November 11th, 2012
Iperplasia neointimale è la causa primaria di stenosi nelle vene arterializzato. Proponiamo un nuovo protocollo per cui si innesta la vena giugulare esterna destra con la tecnica bracciale in carotide comune di ratti Sprague Dawley. Il tasso di sopravvivenza è stata del 100% per il punto temporale di sacrificio.
L'iperplasia neointimale è una delle principali cause di stenosi nelle vene arterializzate utilizzate nella chirurgia di bypass coronarico arterioso, nella chirurgia di bypass arterioso periferico, nonché nell'innesto di vene di fistole venose arteriose. L'interposizione nell'arteria carotide comune è stata eseguita in diversi progetti di ricerca per studiare l'eziologia dell'iperplasia neointimale e le opzioni terapeutiche per affrontarla attualmente. Tuttavia, le tecniche microchirurgiche convenzionali che utilizzano modelli di piccoli animali sono complicate, frustranti e richiedono un eccessivo sacrificio di animali da esperimento per semplificare l'intera procedura.
Questo video illustra un protocollo operativo dettagliato, che aiuterà il chirurgo alle prime armi ad apprendere la tecnica di taglio e l'innesto venoso. Posizione intermedia nell'arteria comune trasportata 21 femmine di ratti sprig dolly provenienti da un allevatore commerciale sono stati classificati in tre gruppi uguali che sono stati operati e sacrificati rispettivamente il giorno 21, 42 e 84. L'anestesia generale degli animali è stata indotta utilizzando una scatola di plexiglass collegata a una macchina per anestesia impostata a una portata di ossigeno di un litro al minuto e un vaporizzatore di fluoro da cavalletto con gas anestetico al 5%.
In questa figura, si vedono gli scienziati prima della transazione del muscolo mastoideo del cla sternale destro. Qui è mostrata la vena giugulare esterna. Qui si vedono gli scienziati dopo la transazione del muscolo sternocleidomastoideo destro dove vengono rivelati l'arteria carotide comune destra e il nervo vago destro.
Durante l'operazione successiva, le anastomosi vengono eseguite utilizzando la tecnica del bracciale. I polsini sono realizzati a mano da un tubo di plastica tagliato in una lunghezza di tre millimetri. Questi polsini sono costituiti da un corpo tubolare del polsino, compreso il volume completo del tubo di plastica e da una maniglia del bracciale costituita da metà del volume del bracciale.
Sia il corpo del bracciale che l'impugnatura del bracciale sono ugualmente lunghi. La cuffia viene tirata sopra l'arteria cheratinica comune. Il recipiente e l'impugnatura del bracciale possono essere fissati insieme in modo sicuro utilizzando un mini bulldog clamp.
Successivamente, il vaso viene evitato e tirato sopra l'esterno del corpo del bracciale. Quindi viene fissato con una legatura di seta. In questo modo, la lumina della coppa è ricoperta di endotelio.
L'innesto venoso può essere fatto scivolare su entrambi i monconi dell'arteria carotide comune a coppa e fissato con la legatura della seta. Per prevenire la formazione di trombi, soprattutto nell'anastomosi distale, è essenziale fissare la fascetta dell'innesto venoso molto vicino al margine della cuffia per evitare che il sangue entri in contatto con la cravatta che tiene l'arteria in posizione, Un'incisione cervicale mediana lunga 2,5 centimetri viene praticata direttamente sopra lo sterno lateralmente al muscolo mastoideo CDO sternale. Si può vedere l'ampia vena giugulare esterna, che è completamente separata dai tessuti circostanti.
Qui si può vedere la vena giugulare esterna completamente mobilizzata per cui gli affluenti venosi sono stati legati con sette suture di seta. Il muscolo chitomastoideo sternale viene preparato qui dopo la transazione del muscolo sternocleidomastoideo. Ora puoi vedere l'arteria cheratina comune destra.
L'arteria cheratina comune viene preparata con cura assicurandosi di non comprimere l'arteria o il nervo vago, E ora puoi vedere l'arteria cheratina comune in tutta la sua lunghezza. Quindi viene legato due volte al centro con sette suture di seta. Successivamente, l'arteria carotide comune viene sezionata proprio tra le due legature.
Un bracciale di nylon costituito da un corpo e un manico viene quindi fatto scivolare sull'estremità distale dell'arteria cheratina comune, per cui il manico del bracciale si trova dietro il vaso. Quindi l'estremità cuffiata dell'arteria cheratina comune distale viene bloccata con un mini morsetto per bulldog proprio sull'impugnatura del polsino. Ciò garantisce stabilità.
Successivamente, l'arteria viene tagliata direttamente dietro la legatura, per cui il moncone arterioso risultante dovrebbe essere lungo quanto il corpo della cuffia. Il lume arterioso viene risciacquato con una soluzione salina di eparina. Quindi l'anello di legatura viene messo da parte.
Subito dopo, il moncone arterioso viene tirato su e fatto scivolare come una manica sul corpo del polsino. Successivamente, l'anello di legatura viene tirato saldamente e annodato per evitare che l'arteria scivoli fuori dalla sua manica. Usiamo un trucco sia la parete arteriosa che la sutura di pizzicato contemporaneamente con un paio di pinze e la pinza sinistra fanno il nodo.
