Name: Procedure chirurgiche per un modello di Rat parziale trapianto di fegato con la ricostruzione arteriosa epatica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-03-07T12:30:00.000+00:00
Duration: 18 min 47 s
Description: Impara la tecnica chirurgica per il trapianto ortotopico parziale di fegato nel ratto con ricostruzione arteriosa epatica. Questo modello sperimentale riproducibile consente di studiare i danni epatocellulari misurando i livelli sierici di alanina aminotransferasi.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Gli autori ringraziano Pascal Paschenda e Mareike Schulz per la loro assistenza tecnica.

<ol><li>Puhl, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+viscosity+histidine-tryptophan-ketoglutarate+graft+flush+improves+subsequent+extended+cold+storage+in+University+of+Wisconsin+solution+in+an+extracorporeal+rat+liver+perfusion+and+rat+liver+transplantation+model%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Transpl%22%5BJournal%5D)">Low viscosity histidine-tryptophan-ketoglutarate graft flush improves subsequent extended cold storage in University of Wisconsin solution in an extracorporeal rat liver perfusion and rat liver transplantation model.</a> Liver Transpl. 12, 1841-1849 (2006).</li>
<li>Yagi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+Preservation+and+Microcirculation+with+POLYSOL+After+Partial+Liver+Transplantation+in+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">Improved Preservation and Microcirculation with POLYSOL After Partial Liver Transplantation in Rats.</a> J Surg Res. 167, e375-e383 (2011).</li>
<li>Engemann, R., Ulrichs, K., Thiede, A., Muller-Ruchholtz, W., Hamelmann, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Value+of+a+physiological+liver+transplant+model+in+rats.+Induction+of+specific+graft+tolerance+in+a+fully+allogeneic+strain+combination%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Value of a physiological liver transplant model in rats. Induction of specific graft tolerance in a fully allogeneic strain combination.</a> Transplantation. 33, 566-568 (1982).</li>
<li>Sumimoto, R., Shinomiya, T., Yamaguchi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+hepatic+arterial+blood+flow+in+rats+with+liver+transplants.+Examination+of+donor+liver-derived+serum+class+I+MHC+antigen+in+rats+with+liver+transplants+with+or+without+hepatic+arterial+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Influence of hepatic arterial blood flow in rats with liver transplants. Examination of donor liver-derived serum class I MHC antigen in rats with liver transplants with or without hepatic arterial reconstruction.</a> Transplantation. 51, 1138-1139 (1991).</li>
<li>Chaland, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+with+hepatic+artery+anastomoses.+Hemodynamics+and+response+to+hemorrhage+in+conscious+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation with hepatic artery anastomoses. Hemodynamics and response to hemorrhage in conscious rats.</a> Transplantation. 49, 675-678 (1990).</li>
<li>Imamura, H., Rocheleau, B., Cote, J., Huet, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+consequence+of+rat+orthotopic+liver+transplantation+with+and+without+hepatic+arterial+reconstruction%3A+a+clinical%2C+pathological%2C+and+hemodynamic+study%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Long-term consequence of rat orthotopic liver transplantation with and without hepatic arterial reconstruction: a clinical, pathological, and hemodynamic study.</a> Hepatology. 26, 198-205 (1997).</li>
<li>Zhong, Z., Theruvath, T. P., Currin, R. T., Waldmeier, P. C., Lemasters, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIM811%2C+a+mitochondrial+permeability+transition+inhibitor%2C+prevents+mitochondrial+depolarization+in+small-for-size+rat+liver+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Transplant%22%5BJournal%5D)">NIM811, a mitochondrial permeability transition inhibitor, prevents mitochondrial depolarization in small-for-size rat liver grafts.</a> Am. J. Transplant. 7, 1103-1111 (2007).</li>
<li>Spiegel, H. U., Palmes, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+techniques+of+orthotopic+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Invest.+Surg%22%5BJournal%5D)">Surgical techniques of orthotopic rat liver transplantation.</a> J. Invest. Surg. 11, 83-96 (1998).</li>
<li>Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 16, 664-669 (1973).</li>
<li>Lee, S., Charters, A. C. 3rd, Orloff, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplified+technic+for+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Simplified technic for orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Am. J. Surg. 130, 38-40 (1975).</li>
<li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47-50 (1979).</li>
<li>Howden, B., Jablonski, P., Grossman, H., Marshall, V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">The importance of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Transplantation. 47, 428-431 (1989).</li>
<li>Gao, W., Lemasters, J. J., Thurman, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+new+method+for+hepatic+rearterialization+in+rat+orthotopic+liver+transplantation.+Reduction+of+liver+injury+and+improvement+of+surgical+outcome+by+arterialization%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Development of a new method for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation. Reduction of liver injury and improvement of surgical outcome by arterialization.</a> Transplantation. 56, 19-24 (1993).</li>
<li>Zhao, D., Zimmermann, A., Wheatley, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morphometry+of+the+liver+after+liver+transplantation+in+the+rat%3A+significance+of+an+intact+arterial+supply%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">Morphometry of the liver after liver transplantation in the rat: significance of an intact arterial supply.</a> Hepatology. 17, 310-317 (1993).</li>
<li>Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fifty-percent+partial+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Fifty-percent partial liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 292-293 (1996).</li>
<li>Lehmann, T. G., Bunzendahl, H., Langrehr, J. M., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arterial+reconstruction+in+rat+liver+transplantation--development+of+a+new+tubing+technique+of+the+common+hepatic+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Transpl.+Int%22%5BJournal%5D)">Arterial reconstruction in rat liver transplantation--development of a new tubing technique of the common hepatic artery.</a> Transpl. Int. 18, 56-64 (2005).</li>
<li>Reck, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+arterialization+on+hepatic+oxygen+supply%2C+tissue+energy+phosphates%2C+and+outcome+after+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">Impact of arterialization on hepatic oxygen supply, tissue energy phosphates, and outcome after liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 62, 582-587 (1996).</li>
<li>Hasuike, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+for+orthotopic+liver+transplantation+with+arterial+reconstruction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A simple method for orthotopic liver transplantation with arterial reconstruction in rats.</a> Transplantation. 45, 830-832 (1988).</li>
<li>Steffen, R., Ferguson, D. M., Krom, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+method+for+orthotopic+rat+liver+transplantation+with+arterial+cuff+anastomosis+to+the+recipient+common+hepatic+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A new method for orthotopic rat liver transplantation with arterial cuff anastomosis to the recipient common hepatic artery.</a> Transplantation. 48, 166-168 (1989).</li>
<li>Knoop, M., Bachmann, S., Keck, H., Steffen, R., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experience+with+cuff+rearterialization+in+600+orthotopic+liver+grafts+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Surg%22%5BJournal%5D)">Experience with cuff rearterialization in 600 orthotopic liver grafts in the rat.</a> Am. J. Surg. 167, 360-363 (1994).</li>
<li>Hickman, R., Engelbrecht, G. H., Duminy, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+liver+transplantation+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A technique for liver transplantation in the rat.</a> Transplantation. 48, 1080(1989).</li>
<li>Liu, T., Freise, C. E., Ferrell, L., Ascher, N. L., Roberts, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+vascular+%22sleeve%22+anastomosis+for+rearterialization+in+orthotopic+liver+transplantation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation%22%5BJournal%5D)">A modified vascular "sleeve" anastomosis for rearterialization in orthotopic liver transplantation in rats.</a> Transplantation. 54, 179-180 (1992).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+sleeve+anastomosis+for+reconstruction+of+the+hepatic+artery+in+rat+liver+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Modified sleeve anastomosis for reconstruction of the hepatic artery in rat liver transplantation.</a> Microsurgery. 22, 62-68 (2002).</li>
<li>Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+partial+hepatectomies%5BTitle%5D)+AND+%22Liver+Int%22%5BJournal%5D)">Rodent models of partial hepatectomies.</a> Liver Int. 28, 3-11 (2008).</li>
<li>Russell, W. M. S., Burch, R. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aRussell%2C+WMS+%22The+Principles+of+Humane+Experimental+Technique%22">The Principles of Humane Experimental Technique</a>. , Methuen & Co. Ltd. London. reprinted by UFAW (1992).</li>
</ol>

