Name: In vivo Macrofago Imaging Utilizzando MR mirata di contrasto agente per la valutazione longitudinale di artrite settica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-10-20T21:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 15 s
Description: Scopri l'imaging dei macrofagi in vivo con agente di contrasto USPIO per valutare longitudinalmente l'artrite settica nel modello di coniglio. Questo metodo permette di monitorare non invasivamente l'infiltrazione cellulare e l'efficacia terapeutica nel tempo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ringraziamo di cuore F. Bierry per l&#39;assistenza nella produzione video e di editing.

Tutte le procedure che coinvolgono soggetti animali sono stati approvati dal Comitato Istituzionale Hospital Animal Care University. 1. L&#39;inoculazione batterica Strappo <ol><li> Prima dell&#39;iniezione, anestetizzare conigli mediante iniezione intramuscolare di ketamina (30 mg / kg di peso corporeo) mescolato con xilazina (4 mg / kg) entro erettori spinali muscolare. Garantire gli animali sono completamente anestetizzato controllando che non riescono a rispondere a zampa pizzico. Questo protocollo prevede anestesia sufficiente per l&#39;iniezione intra-articolare del ginocchio. Posizionare gli animali sotto la maschera di ossigeno durante l&#39;anestesia. </li><li> Shave ginocchio animali. Preparare il ginocchio per iniezione asettiche da 3 alternati salviette di povidone-iodio macchia e alcol seguita dalla applicazione della soluzione di iodio povidone. </li><li> Identificare manualmente il tendine rotuleo come una struttura elastica alla faccia anteriore del ginocchio usando un tappo ago sterile come illustrato oppure una sonda sterile. </li><li&gt; Con il controllo visivo e utilizzando un approccio anteriore, inserire un ago G 25 percutanea al ginocchio destro di ciascuno dei 12 conigli attraverso il tendine rotuleo. </li><li> Iniettare ciascun ginocchio con 1 ml di una sospensione batterica di Staphylococcus aureus (ceppo Neumann) ad una concentrazione di 10 6 UFC / ml. Una iniezione senza resistenza conferma la posizione intrarticolare della punta dell&#39;ago. </li><li> Dopo procedure di iniezione, tenere l&#39;animale sotto fonte convettivo per evitare dispersioni di calore e monitorare la frequenza respiratoria osservando movimento del torace. Una volta sveglio, tenere gli animali in gabbie con libero accesso a cibo e acqua. </li><li> Gestire il dolore con la somministrazione di un&#39;iniezione intramuscolare di 0,1 mg / kg di buprenorfina ogni 8 ore. </li><li> Clinicamente osservare conigli ogni giorno, il monitoraggio quantità consumate di cibo e acqua, perdita di peso, la temperatura, e il comportamento generale. </li><li> Per l&#39;immagine della fase acuta dell&#39;infezione eseguire prima sessione di imaging MR appenacome animale presenta notevole perdita di peso (10%); generalmente questo avviene dopo circa 2 giorni. </li><li> Se è necessaria la somministrazione del farmaco per via endovenosa prima di un esame MRI, un accesso venoso auricolare può essere installato (cfr. di seguito). </li></ol> 2. Esame MRI Quando l&#39;imaging di animali vivi, di un&#39;installazione animale attento è una caratteristica fondamentale per garantire il comfort degli animali e l&#39;anestesia ottimale. Questo permetterà di ottenere i migliori risultati di imaging e di garantire una acquisizione di immagini riproduttiva per studi longitudinali. A causa della dimensione dell&#39;animale, l&#39;uso di una unità MR clinico di dimensioni (1,5 T o T 3) è più adatto. Bobina ginocchio clinico 8-canale viene utilizzato in quanto fornisce adatto risoluzione e rapporto di