Trasmissione di virus vegetali Utilizzo Aleurodidi

L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di trasmettere virus vegetali utilizzando mosche bianche. Ciò si ottiene stabilendo e mantenendo una colonia di mosche bianche che forniscono settimanalmente mosche bianche adulte appena emerse, che non sono contaminate da altri potenziali vettori e agenti patogeni. Le colonie si mantenevano aggiungendo regolarmente mosche bianche alle giovani piante prive di insetti da cui vengono prodotti nuovi adulti.

Dopo 17-20 giorni alla settimana, gli adulti appena emersi possono essere trasferiti in impianti di prova per acquisire o trasmettere la trasmissione del virus. In genere si ottengono efficienze di quasi il 100% e le velocità di trasmissione di solito iniziano basse e salgono con l'ottimizzazione sistematica. L'aspetto più impegnativo dell'uso delle mosche bianche per inoculare i virus è allevare le mosche bianche in modo tale da escludere agenti patogeni e insetti indesiderati.

Gli agenti patogeni, in particolare i funghi che marciscono le radici e la peronospora delle foglie, ridurranno la qualità delle piante ospiti del virus. Insetti indesiderati come la parsimonia possono sopprimere la riproduzione della mosca bianca e compromettere la qualità della pianta ospite del virus. A dimostrare le procedure sarà Heather Capa Bianco, un tecnico del mio laboratorio.

Le colonie di mosche bianche dovrebbero essere mantenute in una stanza di crescita pulita e controllata. Il controllo dell'umidità relativa, della temperatura, del fotoperiodo e dell'intensità della luce sono essenziali per una colonia che si sviluppa da uovo ad adulto in 18 giorni, utilizzare le seguenti impostazioni. La temperatura dovrebbe essere impostata tra i 26 e i 30 gradi Celsius e l'umidità relativa dovrebbe idealmente essere compresa tra il 30 e il 50%Se l'umidità relativa supera il 70%è probabile che gli agenti patogeni degli insetti e dei funghi delle piante diventino un problema.

Il periodo ideale per le foto è di 14 ore. L'intensità della luce dovrebbe essere abbastanza alta e le lampadine fluorescenti VHO possono produrre da 800 a 1000 candele sulla chioma della pianta. Anche i tassi di fertilizzante e l'irrigazione devono essere ridotti per scoraggiare gli agenti patogeni fungini, così come l'accumulo di sale Le gabbie bianche devono consentire la ventilazione, la facilità di accesso e lo spazio sufficiente per una popolazione di bianchi in crescita.

Buoni risultati sono stati ottenuti con l'organza d'organo e la vagliatura dell'alluminio, così come la prova bianca La selezione delle specie di piante è una considerazione importante. In primo luogo, dovrebbe crescere rapidamente, ma non ricoprire eccessivamente la camera. In secondo luogo, la pianta dovrebbe essere abbastanza forte da sostenere un'elevata popolazione di insetti senza collassare.

Per questi motivi, le cultivar nane o a cespuglio sono buone scelte vegetali. In terzo luogo, la pianta deve essere in grado di ospitare o meno il virus in uso, a seconda del tipo di colonia allevata. Poiché la colonia può collassare a causa di acari, THP, mosche bianche selvatiche o altri insetti invasivi, le cultivar scelte devono essere coltivate in un ambiente protetto per escludere altri insetti.

Le prime mosche bianche di una nuova colonia devono essere prive di virus delle piante, altri insetti e insetti patogeni. Se le mosche bianche vengono raccolte dal campo, allevarle per almeno otto settimane su piante che non sono ospiti del virus durante questo periodo, verificare l'assenza di sintomi delle piante. Una volta ottenute le mosche bianche pulite, introdurne tra 20 e 100 in una gabbia di piante per aspirazione o scuotendole delicatamente da un'altra pianta di origine.

Ogni settimana è necessario allestire una nuova gabbia. Per le prime tre settimane, usa le mosche bianche su piante non ST per stabilire la nuova gabbia. A partire dalla quarta settimana, usa le giovani mosche bianche adulte della gabbia di tre settimane per stabilire la gabbia successiva.

Durante la prima settimana in gabbia, le mosche bianche depongono le uova sul lato inferiore delle superfici fogliari delle piante. Nella seconda settimana, le mosche bianche immature diventeranno evidenti e alcuni degli adulti saranno ancora vivi. Nella terza settimana, saranno emerse molte nuove mosche bianche adulte e dovrebbe esserci un aumento molto notevole della popolazione di mosche bianche adulte.