Non ci sono conflitti di interesse da dichiarare. I ratti sono alloggiati sotto specifica-esenti da organismi patogeni condizioni secondo le linee guida della Federazione Associazioni di Laboratorio Scienza animali (FELASA). Tutti gli esperimenti sono stati condotti in conformità con la legge federale tedesca in materia di protezione degli animali e della &quot;Guida per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio&quot; (National Institutes of Health pubblicazione n ° 86-23, riveduta 1985).

Il primo modello di OLT ratto è stato riportato da Lee et al. Nel 1973 9, in cui tutte le navi comprese dell&#39;arteria epatica sono stati ricostruiti da un cucita a mano e il metodo shunt porto extracorporeo è stato utilizzato. Questo modello era tecnicamente complicato e difficile da eseguire. Il modello successivo è stato uno senza ricostruzione arteriosa epatica e lo shunt extracorporea, sviluppato dagli autori stessi 10 nel 1975. Successivamente, nel 1979, Kamada et al. Ha introdotto la tecnica di anastomosi bracciale per il modello senza rearterialization epatica 11. Con queste modifiche, OLT nei ratti è stato semplificato con un tempo anepatica abbreviato in operazioni destinatario ed è stato ampiamente utilizzato come modello sperimentale accettato. Tuttavia, non vi è stata da allora notevoli controversie sul significato di arterialization epatica nel ratto OLT 8 perché il arterialization è stato un compito impegnativo, ma did non influenzano la sopravvivenza dopo il trapianto. Numerosi studi su arterialization epatica utilizzando varie tecniche di ricostruzione sono stati riportati 8, ad esempio un segmento aortico-to-aorta anastomosi 3,9,17, una tecnica di anastomosi bracciale 18,19,20, una tecnica telescopica 5, una tecnica stent 13, 16, e una tecnica di anastomosi manicotto 12,21-23. Mentre la tecnica di OLT ratto non è ancora standardizzata oggi, il modello arterializzato è stata sempre favorita in termini di superiorità fisiologica 8,12,13,14. Tra le tecniche sopra menzionate, una tecnica stent che era semplice e veloce per eseguire stata riportata da Lehmann et al. 16 del 2005. Lo studio ha mostrato ottimi risultati: no rate occlusione è stata osservata in arteria epatica ricostruito a 8 ore, 24 ore, e 6 mesi dopo la riperfusione. Abbiamo quindi adottato questa tecnica per arterialization epatica. Abbiamo Performa cucito a mano anastomosi per la ricostruzione del SHVC e IHVC. Questo metodo fornisce il sito anastomosi con una condizione ottimale fisiologica, che porta alla ridotta incidenza di trombosi 8, ed è la migliore simulazione microchirurgia e formazione per i chirurghi. Inoltre, l&#39;anastomosi può essere possibile anche con ceppi vaso brevi. Concernente l&#39;anastomosi di IHVC, questo metodo non richiede una lunga IHVC sul lato dell&#39;innesto rispetto alla tecnica anastomosi bracciale. Pertanto, quando la vena renale donatore è sezionato per rendere il IHVC innesto lungo, questo metodo è applicabile al trapianto di un piccolo innesto che necessita di un IHVC lungo, come un innesto 30% che consiste di lobi laterali destra e caudato con intraepatico breve vena cava senza SHVC 2. Per quanto riguarda le tecniche di resezione del fegato nei ratti, fino ad oggi diversi metodi sono stati segnalati, le due tecniche principali sono la classica tecnica della legatura di massae la nave orientato tecnica 24. Abbiamo eseguire la tecnica classica legatura per resezione epatica 50% 15, ma sotto un microscopio chirurgico per rendere la procedura più fine, e per evitare danni ai lobi rimanenti e strutture. Abbiamo descritto i risultati rappresentativi dei ratti destinatario nel nostro modello, i topi sono sopravvissuti durante il periodo di 7 giorni di osservazione senza complicazioni apparenti. Il modello può essere modificato per scopi diversi esperimenti scegliendo le impostazioni diverse, come prolungato stoccaggio a freddo, prolungata ischemia calda che comprende donazione dopo morte cardiaca, e l&#39;utilizzo di fegati piccole o innesti di modelli sperimentali di danno al fegato o malattie. Nella nostra esperienza, ci sono tre fattori chiave delle procedure che possono influenzare la sopravvivenza dopo il trapianto, il parametro più affidabile per i risultati di OLT ratto: la quantità di perdita di sangue, il tempo di funzionamento, gli eappositamente bloccaggio tempo della vena porta e IHVC, e l&#39;adeguatezza della ricostruzione di una nave, che potrebbe causare una stenosi, trombosi, o sanguinamento. In un periodo di formazione di questo modello, la maggior parte dei fallimenti potrebbe probabilmente essere correlato a tali fattori. In questo articolo video, vi presentiamo passo-passo le istruzioni per le procedure chirurgiche per il nostro modello di ratto di OLT parziale con ricostruzione arteriosa epatica. Mentre un modello di ratto di OLT è complicato e richiede competenze avanzate di microchirurgia, in questo articolo fornisce un sacco di informazioni pratiche, che dovrebbe servire come una buona guida per la formazione e l&#39;apprendimento di questo modello. Apprendimento questo modello efficiente è particolarmente importante per abbreviare il periodo di apprendimento, riducendo il numero di animali e costi necessari per la pratica, e poi riprodurre risultati affidabili in esperimenti. Ciò è in linea con il concetto delle 3R (sostituzione, riduzione e perfezionamento) degli esperimenti sugli animali, che è stata postulata da Russel e Burch nel1959 25.