contrasto-rumore per coniglio esplorazione ginocchio. <ol><li> Prima dell&#39;installazione del sistema di imaging, installare un accesso venoso periferico attraverso una vena auricolare. Questo accesso servirà per iniettare il mezzo di contrasto. <ol><li> Shave e disinfettare l&#39;orecchio. </li><li&gt; eseguire l&#39;anestesia locale per iniezione sottocutanea di lidocaina. </li><li> Inserire un catetere G 25 dentro l&#39;auricolare vena laterale. </li><li> Valutare la permeabilità mediante iniezione di 1 ml di soluzione fisiologica sterile. </li><li> Mantenere il catetere con intercettazioni adesivo. </li></ol></li><li> Anestetizzare animali tramite iniezione intramuscolare di ketamina (30 mg / kg di peso corporeo) mescolato con xilazina (4 mg / kg). Gli animali sono completamente anestetizzato una volta non riescono a rispondere a zampa pizzico. Posizionare una maschera facciale sul coniglio, dandogli ossigeno con una portata di 200 ml / min. </li><li> Una volta completamente anestetizzato, prendere gli animali per l&#39;unità imaging MR. Posto animali così che le ginocchia sono situati nel centro della bobina MR. Posizionare le zampe dell&#39;animale in estensione completa, in modo che l&#39;asse lungo della tibia sia parallelo al tavolo unità di imaging MR. Utilizzare velcro o sacchetti di sabbia per mantenere la posizione ottimale delle gambe. </li><li> Monitoraggio cardio-respiratorio degli animali non è richiesta laprotocollo di anestesia permette anestesia profonda respirazione spontanea, ma gli animali devono essere coperti per evitare dispersioni di calore anestesia indotta. </li><li> Protocollo MR è dettagliato in Tabella 1. Il tempo medio per l&#39;acquisizione totale compreso installazione ottimale è di circa 20 min. </li><li> Eseguire la RM in piani diversi. Nondimeno, il piano trasversale delle ginocchia (ortogonale alla tibia) è il piano di riferimento in quanto garantisce la riproducibilità anatomica della posizione dell&#39;immagine per esami longitudinali sequenziali e permette correlazione ottimale con fette istologiche. </li><li> Al completamento di sequenze non potenziate, iniettare l&#39;agente di contrasto UPSIO attraverso l&#39;accesso venoso auricolare. Somministrare lentamente le particelle di ossido di ferro in una singola dose di 150 micromol Fe / kg. Risciacquare il catetere mediante iniezione di 1 ml di soluzione fisiologica sterile. </li><li> Ripetere la sequenza rafforzata GRE pesata 24 ore dopo l&#39;iniezione. Questo ritardo consente alle particelle di essere fagocitati dai macrofagi. </li><li> Per gli studi longitudinali che valutano effetto farmaci (antibiotici, steroidi, anticorpi anti-macrofagi, ecc.), Ripetere esami RM sequenziali utilizzando il protocollo sopra descritto. </li></ol> 3. Image Analysis <ol><li> Per la valutazione longitudinale eseguire misure allo stesso livello anatomico, e di definire un punto di riferimento facilmente identificabile. Per esempio, attraverso l&#39;acquisizione piano assiale in cui si osserva il maggior diametro della rotula è un modo affidabile per ottenere la misurazione riproducibile (Figura 1). </li><li> Eseguire l&#39;analisi delle immagini utilizzando un software DICOM-based (come OsiriX) o un software di elaborazione delle immagini (ImageJ). </li><li> Utilizzando il software ImageJ, eseguire la segmentazione del territorio sinoviale che dimostra perdita di segnale sulle USPIO-enhanced GRE immagine pesata in T2 con la &quot;zona irregolare&quot; strumento di disegno. Una volta che la membrana sinoviale con segnale scuro è delineato, fai clic su &quot;Analizza&quot; per ottenere l&#39;area /numero di pixel (figura 2). </li></ol>