Quindi la stessa procedura viene ripetuta per il moncone arterioso prossimale, facendo scivolare la cuffia sull'estremità prossimale dell'arteria cheratina comune cuffiata, bloccando, tagliando l'arteria, risciacquando, posizionando l'ansa di legatura sul moncone arterioso, facendo scivolare il moncone arterioso sopra la cuffia e infine annodando l'ansa di legatura. Viene asportato un segmento lungo un centimetro della vena giugulare esterna bloccata. Le due arterie cuffiate sono troppo distanti l'una dall'altra perché l'interposizione venosa possa approssimare la distanza corretta per la procedura.
Una sutura Vicryl da tre oh è avvolta attorno a ciascuna pinza per mini bulldog ed entrambe le suture sono incrociate. Quindi le suture vengono tirate in direzioni opposte, consentendo così il corretto posizionamento dei monconi arteriosi a coppa. Risciacquo con soluzione salina di eparina.
Una volta che la sutura è avvolta attorno all'arteria cheratina distale a coppa, un'estremità del segmento della vena invertito e risciacquato viene fatta scivolare sopra l'arteria cheratina distale cuffiata. Quindi la sutura viene annodata nella posizione corretta. In questo modo è importante assicurarsi che la legatura incorpori l'intera circonferenza dell'innesto venoso.
Ora il segmento della vena viene nuovamente risciacquato con una soluzione salina di eparina e l'altra estremità del segmento della vena viene fatta scivolare sul moncone dell'arteria cheratina prossimale. Successivamente, la legatura è completata. Qui puoi vedere l'innesto completo di interposizione venosa.
Successivamente, i due mini morsetti bulldog vengono rimossi. Prima quello distale e poi quello prossimale. Infine, l'innesto di interposizione venosa è in posizione arteriosa.
La pulsazione può essere osservata nell'arteria carrata comune e nell'innesto venoso. Dopo aver rimosso le pinze per la chiusura della ferita, viene applicata una sutura sottocutanea con quattro Vicryl, mentre una sutura a tre oh Vicryl viene utilizzata per la sutura cutanea in esecuzione. Gli animali si sono ripresi su una lettiera di carta piatta sotto una lampada riscaldante a infrarossi.
Gli animali sono stati iniettati dopo l'intervento con norfina in salamoia in una concentrazione da 0,03 a 0,05 milligrammi per chilogrammo di peso corporeo SC ogni 8-12 ore per due giorni, il 100% degli animali è sopravvissuto al momento del sacrificio. Inoltre, il tasso di pervietà del trapianto era del 60% per i primi 10 animali operati e dell'82% per i restanti 11 animali. Il flusso sanguigno al momento del sacrificio era di otto più o meno tre millilitri al minuto.
Utilizzando la tecnica della cuffia, è possibile anastomosi di vasi con diversi diametri luminali. È importante legare l'intera circonferenza dei vasi cuffiati e TED per evitare sanguinamento dopo la riperfusione. Per prevenire la formazione di trombi, soprattutto nell'anastomosi distale, è essenziale fissare la fascetta dell'innesto venoso molto vicino al margine della cuffia per evitare che il sangue entri in contatto con la fascetta che tiene in posizione l'arteria.
Questo modello è molto adatto per simulare l'emodinamica dell'alta velocità del sangue e del basso stress di taglio e per studiare i meccanismi che influenzano lo sviluppo dell'iperplasia neointimale. A differenza della procedura che utilizza la vena cavale come innesto, questo autotrapianto che utilizza la vena giugulare esterna come innesto riduce della metà il numero necessario di animali da esperimento. In definitiva, l'interposizione di un innesto di vena giugulare esterna nell'arteria cheratina comune è una sofisticata tecnica di microchirurgia.
Questo video aiuta il chirurgo Sonata a padroneggiare questo in un tempo minimo con un minor spreco di animali da esperimento. Questo modello è un mezzo eccellente per i chirurghi alle prime armi per praticare la tecnica della cuffia attualmente utilizzata nel trapianto di organi solidi nei piccoli animali.
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Questo studio presenta un nuovo protocollo per l'innesto della vena giugulare esterna destra utilizzando la tecnica del cuff in Sprague Dawley rats. L'approccio mira a semplificare la procedura chirurgica e migliorare i risultati relativi all'iperplasia neointimale, una delle principali cause di stenosi nelle vene arterializzate.
This microsurgical protocol addresses a key challenge in vascular research: modeling neointimal hyperplasia in arterialized vein grafts, a primary cause of stenosis in coronary and peripheral bypass surgeries and arteriovenous fistulas. By simplifying external jugular vein interposition in the rat carotid artery using the cuff technique, the method reduces animal use and improves procedural standardization. This supports preclinical target validation and mechanistic de-risking in cardiovascular therapeutic development.
The method fits within the discovery-to-preclinical continuum by providing a disease-relevant system for evaluating mechanisms of neointimal hyperplasia, enabling lead identification through functional validation of vascular grafts, and supporting preclinical model refinement via standardized surgical execution.