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Commenti </td></tr><tr><td> Microscopio chirurgico </td><td> Leica </td><td> M651 </td><td></td></tr><tr><td> Sorgente di luce </td><td> Schott </td><td> KL1500LCD </td><td></td></tr><tr><td> Tamponi di cotone </td><td> NOBA Verbandmittel </td><td> 974202 </td><td></td></tr><tr><td> Tamponi di garza (5x5 cm) </td><td> Fuhrmann </td><td> 10002 </td><td></td></tr><tr><td> povidone-iodio soluzione </td><td> Mundipharma </td><td> 6108022.00.01 </td><td></td></tr><tr><td> Olio a base di argilla </td><td> Debika società </td><td> 090148 </td><td></td></tr><tr><td> TachoSil </td><td> Takeda Pharmaceuticals International GmbH </td><td> EU/1/04/277/001-004</td><td> Applicato al fegato superficie resecata </td></tr><tr><td> Bisturi lama n ° 11 </td><td> Pfm medico </td><td> 200130011 </td><td> Preparazione del bracciale e stent </td></tr><tr><td> Calibro 14 catetere </td><td> B. Braun </td><td> 4268210S </td><td> Bracciale per il fotovoltaico </td></tr><tr><td> 18-gauge catetere </td><td> B. Braun </td><td> 4268130S </td><td> Perfusione via PV </td></tr><tr><td> 24-gauge catetere </td><td> B. Braun </td><td> 4269071S </td><td> Stent per BD e HA </td></tr><tr><td> Seta filo di sutura 4-0 </td><td> Resorba </td><td> H3F </td><td> Resezione epatica </td></tr><tr><td> 6-0 seta sutura </td><td> Resorba </td><td> H1F </td><td></td></tr><tr><td> 7-0 Prolene (polipropilene) sutura </td><td> Ethicon </td><td> 8701H </td><td> SHVC e IHVC </td></tr><tr><td> 4-0 sutura Vicryl </td><td> Ethicon </td><td> V304H </td><td> Chiusura addominale </td></tr><tr><td> Siringa da 5 ml </td><td> Terumo </td><td> SS + T05ES1 </td><td> Eseguire il cuscino </td></tr><tr><td> Riscaldamento pad </td><td> Thermo </td><td> 190 x 260 mm </td><td></td></tr><tr><td> Magnetico fissatore retrazione </td><td> Belle Science Tools Inc. </td><td> 18200-01 18200-02 18200-03 18200-12 </td><td></td></tr><tr><td> Bagno di acqua fredda </td><td> Huber </td><td> 740.000X </td><td> Conservazione Graft </td></tr><tr><td> Pinza bipolare </td><td> Promotrice </td><td> MBC-200 </td><td></td></tr><tr><td> Pinza Mosquito </td><td> BONIMED </td><td> 451-476-03 </td><td> Due coppie usate </td></tr><tr><td> Adson micro pinza </td><td> Dimeda </td><td> 10.176.12 </td><td></td></tr><tr><td> Mi curvocro pinza </td><td> AESCULAP </td><td> FD281R </td><td></td></tr><tr><td> Dritti pinza micro </td><td> Bonimed </td><td> 451-476-03 </td><td></td></tr><tr><td> Curve forbici micro </td><td> Medicon </td><td> 05.15.83 </td><td></td></tr><tr><td> Dritti forbici micro </td><td> AESCULAP </td><td> FD12 </td><td> Incisione fine </td></tr><tr><td> Forbici </td><td> AESCULAP </td><td> BC211W </td><td></td></tr><tr><td> Micro supporto dell&#39;ago </td><td> AESCULAP </td><td> FD241R </td><td> Ricostruzione </td></tr><tr><td> Il sindaco-Hegar Porta aghi </td><td> Mizuho Ikakogyo </td><td> 06-798-00 </td><td> Chiusura addominale </td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog morsetto (diritto) </td><td> ULRICH </td><td> CV3054 </td><td></td></tr><tr><td> DeBakey Bulldog morsetto (curva) </td><td> Codman </td> &lt;td&gt; 37-1062 </td><td></td></tr><tr><td> Satinsky morsetto </td><td> Mizuhoika </td><td> 09-230-24 </td><td></td></tr><tr><td> Pinza vascolare periferica </td><td> Teleflex Medical </td><td> 353494 </td><td> Destinatario SHVC </td></tr><tr><td> Nave morsetto Micro (usa e getta) </td><td> AROSurgical Instruments Corporation </td><td> TKM-1-60 g </td><td> PV, IHVC innesto, e il destinatario HA </td></tr><tr><td> Nave fascetta Micro (metallo) </td><td> Belle Science Tools Inc. </td><td> 18052-01 </td><td> Destinatario IHVC </td></tr><tr><td> Soluzione di Ringer lattato </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 6150917.00.00 </td><td></td></tr><tr><td> Normale soluzione salina </td><td> DeltaSelect </td><td> 1299.99.99 </td><td></td></tr><tr><td> HTK soluzione </td><td> Dr. Franz Köhler Chemie GmbH </td><td> 31268.00.00 </td><td> Conservazione soluzione </td></tr><tr><td> Eparina-Natrium </td><td> Ratiopharm </td><td> 5394.02.00 </td><td> 500 UI prima di perfusione innesto </td></tr><tr><td> Bicarbonato di sodio 8,4% </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 4399.97.99 </td><td> 0,5 ml dopo la riperfusione </td></tr><tr><td> Soluzione di glucosio 5% </td><td> B. Braun </td><td> 6714567.06.00 </td><td> 1,0 ml dopo la riperfusione </td></tr><tr><td> Cefuroxim sodio </td><td> Fresenius Kabi </td><td> 38985.01.00 </td><td> Antibiotico, 16 mg / kg </td></tr><tr><td> Buprenorfina </td><td> Essex Pharma </td><td> 997.00.00 </td><td> Painkiller, 0,1 mg / kg </td></tr><tr><td> Intensive Care Cage Unità </td><td> Brinsea Products Ltd. </td><td> Vetario S10 </td><td> Cura postoperatoria </td></tr></tbody></table>