<ol><li>Madri, J. Inflammation and healing. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMadri%2C+J+%22Anderson%27s+Pathology%22">Anderson's Pathology</a>. Kissane, J. , 67-110 (1990).</li>
<li>Sephel, G., Woodward, S. Repair, regeneration, and fibrosis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSephel%2C+G+%22Rubin%27s+Pathology%22">Rubin's Pathology</a>. Rubin, R., Strayer, D. , 5th ed, Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia, PA. 71-98 (2008).</li>
<li>Verdrengh, M., Tarkowski, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+macrophages+in+Staphylococcus+aureus-induced+arthritis+and+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Rheum%22%5BJournal%5D)">Role of macrophages in Staphylococcus aureus-induced arthritis and sepsis.</a> Arthritis Rheum. 43 (10), 2276-2282 (2000).</li>
<li>Heale, J., Speert, D. Macrophages in bacterial infection. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHeale%2C+J+%22The+Macrophage%22">The Macrophage</a>. Burke, B., Lewis, C. , Oxford University Press. Oxford, England. 210-252 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+activity+in+infected+areas+of+an+experimental+vertebral+osteomyelitis+model%3A+USPIO-enhanced+MR+imaging--feasibility+study%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Macrophage activity in infected areas of an experimental vertebral osteomyelitis model: USPIO-enhanced MR imaging--feasibility study.</a> Radiology. 248 (1), 114-123 (2008).</li>
<li>Bierry, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI+of+macrophages+in+infectious+knee+synovitis%5BTitle%5D)+AND+%22AJR+Am.+J.+Roentgenol%22%5BJournal%5D)">MRI of macrophages in infectious knee synovitis.</a> AJR Am. J. Roentgenol. 194 (6), W521-W526 (2010).</li>
<li>Lutz, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+synovial+macrophages+in+an+experimental+rabbit+model+of+antigen-induced+arthritis%3A+ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide-enhanced+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Detection of synovial macrophages in an experimental rabbit model of antigen-induced arthritis: ultrasmall superparamagnetic iron oxide-enhanced MR imaging.</a> Radiology. 233 (1), 149-1457 (2004).</li>
<li>Weissleder, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasmall+superparamagnetic+iron+oxide%3A+an+intravenous+contrast+agent+for+assessing+lymph+nodes+with+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Ultrasmall superparamagnetic iron oxide: an intravenous contrast agent for assessing lymph nodes with MR imaging.</a> Radiology. 175 (2), 494-498 (1990).</li>
<li>Lefevre, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Septic+arthritis%3A+monitoring+with+USPIO-enhanced+macrophage+MR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Septic arthritis: monitoring with USPIO-enhanced macrophage MR imaging.</a> Radiology. 258 (3), 722-728 (2011).</li>
<li>Sigovan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid-clearance+iron+nanoparticles+for+inflammation+imaging+of+atherosclerotic+plaque%3A+initial+experience+in+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Rapid-clearance iron nanoparticles for inflammation imaging of atherosclerotic plaque: initial experience in animal model.</a> Radiology. 252 (2), 401-409 (2009).</li>
</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare.

