-mortem. Successivamente abbiamo linearmente amplificare (T7-based) mRNA, e ibridare il campione umano X3P microarray Affymetrix.

L&#39;ottenimento di RNA di alta qualità da popolazioni di cellule singole nei tessuti umani cervello postmortem

A causa della natura transitoria del pre-mRNA, può essere difficile da isolare e...

Un rapido ad alta velocità Metodo per ribonucleoproteine ​​Mapping (RNP) su Human pre-mRNA

In questo articolo viene descritto un metodo semplice per la raccolta di singole cellule di ratto colture primarie neuronali e analisi del trascrittoma con conseguente amplificazione ARNA. Questo approccio è generalizzabile a qualsiasi tipo di cellula.

L&#39;analisi del trascrittoma di singole cellule

Un passo dal protocollo passo per isolare e identificare complessi RNA associati attraverso RIP-Chip.

Metodo per l&#39;isolamento e l&#39;identificazione di mRNA, microRNA e componenti proteiche dei complessi Ribonucleoproteina da estratti cellulari con RIP-Chip

Le interazioni RNA-proteina sono al centro di molti processi cellulari. Qui, descriviamo un metodo in vivo per isolare RNA specifico e identificare nuove proteine ad esso associate. Questo potrebbe gettare nuova luce su come gli RNA sono regolati nella cellula.

Novel RNA-Proteine ​​leganti isolamento dalla rapida Metodologia

I due diversi 3' amplificazione veloce delle estremità del cDNA (3' gara) protocolli descritto qui fanno uso di due diversi DNA polimerasi per mappare sequenze che includono un segmento dell'open reading frame (ORF), il codone di arresto e l'intero regione 3' UTR di una trascrizione usando RNA ottenute da linee cellulari tumorali differenti.

Adattamento 3' amplificazione veloce di CDNA finisce per mappare le trascrizioni in cancro

Questo metodo di discesa di RNA permette di identificare i bersagli di RNA di un RNA lunghi non codificanti (lncRNA). Basato sull'ibridazione di fatto in casa, progettato anti-senso del DNA del oligonucleotide sonde specifiche per questo lncRNA in un tessuto opportunamente fisso o linea cellulare, in modo efficiente permette la cattura di tutti i target di RNA della lncRNA.

Procedura di RNA Pull-down per identificare gli obiettivi di RNA di un RNA lunghi Non codificanti

Gli RNA circolari (circRNA) sono RNA non codificanti che possono avere ruoli nella regolazione trascrizionale e nelle interazioni di mediazione tra proteine. A seguito della valutazione di diversi parametri per la costruzione di librerie di sequenziamento di circuitRNA, è stato compilato un protocollo che utilizza la preparazione della libreria totale di RNA spiaggiata con il pretrattamento di RNase R ed è presentato qui.

Identificazione di RNA circolari mediante il sequenziamento dell'RNA

Il sequenziamento dell'RNA a quantificazione assoluta (AQRNA-seq) è una tecnologia sviluppata per quantificare il panorama di tutti i piccoli RNA nelle miscele biologiche. Qui, vengono dimostrate sia le fasi di preparazione della libreria che quelle di elaborazione dei dati di AQRNA-seq, quantificando i cambiamenti nel pool di RNA di trasferimento (tRNA) in Mycobacterium bovis BCG durante la dormienza indotta dalla fame.

AQRNA-seq per la quantificazione di piccoli RNA

Impara l'estrazione di RNA da cellule neuroprecursori utilizzando il kit Bio-Rad RNA totale. Questo metodo garantisce rese elevate e risultati coerenti per studi di espressione genica in neuroscienza.

Estrazione RNA da cellule Neuroprecursor Utilizzando il Bio-Rad RNA totale Kit

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