procedure chirurgiche per un modello di rat parziale trapianto di fegato con la ricostruzione arteriosa epatica

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Trapianto di fegato (OLT) nei ratti utilizzando un innesto totale o parziale, è indispensabile un modello sperimentale per la ricerca trapianto, come ad esempio gli studi sulla conservazione del trapianto e ischemia-riperfusione 1,2 lesioni, risposte immunologiche 3,4, 5,6 emodinamica, e di piccole dimensioni per la sindrome di 7. La OLT ratto è tra i modelli animali più difficili in chirurgia sperimentale e microchirurgia richiede competenze avanzate che richiedono molto tempo per imparare. Di conseguenza, l&#39;uso di questo modello è stato limitato. Dal momento che l&#39;affidabilità e la riproducibilità dei risultati sono componenti chiave degli esperimenti in cui si utilizzano tali modelli animali complessi, è fondamentale per i chirurghi che sono coinvolti nel OLT ratto per essere addestrato nelle procedure ben standardizzate e sofisticata per questo modello. Mentre varie tecniche e modifiche di OLT nei ratti sono stati riportati 8 Poiché il primo modello è stato descried da Lee et al. 9 nel 1973, l&#39;eliminazione della arteria epatica ricostruzione 10 e l&#39;introduzione della tecnica anastomosi bracciale da Kamada et al. 11 erano un avanzamento importante in questo modello, perché semplificato le procedure di ricostruzione in grande misura . Nel modello da Kamada et al., Il rearterialization epatica è stato eliminato. Dal momento che i ratti possono sopravvivere in assenza di flusso in arteria epatica dopo trapianto di fegato, vi è stata polemica considerevole rispetto al valore di arterialization epatica. Tuttavia, la superiorità del modello fisiologico arterializzato è stato sempre più riconosciuto, soprattutto in termini di preservazione del sistema biliare 8,12 e dell&#39;integrità fegato 8,13,14. In questo articolo, vi presentiamo dettagliate procedure chirurgiche per un modello murino di OLT con ricostruzione arteriosa epatica con un innesto parziale del 50% dopo resezione epatica ex vivozione. Le procedure di ricostruzione per ciascuna nave e il dotto biliare vengono eseguite con i seguenti metodi: un 7-0 sutura in polipropilene continuo per la sovra-e sottoepatica vena cava; una tecnica bracciale per la vena porta, e una tecnica di stent per l&#39;arteria epatica e il dotto biliare.