Mentre i mezzi di contrasto a base di gadolinio non specifici forniscono informazioni sul volume e perfusione dello spazio extracellulare, macrofagi imaging USPIO-enhanced MR permette una localizzazione anatomica precisa e una valutazione qualitativa di infiltrazione dei macrofagi all&#39;interno sinoviale infetto, senza la necessità di campionamento tessuto 9. Grazie alla loro alta sensibilità, USPIO può dimostrare anche sottile infiltrato cellulare presente nelle prime fasi di infezione. Sotto terapia antib...

La risonanza magnetica (MRI) è considerato essere la modalità di imaging di scelta per la dimostrazione di sinovite infettiva dovuta alla sua elevata risoluzione spaziale e di contrasto dei tessuti molli. Cambiamenti del segnale osservati alla risonanza magnetica in artrite bassa T1 e T2 alta segnale che riflette la maggiore presenza di contenuto di acqua extracellulare, e un marcato enhancement dopo gadolinio basato contrasto amministrazione agente, coerenti con le istologicamente risultati di vascolarizzazione aumentata grazie alla vasodilatazione e l&#39;angiogenesi 1. Tuttavia, la RM è spesso in grado di dimostrare la risoluzione di infezione durante la terapia antibiotica come potenziamento persistente può essere osservato nelle articolazioni dei pazienti con clinicamente e biologicamente guarito artrite settica dovuta alla persistenza delle allargata spazio extracellulare (tessuto di granulazione, cicatrice fibrotica) 2. Oltre ai cambiamenti extracellulari, cellule infiammatorie, tra cui un intenso reclutamento di macrofagi massicciamente infiltrano l&#39;ininfetti sinovia. I macrofagi giocano un ruolo importante sia nella fase acuta e cronica di infezione batterica 3. Inducono la reazione infiammatoria necessaria per sradicare microrganismi patogeni, e coordinare risoluzione infiammazione, come macrofagi indotta infiammazione persiste fintanto tessuti necrotici non vengono rimossi, impedendo riparazione per iniziare 4. Così, la riduzione di infiltrazione di macrofagi all&#39;interno infetto synovia dopo terapia efficace può essere un indicatore affidabile della risoluzione dell&#39;infezione. Cellular imaging è in grado di dimostrare infiltrazione cellulare specifica all&#39;interno tessuto patologico. Macrofagi specifico RM utilizzando mirati di contrasto è stato ampiamente indagato e ha dimostrato la sua capacità di dimostrare l&#39;infiammazione delle articolazioni o infezione 5-7. Dopo iniezione endovenosa, questi agenti di contrasto mirati come USPIO particelle (ultrasmall ossidi di ferro superparamagnetiche) sono ripreso da fagociti come i macrofagi e,a causa delle loro proprietà magnetiche, indurre cambiamenti del segnale in tessuti che presentano infiltrazione di macrofagi 8. Il follow-up longitudinale di coloro segnale MR modifiche terapia consente una valutazione non invasiva in vivo di infiltrazione di macrofagi, e una riduzione della USPIO caricato-macrofagi relative variazioni di segnale dimostrerebbe successo terapia. Lo scopo di questa relazione è quello di presentare le modalità di esecuzione dei macrofagi RM per monitorare in maniera non invasiva artrite settica, dimostrando la riduzione di infiltrazione di macrofagi all&#39;interno della sinovia.

<table><tbody><tr><td>Nome del reagente/materiale</td><td>Azienda</td><td>Numero di catalogo</td><td>Commenti</td></tr><tr><td>P904</td><td>Guerbet</td><td></td><td>Dose: 150 &mu; mol Fe/kg</td></tr><tr><td>Ketamina (500 mg/ml ketamina)</td><td>Virbac</td><td></td><td>Dose: 30 mg/kg</td></tr><tr><td>Rompun (20 mg/ml xilazina)</td><td>Dose assiale</td><td></td><td>: 4 mg/kg</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Vetoquinolo</td><td></td><td>Dose: 0,1 mg/kg/8 ore</td></tr><tr><td>BD 22 G, 1 pollice</td><td>BD Biosciences</td><td>381423</td><td></td></tr><tr><td>BD 25 G, 5/8 pollice</td><td>BD Biosciences</td><td>305122</td><td></td></tr></tbody></table>

in vivo macrofago imaging utilizzando mr mirata di contrasto agente per la valutazione longitudinale di artrite settica

In vivo Macrophage Imaging Using MR Targeted Contrast Agent for Longitudinal Evaluation of Septic Arthritis

I macrofagi sono cellule-chiave nella iniziazione, lo sviluppo e la regolazione della risposta infiammatoria alle infezioni batteriche. I macrofagi sono intensamente e sempre reclutati nelle articolazioni settiche dalle prime fasi di infezione e l&#39;infiltrazione si suppone a regredire una volta efficace rimozione dei patogeni è ottenuto. La capacità di identificare in vivo l&#39;attività dei macrofagi in un giunto infetto può quindi fornire due applicazioni principali: rilevamento precoce di sinovite acuta e monitoraggio della terapia. In vivo rilevamento non invasivo di macrofagi può essere eseguita con la risonanza magnetica utilizzando nanoparticelle di ferro come ultrasmall superparamagnetico ossido di ferro (USPIO). Dopo somministrazione endovenosa o intra-articolare, USPIO sono specificamente fagocitate dai macrofagi attivati ​​e, a causa delle loro proprietà magnetiche, provocare variazioni del segnale in tessuti che presentano infiltrazione dei macrofagi. Un quantitativvalutazione e della infiltrarsi è fattibile, come la zona con perdita di segnale (numero di pixel scuri) osservata il gradiente echo immagini MR dopo iniezione di particelle è correlata con la quantità di ferro all&#39;interno del tessuto e quindi riflette il numero di cellule USPIO-caricati. Presentiamo qui un protocollo per eseguire l&#39;imaging macrofagi utilizzando USPIO-enhanced RM in un modello animale di artrite settica, consentendo un iniziale e longitudinale nella valutazione non invasiva in vivo di macrofagi infiltrazione e una valutazione delle iniziative terapia.