Queste mosche bianche possono essere utilizzate per esperimenti di trasmissione. Nella quarta settimana, gli adulti di una settimana dovrebbero essere trasferiti in una nuova gabbia. La vecchia gabbia dovrebbe essere rimossa e le sue piante scartate. Preciso.

Il trasferimento delicato dei moscerini bianchi avviene con un dispositivo di aspirazione e le fiale di raccolta non vengono mai aspirate. Le mosche bianche che si nutrono di piante quando si nutrono degli stili bianchi sono incorporate nella pianta e si rompono se vengono allontanate dalla pianta. Rendendo la mosca bianca inutile per raccogliere le mosche bianche in una mano, con l'altra mano tieni una protezione di plastica gialla all'interno della gabbia della colonia.

Picchietta delicatamente le piante per incoraggiare le mosche bianche adulte a volare. Le mosche bianche saranno attratte dalla carta gialla dove potranno essere raccolte. Utilizzando l'aspiratore e l'aspirazione molto delicata, aggiungere non più di 20 mosche bianche a ciascuna fiala di raccolta.

Quindi picchiettare la fiala per disorientare le mosche e tappare la fiala con il param. Per garantire una trasmissione virale di successo, prova da 15 a 40 giovani adulti da piante infette da virus a piante sane, a seconda del virus e della pianta ospite. Altri protocolli come lo screening resistente richiedono popolazioni starter più ampie.

In questo caso, scuotere le piante infette dal virus, che sono infestate da mosche bianche sulle piante che devono essere inoculate. Una volta che le mosche bianche sono state posizionate su una pianta infetta da virus, lasciarle nutrire per 48-72 ore per acquisire virus trasmessi in modo persistente. Più tempo in genere non aumenta la velocità di trasmissione per i virus trasmessi in modo non persistente o persistente esperto.

Un periodo di accesso all'acquisizione più breve, da un'ora a un giorno, sarà sufficiente per gli esperimenti che richiedono l'acquisizione da foglie specifiche. È possibile utilizzare gabbie a clip, impostare la gabbia in modo che la parte inferiore della foglia sia accessibile e non utilizzare più di 10 mosche bianche femmine per gabbia di 2,5 centimetri di diametro, altrimenti la velocità di trasmissione diminuirà a causa dell'affollamento. Per l'inoculazione delle piante, selezionare la gabbia appropriata considerando il numero di piante.

Un impianto, ad esempio, ha bisogno solo di una gabbia piccola solo leggermente più grande di se stessa per più impianti, scegli tra un tubo in PVC più piccolo, una gabbia con telaio o una gabbia con telaio in alluminio più grande. Più piccolo è lo spazio intorno alla chioma della pianta, meglio è. Una volta che le mosche bianche sono state aggiunte alla nuova pianta, la quantità di tempo necessaria per l'inoculazione dipende dal virus e dalla pianta ospite.

Proprio come per l'acquisizione, la quantità di tempo necessaria per la trasmissione dipende dal modo in cui la trasmissione. La trasmissione non persistente richiede un tempo di accesso molto più breve rispetto alla trasmissione semipersistente o persistente. Verificare che le mosche bianche stiano sondando o nutrendosi durante il periodo di accesso all'inoculazione.

Apri la gabbia e indaga la parte inferiore di alcune foglie su ogni pianta. Per l'inoculazione più lunga. I periodi di accesso disturbano periodicamente delicatamente le piante per favorire la ridistribuzione sulle piante.

Ciò aumenterà il tasso di trasmissione contrastando le tendenze naturali delle mosche bianche ad aggregarsi per terminare il periodo di inoculazione. Uccidi le mosche bianche con due insetticidi applicati, uno dopo l'altro. Per prima cosa applicare un insetticida da contatto per eliminare rapidamente le mosche bianche adulte come il sapone insetticida.

In secondo luogo, applicare un insetticida sistemico per eliminare eventuali mosche bianche che si sviluppano nelle settimane successive. E tutti gli adulti rimanenti emettono arido o pirazina sono scelte efficaci. Utilizzando queste procedure, è possibile ottenere regolarmente tassi di trasmissione del virus del 100%Tali tassi di trasmissione elevati sono essenziali quando si esaminano gli impianti di prova per la resistenza ai virus e sono desiderabili quando si valuta l'efficacia dei composti chimici per la loro capacità di interferire con la trasmissione del virus.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come allevare mosche bianche e usarle per trasmettere virus delle piante. Queste procedure possono essere utilizzate per scopi di ricerca o per lo sviluppo commerciale di piante resistenti ai virus, o per la sperimentazione di composti per la loro capacità di interferire con la trasmissione del virus.