Tutti i ratti destinatario (n = 20) sono sopravvissuti senza complicazioni apparenti fino a quando l&#39;eutanasia previsto per il prelievo del sangue a 1, 3, 24, e 168 ore (7 giorni) dopo la riperfusione portale (n = 5 ad ogni tempo). I campioni di sangue sono stati prelevati dalla IHVC da una puntura diretta con un ago di calibro 27. Dopo la centrifugazione a 5340 xg per 10 minuti, i campioni di siero sono stati ottenuti e analizzati per alanina aminotransferasi (ALT), che riflettono il grado di danno epatocellulare dopo il trapianto. Il tempo impiegato per cambiamenti nei livelli sierici di ALT è mostrato in Figura 16. I livelli di ALT ha raggiunto un picco a 24 ore (media ± deviazione standard: 212,6 ± 67,9 IU / L), per poi scendere entro i limiti normali a 168 ore (33,6 ± 6,8 UI / L). <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig1.jpg" /> Figura 1. A bracciale per la vena porta (PV) da 14-calibro del catetere, e stent per l&#39;arteria epatica (HA) e del dotto biliare (BD) da 24-gauge cateteri. <img alt="Figura 2" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig2.jpg" /> Figura 2. Schema della rimozione del fegato da donatore ratto BD, del dotto biliare,. HA, arteria epatica; IHVC, sottoepatica vena cava, PV, della vena porta, SHVC, sovraepatica vena cava. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig3.jpg" /> Figura 3. Donatore funzionamento. a. Il ratto viene posto su una piastra elettrica con un sistema magnetico retrazione fissatore. L&#39;addome viene aperto da una incisione mediana con estensioni bilaterali. B. Inserimento dello stent nel dotto biliare. C. Perfusione del fegato attraverso la vena porta. Abbreviazioni sono spiegareed in Figura 2. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig4.jpg" /> Figura 4. Fissaggio di un bracciale alla vena porta. a, b. La pinza DeBakey Bulldog che afferra il tronco venoso portale viene posta sopra la tazza di metallo. La coppa è montato nella scatola di plastica riempito di ghiaccio tritato. C. La vena porta è messa attraverso il bracciale. D. La parete della vena porta è rovesciato sopra il bracciale con il moncone della vena splenica fuori il bracciale al 7 posizione ore e l&#39;estensione del bracciale nella posizione delle ore 12. e. La vena porta è fissata con un filo di seta circonferenziale 6-0 sul bracciale. Le frecce nere indicano il moncone della vena splenica. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig5.jpg" /> Figura 5. Ex vivoinserimento di uno stent nell&#39;arteria epatica. a. Il fegato è fissata serrando entrambi i bordi del diaframma, e l&#39;arteria epatica viene tirato dritto tenendo il filo ligato per l&#39;arteria. b. La parete anteriore della piccola incisione sulla arteria epatica è tenuto con una pinza diritte micro . c, d. Lo stent viene inserito nell&#39;arteria epatica e fissato con un filo di seta 6-0. <img alt="Figura 6" fo:content-width="3.5in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6highres.jpg" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig6.jpg" /> Figura 6. Lo schema di resezione epatica ex vivo al 50%. Lobi in colore grigio vengono rimossi. ACL, anteriore lobo caudato, PCL, lobo caudato posteriore; LLL, lobo sinistro laterale; LML, parte sinistra del lobo mediano, RML, parte destra del lobo mediano, SRL, superiore del lobo laterale destro, IRL, inferiore del lobo laterale destro. Figura 7. Ex resezione epatica vivo 50%. un. legatura del peduncolo del lobo caudato posteriore. b. legatura del peduncolo della porzione sinistra del lobo mediano. c. Il fegato prima 50% resezione. d. fegato dopo resezione 50%. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig8.jpg" /> Figura 8. Ex vivo plasty del sovraepatica vena cava. a. Il fegato è fissata serrando i due lati della membrana con le pinzette zanzara. b. Soggiorno con suture 7-0 polipropilene sono collegati ad entrambi gli angoli. <img alt="Figura 9" fo:content-width="4in" fo:src="/files/ftp_upload/4376/4376fig9highres.jpg" src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig9.jpg&quot; /&gt; Figura 9. Schema di impianto dell&#39;innesto nel ratto ricevente. Le procedure di ricostruzione vengono eseguite per il sovra-e sottoepatica vena cava (SHVC e IHVC) con una sutura 7-0 continuo, la vena porta (PV) mediante una tecnica di bracciale, e l&#39;epatica arteria (HA) e del dotto biliare (BD) mediante una tecnica stent. <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig10.jpg" /> Figura 10. Funzionamento beneficiario fino alla rimozione del fegato nativo. a. L&#39;addome viene aperto da una incisione mediana. b. La vena surrenalica destra è legato. c. il fegato nativo viene asportato. Abbreviazioni sono illustrate nella Figura 2. <img alt="Figura 11" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig11.jpg" /> Figura 11. Anastomosi del suprahepatico vena cava. a, b. La pinza vascolare periferica per la vena cava sovraepatica è fissato in un grumo di olio a base di argilla. Le suture in entrambi gli angoli sono mantenuti con una leggera trazione superiolaterally per allargare l&#39;anastomosi. C. Continua sutura intraluminale della fila posteriore in corso. D. Sutura continua della fila anteriore in corso. <img alt="Figura 12" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig12.jpg" /> Figura 12. Ricostruzione della vena porta. a, b. La pinza di serraggio zanzara vena porta è fissato in argilla a base di olio e tirato verso l&#39;ilo epatico. cf. Inserimento del bracciale nella vena porta. <img alt="Figura 13" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig13.jpg" /> Figura 13. Ricostruzione dell&#39;arteria epatica. a, b. </stron<html> g inserimento&gt; di uno stent nell&#39;arteria epatica comune destinatario (CHA) alla biforcazione dell&#39;arteria epatica propria (PHA) e dell&#39;arteria gastroduodenale (GDA). <img alt="Figura 14" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig14.jpg" /> Figura 14. Anastomosi del sottoepatica vena cava. a. Le suture in entrambi gli angoli. b. sutura continua della fila posteriore. c. sutura continua della fila anteriore. d. riperfusione del sottoepatica vena cava. Abbreviazioni sono illustrate nella Figura 2. <img alt="Figura 15" src="/files/ftp_upload/4376/4376fig15.jpg" /> Figura 15. Tutte le procedure di ricostruzione sono finiti. Abbreviazioni sono illustrate nella Figura 2. <img alt="&lt;/ Html">&quot;Figura 16&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/4376/4376fig16.jpg&quot; /&gt; Figura 16 postoperatoria time-course delle variazioni di sierici di alanina aminotransferasi (ALT) (n = 20; n = 5 in ogni punto).. I dati sono espressi come medie con barre di errore che indicano deviazioni standard. I livelli di ALT ha raggiunto un picco a 24 ore (212,6 ± 67,9 IU / L), per poi scendere entro i limiti normali a 168 ore (33,6 ± 6,8 UI / L).

Trapianto di fegato nei ratti è un modello sperimentale indispensabile per la ricerca biomedica. Qui vi presentiamo le nostre procedure chirurgiche per il trapianto ortotopico di fegato di ratto con la ricostruzione arteriosa epatica con un trapianto parziale del 50%.

Procedure chirurgiche per un modello di Rat parziale trapianto di fegato con la ricostruzione arteriosa epatica

Il trapianto di fegato ortotopico (OLT) nei ratti, mediante l'utilizzo di un graft totale o parziale, rappresenta un modello sperimentale indispensabile per la ricerca sui trapianti, come ad esempio...