Sulle immagini non potenziate, sinovia delle ginocchia infetti presenta un gonfiore diffuso segnale intermedio che è non distinguibile dal tessuto circostante molli, mentre femore e rotula appaiono come strutture basse segnale (Figura 1). Sulle immagini USPIO avanzata, 24 ore dopo la somministrazione di contrasto, zona sinoviale contenente macrofagi USPIO-caricati dimostrerà perdita di segnale (figure 1 e 2). Inf...

Dimostriamo come eseguire macrofagi RM con mezzo di contrasto ultrasmall superparamagnetico (USPIO) in artrite settica, consentendo un iniziale e longitudinale<em&gt; In vivo</em&gt; Valutazione non invasiva di macrofagi infiltrazione e una valutazione della efficacia terapeutica.

In vivo Macrofago Imaging Utilizzando MR mirata di contrasto agente per la valutazione longitudinale di artrite settica

Macrophages are key-cells in the initiation, the development and the regulation of the inflammatory response to bacterial infection. Macrophages are ...

L'obiettivo generale di questo esperimento è valutare longitudinalmente l'infiltrazione di macrofagi all'interno della sinovia. Nel modello di artrite settica A nel coniglio, mediante imaging mediante risonanza magnetica, ciò può essere effettuato utilizzando particelle di ossido di ferro che marciano i macrofagi e ne rivelano la presenza. I macrofagi sono cellule chiave nello sviluppo, nell'amplificazione e nella risoluzione dell'artrite, in particolare nell'artrite settica.La dimostrazione in vivo della loro presenza e distribuzione all'interno di un'articolazione infetta potrebbe rappresentare uno strumento utile per il monitoraggio. La terapia antibiotica in un'articolazione compromessa non dovrebbe determinare un'infiltrazione massiccia di macrofagi. I macrofagi possono essere disponibili perdendo citociti.Gli agenti di contrasto per risonanza magnetica come gli USPIO, ossidi di ferro superparamagnetici ultra-piccoli, dopo somministrazione intravascolare, vengono specificamente captati dai microfagi attivati. Gli USPIO sono composti da un nucleo di ossido di ferro con una dimensione cristallina di circa 40 nanometri.Agiscono come piccoli magneti che generano variazioni del segnale di risonanza magnetica nei tessuti contenenti macrofagi. È possibile osservare in queste due immagini assiali con Mr.Mags di un ginocchio di coniglio che, 24 ore dopo la somministrazione di U-S-P-I-O, si verifica una marcata e diffusa riduzione del segnale a livello della sinovia. A causa della presenza di macrofagi SPI OED, il numero di pixel scuri osservati nelle immagini di risonanza magnetica è correlato al contenuto di ferro all'interno del tessuto e quindi al numero di macrofagi.Il monitoraggio longitudinale delle variazioni del segnale R correlate a U-S-P-I-O potrebbe quindi fornire una valutazione in vivo della presenza di macrofagi all'interno del John durante la terapia. Salve, mi chiamo Guian Bii. Sono professore assistente di radiologia presso l'Ospedale Universitario di Strat, nato in Francia.Oggi vi illustreremo come eseguire l'imaging dei macrofagi mediante risonanza magnetica (MRI) in un modello animale di artrite settica. Nella prima parte, insieme al nostro ricercatore, vi spiegheremo come indurre un'artrite settica nel ginocchio di un coniglio mediante somministrazione diretta intra-articolare di stafilococco. Successivamente, nella seconda parte, vi mostreremo come effettuare l'esame mediante MRI, come iniettare il mezzo di contrasto e, infine, come interpretare i risultati.Posizionare l'animale in una gabbia apposita per il contenimento, anestetizzare l'animale mediante iniezione di tine e ketamina, che consente un'anestesia chirurgica della durata di 30 minuti. Rasare il ginocchio e detergerlo con povidone. Identificare il legamento patellare come un'estensione elastica anteriore.Quindi inserire un ago da 35 gauge attraverso di esso per accedere all'articolazione. Iniettare un millilitro della sospensione batterica. L'iniezione deve essere eseguita senza resistenza, confermando la corretta posizione intra-articolare dell'ago.Rimettere l'animale nella sua gabbia e somministrare una terapia antidolorifica mediante iniezione intramuscolare di bovino ogni giorno. Dopo un periodo intermedio, abbiamo due giorni. L'animale presenta una riduzione dei movimenti spontanei durante il sonno, confermando la presenza di un'infezione articolare.L'esame R può quindi essere eseguito. Posizionare l'animale in una gabbia di contenimento dedicata. Disinfettare la zona con pov.Inserire un catetere da 24 gauge in una vena periferica e fissarlo con un apposito adesivo. Questa linea venosa servirà per somministrare il mezzo di contrasto. Anestetizzare l'animale mediante iniezione intramuscolare di ketamina.Quindi posizionare l'animale in posizione prona all'interno della bobina per ginocchio per risonanza magnetica. Con le ginocchia in completa estensione, le gambe devono essere fissate al tavolo della risonanza magnetica e possono essere immobilizzate con del nastro adesivo per mantenere l'estensione. Il protocollo di risonanza magnetica prevede sequenze pesate in T2 ad eco di gradiente.La sequenza è preferita in quanto consente il rilevamento più sensibile degli U-S-P-I-O. Di seguito è riportato un esempio dei parametri di risonanza magnetica che utilizziamo attualmente. Al termine di questo primo esame mediante risonanza magnetica, iniettare lentamente gli U-S-P-I-O attraverso la linea venosa e risciacquare con un millilitro di soluzione fisiologica.Il secondo esame RM viene eseguito 24 ore dopo la somministrazione del mezzo di contrasto, utilizzando le stesse procedure precedentemente descritte. Qui si possono vedere due immagini assiali pesate in T2 ottenute con sequenza gradient-echo del ginocchio di coniglio: a sinistra senza mezzo di contrasto, a destra a 24 ore dalla somministrazione di USPO.Come si può vedere nell'immagine a destra, la sua area con macrofagi carichi di USPI mostrerebbe una perdita di segnale con pixel scuri. Il numero di pixel scuri è correlato al contenuto di ferro e quindi alla quantità di infiltrazione di MicroAge. I macrofagi carichi di USPI possono essere dimostrati istologicamente mediante colorazione con blu di Prussia, che rivela le cellule cariche di ferro come puntini blu. Il numero di pixel scuri osservati in un'immagine può essere contato utilizzando diversi software.Ecco un esempio, utilizzando il software M SGA che fornisce il conteggio dopo la sogliatura manuale o automatica delle aree della zona corrente. L'USPA OS MRI consente una valutazione indiretta della distribuzione dei macrofagi che possono essere alloggiati durante la terapia. Una riduzione dell'infiltrazione di macrofagi sarà associata a una riduzione del numero di pixel scuri nell'imaging MRI in vivo.L'utilizzo di un agente di contrasto specifico consente di valutare in modo non invasivo la popolazione di macrofagi all'interno del ginocchio. Durante la terapia, è quindi possibile monitorare la presenza e la distribuzione dei macrofagi senza la necessità di prelievi di tessuto e in un ambiente naturale, il che risulta di particolare interesse per studi longitudinali.

in-vivo-macrophage-imaging-using-mr-targeted-contrast-agent-for

Research

Ricerca

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Descriviamo un metodo di imaging non invasivo per distinguere le fasi infiammatorie. Consegna sistemica di luminol rivela le aree di infiammazione acuta che dipendono dalle attività MPO nei neutrofili. Al contrario, l'iniezione di lucigenina permette la visualizzazione di infiammazione cronica dipende attività Phox in macrofagi.

In vivo metodo di imaging per distinguere infiammazione acuta e cronica

Descriviamo un multi-angolo di rotazione imaging ottico del sistema (Maroi) in vivo quantificazione di un marcatore fluorescente consegnato da saposin C (SAPC)-dioleoylphosphatidylserine (DOPS) nanovesicles. Impiegando modelli murini di cancro e artrite, si dimostra come l'analisi della curva Maroi segnale può essere utilizzato per la mappatura precisa e caratterizzazione biologica dei processi patologici.