L'obiettivo generale di questo procedimento è eseguire un trapianto epatico ortotopico parziale in ratti come modello sperimentale riproducibile per la ricerca sui trapianti. Questo viene realizzato innanzitutto rimuovendo il fegato dal ratto donatore. Il secondo passaggio consiste nella preparazione del fegato trapiantabile ex vivo, inclusa una resezione epatica del 50%.Successivamente, il fegato nativo del ratto ricevente viene escisso. L'ultimo passaggio consiste nell'impianto del trapianto epatico parziale nel ratto ricevente. Infine, vengono misurati i livelli sierici di alanina aminotransferasi per valutare il danno epatocellulare al trapianto epatico dopo il trapianto.Generalmente, le persone alle prime armi con questa procedura incontrano difficoltà a causa della complessità dell'intervento, che richiede competenze microchirurgiche avanzate. Per iniziare la procedura, posizionare il ratto donatore anestetizzato su un tappetino riscaldante dopo aver verificato mediante pizzicamento del dito del piede che l'animale è completamente anestetizzato, quindi fissare gli arti superiori utilizzando il sistema di retrazione con fissatore magnetico. Rasare il pelo su tutta l'area addominale del ratto e sterilizzare la cute corrispondente con una soluzione di iodopovidone.Aprire l'addome mediante incisione mediana con estensioni bilaterali. Posizionare una siringa da cinque millilitri sotto la schiena del ratto in modo che la vena cava sopraepatica venga sollevata in senso ventrale utilizzando una pinza emostatica di piccole dimensioni, tirare la struttura verso la testa e applicare i retrattori sottocostali per aprire il campo operatorio. A causa della necessità di manipolare frequentemente i retrattori e la siringa da cinque millilitri durante l'intervento, non si utilizzano campi chirurgici intorno all'incisione; lavorando sotto un microscopio operatorio a un ingrandimento di 16x, dissezionare il legamento falciforme e il legamento triangolare sinistro a forma di otto, sezionare la vena frenica sinistra e retrarre verso l'alto i lobi mediano e laterale sinistro con un tampone di garza bagnata.Utilizzando pinze bimancali, coagulare e dividere i vasi paraesofagei tra il lobo laterale sinistro e quello anteriore. Spostare gli intestini all'esterno dell'addome, portandoli sul lato sinistro del ratto, e coprirli con una garza umida. Tamponare e ritrarre verso l'alto il lobo laterale destro utilizzando una garza umida.Isolare la vena cava infrarenale dal tessuto retroperitoneale e legare la vena surrenale destra, che verrà recisa successivamente, poco prima del prelievo del trapianto, per inserire uno stent nel dotto biliare; in primo luogo, legare il dotto biliare al livello della biforcazione dell'arteria gastroduodenale. Praticare una piccola incisione nella parete anteriore del dotto biliare, prossimale al punto legato; quindi, tenendo la parete anteriore dell'incisione con una pinzetta microchirurgica dritta nella mano sinistra, utilizzare una pinzetta microchirurgica curva nella mano destra per inserire uno stent nel dotto. Fissarlo con un filo di seta sei zero.Mantenere uno dei capi tagliati del filo sul dotto biliare a una lunghezza di quattro millimetri, in modo che il filo possa essere trattenuto durante l'anastomosi successiva. Liberare la vena porta dalle vene portale e splenica legandole e sezionandole; legare e dividere l'arteria gastroduodenale. Quindi isolare l'arteria epatica comune dalla testa del pancreas fino alla sua radice.Ruotare il fegato verso destra con bastoncini di cotone e dissezionare il legamento intorno alla parte posteriore del fegato e all'esofago al termine delle preparazioni. Per l'escissione epatica. Rimuovere i retrattori, la pinza emostatica per il processo xifoidale e la siringa da cinque millilitri posizionata sotto la parte posteriore del ratto.Riposizionare l'intestino nella cavità addominale. Iniettare 500 IU di eparina sodica in due millilitri di soluzione salina fisiologica attraverso la vena peniena. Circa tre minuti dopo, riposizionare la siringa da cinque millilitri, le pinze emostatiche e il retra­tore per legare l'arteria epatica comune in prossimità della sua radice.Mantenere uno dei capi tagliati del filo legato per l'arteria epatica comune. A lungo dopo aver clampato la vena cava infraepatica. Vicino alla vena renale destra con una pinza emostatica fine.Clampare la vena porta con una pinza monouso per microvasi al di sotto del moncone della vena splenica. Incidere la parete anteriore della vena porta ed inserire un catetere di calibro 18 nella vena porta. Perfundere il fegato in situ con 60 millilitri di soluzione fredda di chetoglutarato di istidina e triptofano.A una pressione idrostatica di 20 centimetri, l'acqua taglia immediatamente il diaframma, la vena cava intratoracica e la parete anteriore della vena cava infraepatica, permettendo così al soluto di perfusione di essere lavato fuori dal fegato. Clampare la vena cava infraepatica con una pinza per microvasi appena al di sotto del fegato. Asportare il fegato dissezionando la vena cava infraepatica.La vena porta, il diaframma, i legamenti rimanenti, la vena surrenale destra e l'arteria epatica comune. Posizionare il fegato escisso in una soluzione fredda di HTK all'interno di un bicchiere metallico inserito in una scatola di plastica piena di ghiaccio tritato org. Le procedure per il trapianto epatico vengono eseguite nel bicchiere metallico riempito con soluzione di HTK ghiacciata per l'applicazione di un manicotto alla vena porta: clampare il tronco venoso portale con un clamp DeBakey bulldog e posizionare il clamp in posizione di collegamento sopra il bicchiere.Fare passare la vena porta attraverso il manicotto e clampare nuovamente la vena al portata insieme all'estensione del manicotto nella posizione delle 12, rivoltare la parete della vena porta sul manicotto in modo da posizionare il moncone della vena splenica all'esterno del manicotto nella posizione delle sette e fissare la vena porta con un filo di seta sei zero per inserire uno stent nell'arteria epatica. Fissare il fegato clampando entrambi i margini del diaframma con pinze ed estendere l'arteria epatica comune tenendo il filo legato con la pinza bulldog DeBakey e forbici microchirurgiche dritte. Praticare una piccola incisione nella parete anteriore dell'arteria epatica comune con la mano sinistra.Tenere la parete anteriore dell'incisione con una pinzetta microchirurgica dritta e, con la mano destra, inserire un stent nell'arteria epatica comune. Utilizzando una pinzetta microchirurgica curva, fissare lo stent con un filo di seta sei zero e mantenere uno dei capi tagliati del filo lungo quattro millimetri. Lavare il fegato attraverso il catetere arterioso con cinque millilitri di soluzione HTK fredda per la resezione epatica al 50%.Prima fissare il lobo della coordinata posteriore con una pinzetta da mosca per mantenerlo in posizione. Quindi legarlo con un filo di seta quattro zero ed escindere il lobo.Il lobo corato anteriore viene rimosso nello stesso modo. Successivamente, ruotare la scatola di plastica di 90 gradi. Stringere il bordo destro del diaframma e la porzione sinistra del lobo mediano.Eseguire una piccola incisione al margine superiore del confine tra le porzioni bilaterali del lobo mediale, quindi rimuovere la porzione sinistra dopo la legatura. Dopo la legatura del peduncolo con un filo di seta quattro zero, rimuovere il lobo laterale sinistro e cauterizzare attentamente la superficie epatica resecata con pinze bipolari. La massa epatica è ora ridotta di circa il 50% per la plastica della vena cava sopraepatica.Prima, fissare la posizione del fegato bloccando entrambi i margini del diaframma con una pinza emostatica. Quindi, rimuovere la parte corrispondente del diaframma per sagomare la parete anteriore della vena cava sopraepatica. Applicare 2 suture in polipropilene 7-0 dall'esterno all'interno ai due angoli come suture di trazione per l'anastomosi successiva.In seguito, rimuovere la parete posteriore della vena cava sopraepatica. Conservare il graft epatico a quattro gradi Celsius in soluzione HTK in un bagno di acqua fredda. Preparare il ricevente per l'intervento chirurgico in modo analogo a quanto fatto per il donatore e aprire l'addome mediante incisione mediana.Posizionare un tampone umido di garza sulla parte destra del duodeno e sull'intestino intero. Per ottenere un campo operatorio attorno alla vena cava sottoepatica. Inserire i lobi laterale sinistro e mediale nella cavità sottodiaframmatica sinistra e retrarre il lobo laterale destro verso l'alto con un tampone di garza umido.Isolare la vena cava infraepatica dal tessuto retroperitoneale legato e dividere la vena surrenale destra con garze umide e bastoncini di cotone. Ruotare il fegato verso sinistra e dissezionare il legamento intorno alla parte posteriore del fegato. Trassecare il dotto biliare appena al di sotto del ramo proveniente dal lobo caudato.Mantenere uno dei capi tagliati del filo legato per il dotto biliare lungo quattro millimetri; legare e dividere l'arteria gastroduodenale e l'arteria epatica propria a una distanza di tre millimetri dal punto di biforcazione dall'arteria epatica comune, in modo da ottenere una struttura arteriosa ampia all'estremità dell'arteria epatica comune. Clampare la vena cava infraepatica con una pinza metallica per microvasi appena al di sopra della vena renale destra e la vena porta al livello della sua biforcazione nell'ilo epatico mediante una pinza emostatica di piccole dimensioni; clampare la vena cava sopraepatica insieme al diaframma mediante una pinza vascolare periferica e fissare la pinza in un blocco di argilla oleosa. Ridurre l'anestesia con isoflurano allo 0,4 percento in volume. Asportare il fegato nativo del ricevente dissezionando la vena cava sopraepatica al confine tra la vena cava sopraepatica e il fegato.La vena porta appena sopra la punta della pinzetta per zanzare e la vena cava infraepatica leggermente al di sotto del punto medio tra il fegato e la vena renale destra. Posizionare l'innesto epatico in sede ortotopica. La ricostruzione dei vasi è la parte più difficile e importante di questa procedura.Deve essere eseguito con molta attenzione ma rapidamente per l'anastomosi della vena cava sopraepatica mediante sutura continua. Posizionare la sutura di trazione sulla vena cava sopraepatica del ricevente dall'interno verso l'esterno utilizzando il polipropilene sette zero allegato all'angolo destro del graft, quindi annodare nello stesso modo. Posizionare la seconda sutura di trazione all'angolo sinistro.Questa sarà la prima puntura di una sutura continua. Per allargare l'anastomosi, afferrare e mantenere i punti utilizzando pinze DeBakey bulldog su entrambi gli angoli, esercitando una trazione delicata in direzione superolaterale. Successivamente, perforare il punto all'angolo sinistro attraverso la parete sul lato del graft, dall'esterno verso l'interno, vicino al nodo esterno, e suturare la fila posteriore della vena cava satia intraluminale con sette-otto punti fino all'angolo destro.Eseguire con attenzione le prime punture in modo che i lumi interni si trovino uno di fronte all'altro nell'angolo corretto. Far passare il polipropilene sette zero attraverso il vaso dal lato dell'innesto verso l'esterno. Suturare la fila anteriore dall'esterno verso sinistra con circa 10 punti.Sciacquare l'interno con soluzione di Ringer lattato. Per rimuovere le bolle d'aria, eseguire l'ultima sutura vicino alla sutura di ritenzione e quindi annodarle insieme. Per la ricostruzione della vena porta, clampare la vena porta mediante un clamp per microvasi e fissare la pinza emostatica nell'argilla. Successivamente, incidere la parete anteriore della vena porta appena al di sotto della ganascia della pinza emostatica.Lavare l'interno della vena porta del ricevente e il manicotto con soluzione di Ringer lattato. Inserire il manicotto nella vena porta e fissarlo con un filo di seta di calibro sei zero disposto in senso circonferenziale. Infine, ripristinare la perfusione del fegato.Rimuovere la siringa da cinque millilitri dalla parte posteriore del ratto e aumentare la concentrazione di isoflurano allo 0,8 percento in volume per la ricostruzione del fegato mediante tecnica con stent. Prima, afferrare il filo dell'arteria epatica propria con pinzette emostatiche di piccole dimensioni e fissarlo nell'argilla. Quindi, clampare l'arteria epatica comune del ricevente.Praticare una piccola incisione nella biforcazione della struttura a Y all'estremità dell'arteria epatica comune per creare un'apertura a forma di imbuto. Tenere lo stent posizionato nell'arteria epatica comune del trapianto con una pinzetta microchirurgica curva. Inserire lo stent nell'arteria epatica comune del ricevente e fissarlo con un filo di seta sei-zero; legare un'estremità di questo filo insieme al filo di quattro millimetri presente sull'arteria epatica comune del trapianto, in modo che le due arterie epatiche comuni si avvicinino riducendo la tensione sul sito di anastomosi.In seguito, rilasciare il morsetto per l'anastomosi della vena cava infraepatica mediante sutura continua in modo analogo a quanto fatto per la vena cava sopraepatica, ma utilizzando punti più numerosi e con bocconi più fini. Dopo la rimozione del morsetto, aumentare la concentrazione dell'anestetico al 1,0 percento in volume per la ricostruzione del dotto biliare. Trattenere il filo del dotto biliare del ricevente con una pinza emostatica fine e fissarlo nell'argilla.Eseguire una piccola incisione nel dotto biliare al livello appropriato in modo che il dotto biliare ricostruito non risulti troppo lungo. Inserire lo stent e fissarlo con un filo di seta sei zero. Annodare questo filo insieme al filo sul dotto del trapianto.Ora tutte le procedure di ricostruzione sono terminate. Chiudere l'incisione addominale mediante punti continui in Vicryl 4-0 a strati. Immediatamente dopo l'intervento, trattare il ratto ricevente con un'iniezione sottocutanea di sodio sféro e buprenorfina in un totale di 1,5 millilitri di soluzione salina fisiologica.Lasciare che il ratto si riprenda per 60 minuti in una gabbia appositamente adibita a unità di terapia intensiva, con aria calda e fornitura di ossigeno, prima di riportarlo in una gabbia normale. Tutti i ratti riceventi sono sopravvissuti fino all'eutanasia programmata per il prelievo di sangue a 1, 3, 24 e 168 ore dopo la riperfusione portale. I campioni di siero sono stati analizzati per determinare i livelli di alanina aminotransferasi, che riflettono il grado di danno epatocellulare nei trapianti di fegato dopo il trapianto.Come mostrato in questo grafico, i livelli di LT hanno raggiunto un picco a 24 ore per poi diminuire entro i limiti normali a 168 ore. Al termine di questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come eseguire il trapianto parziale di fegato in ratti come modello sperimentale riproducibile per la ricerca sui trapianti.

surgical-procedures-for-rat-model-partial-orthotopic-liver

Research

Ricerca

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Vi presentiamo uno facile da stabilire revisione della classica due-bracciale tecnica di trapianto di fegato nel ratto.

Trapianto di fegato in ratti

Trapianto di fegato ausiliario fornisce un supporto temporaneo in insufficienza epatica acuta, fino a quando la rigenerazione del fegato fallire. Il trapianto eterotopico ausiliario di fegato (HALT) con arterialization vena porta (PVA) rende del fegato è sufficiente. Abbiamo sviluppato una tecnica analoga nel ratto, di esaminare l'influenza del arterialization vena porta sulla morfologia e la funzione del trapianto.

Eterotopica ausiliario Ratto trapianto di fegato con flusso regolato Portal Vein arterialization in acuta insufficienza epatica

Qui, un protocollo che coinvolge il trapianto di fegato parziale ri-arterialized ratto è presentato. In particolare, 70% fegato è stato resecato in vivo utilizzando una tecnica aggiornata di hepatectomy orientato alla nave. L'arteria epatica è stato ricostruito in maniera fine--lato. La tecnica del polsino è stata modificata per accorciare i tempi di anastomosi della vena cava infrahepatic.

Ri-Arterialized trapianto parziale di fegato del ratto con un in vivo vaso-Oriented 70% Hepatectomy

La ricostruzione della vena cava suprahepatic (SHVC) rimane un passo difficile nel trapianto orthotopic del fegato del ratto. In questo articolo, vi mostriamo un protocollo passo-passo per la ricostruzione di SHVC in ratti facendo uso di una tecnica di anastomosi magnetico romanzo.

Un modello del ratto di orthotopic del trapianto del fegato usando una tecnica novella dell'anastomosi magnetico per la ricostruzione della Vena Cava Suprahepatic

L'obiettivo di questo studio è quello di modificare il modello di trapianto di fegato ortotopico per rappresentare meglio il trapianto di fegato umano e migliorare la sopravvivenza del destinatario. Il metodo presentato ristabilisce l'afflusso arterioso epatico collegando l'arteria epatica comune del fegato donatore all'arteria epatica corretta del fegato ricevente.

Complicazioni ridotte dopo la riconnessione arteriosa in un modello di ratto di trapianto di fegato ortotopico

Il protocollo di trapianto di fegato ausiliario eterotopico di ratto qui descritto offre uno strumento sperimentale pratico per esplorare i meccanismi di rigetto dell'allotrapianto epatico. Questo modello aiuta ad alleviare gli ostacoli chirurgici e lo stress animale del trapianto di fegato ortotopico nei ratti.

Modello di trapianto di fegato intero di ratto ausiliario eterotopico che utilizza un'epaticoureterostomia per studi di rigetto dell'allotrapianto

Questo video dimostra il modello di trapianto ortotopico aortica come un semplice modello per studiare lo sviluppo di vasculopatia trapianto (TVP) nei ratti.

Trapianto ortotopico aortica: un modello di ratto per studiare lo sviluppo di vasculopatia cronica

Qui, presentiamo un nuovo modello di fegato di topo umanizzato generato in topi knockout cellulare mediato dal recettore della tossina Alb (TRECK)/SCID a seguito del trapianto di cellule staminali epatiche umane immature ed espandibili.

Generazione di un umanizzato mouse Fegato Utilizzando epatici umani cellule staminali

Un modello di morsetto ilare unico fegato di ratto è stato sviluppato per studiare l'impatto di molecole farmacologiche nel migliorare danno da ischemia-riperfusione. Questo modello include incannulazione diretta della fornitura portale per il segmento epatico ischemico tramite un ramo della vena porta, consentendo la consegna epatica diretta.

Metodo di consegna diretta segmentale intra-epatico utilizzando un modello di fegato di ratto Hilar morsetto

Lo scopo di questo manoscritto e protocollo è quello di spiegare e dimostrare in dettaglio la procedura chirurgica del trapianto di rene ortotopico nei ratti. Questo metodo è semplificato per ottenere la corretta perfusione del rene donatore e abbreviare il tempo di riperfusione utilizzando la tecnica di anastomosi del polsino venoso e ureterale.

Trapianto di rene ortotopico ratto: un nuovo approccio chirurgico semplificato

Impara la tecnica chirurgica per il trapianto ortotopico parziale di fegato nel ratto con ricostruzione arteriosa epatica. Questo modello sperimentale riproducibile consente di studiare i danni epatocellulari misurando i livelli sierici di alanina aminotransferasi.

Procedure chirurgiche per un modello di Rat parziale trapianto di fegato con la ricostruzione arteriosa epatica

Esplora altri video