In Vivo Imaging ottico dei tumori cerebrali e artrite Uso fluorescente SAPC-DOPS nanovesicles

Combinato imaging ottico e μCT in un modello murino di infezione impianto ortopedico, utilizzando un ceppo ingegnerizzato bioluminescente di Staphylococcus aureus, purché la capacità di monitorare in maniera non invasiva e longitudinalmente la dinamica della infezione batterica, così come la risposta infiammatoria corrispondente e cambiamenti anatomici nel osso.

Combinato<em&gt; In vivo</em&gt; Optical e μCT Imaging Monitor per infezione, infiammazione, e Bone Anatomy in una infezione ortopedica impianto in topi

Descriviamo un protocollo per monitorare il comportamento dei neutrofili e dei monociti nelle vene mesenteriche in condizioni stazionarie e infiammatorie utilizzando la microscopia confocale intravitale su topi anestetizzati.

Imaging neutrofili e monociti in mesenterica Veins intravitale Microscopia su topi anestetizzati in tempo reale

Questo articolo spiega l'applicazione dell'immagine fluorescente utilizzando una sonda ottica attivabile per la visualizzazione dell'attività in vivo delle metalloproteinasi di matrici chiave in due diversi modelli sperimentali di infiammazione.

Non invasivo<em&gt; In Vivo</em&gt; Fluorescenza ottica di imaging dell&#39;attività MMP infiammatoria utilizzando un agente fluorescente di imaging attivo

Specifica della destinazione sonde rappresenta uno strumento innovativo per l'analisi dei meccanismi molecolari, come espressione della proteina in vari tipi di malattia (ad es., infiammazione, infezione e tumorigenesi). In questo studio, descriviamo una valutazione tomografica tridimensionale quantitativa di infiltrazione del macrofago intestinale in un modello murino di colite usando la tomografia di fluorescenza-mediata specifica per F4/80.

Fluorescenza-mediata di tomografia per la rilevazione e la quantificazione di infiammazione intestinale murina del macrofago-correlati

Vi presentiamo metodi per valutare la capacità fagocitica di primari macrofagi murini derivate da midollo osseo, utilizzando residui del myelin fluorescente contrassegnati e lipido intracellulare gocciolina macchiatura.

In Vitro Fagocitosi di residui del Myelin dai macrofagi derivate da midollo osseo

La valutazione dello sviluppo del tessuto nel callo di frattura durante endochondral guarigione ossea è essenziale monitorare il processo di guarigione. Qui, segnaliamo l'uso di una risonanza magnetica (RM)-fixator esterno compatibile per il femore del mouse per consentire MRI scansioni durante la rigenerazione ossea nei topi.

In Vivo Valutazione dello sviluppo di callo di frattura durante la guarigione dell'osso nei topi utilizzando un MRI-compatibile con osteosintesi per il femore di Mouse

L'imaging in vivo delle articolazioni è una tecnica preziosa per scoprire il comportamento migratorio dei leucociti e la dinamica molecolare all'interno delle articolazioni infiammate. Qui presentiamo un protocollo dettagliato per l'imaging in vivo delle articolazioni utilizzando un modello murino di artrite indotta dal collagene di tipo II (CIA).

In vivo L'imaging rivela il comportamento migratorio dei leucociti all'interno delle articolazioni

Abbiamo sviluppato un sistema transwell ex vivo umano in grado di valutare cambiamenti infiammatori acuti, infettivi e strutturali nella sinovia.

Un modello preclinico di sinovite utilizzando tessuto sinoviale umano ex vivo con funzione e architettura preservate

Qui presentiamo un protocollo per l'imaging intravitale di Mycobacterium tuberculosis approvato BSL-2 attenuato. Ceppo nel polmone murino utilizzando una finestra polmonare permanente. Questo approccio consente un'analisi longitudinale a risoluzione monocellulare delle prime interazioni ospite-patogeno, inclusa localizzazione bacillare, dinamica vascolare e assorbimento di macrofagi nello stesso microambiente polmonare.

Imaging intravitale dell'attenuazione dell'Auxotrophic Mycobacterium tuberculosis nel polmone murino durante l'infezione intravascolare precoce

Scopri l'imaging dei macrofagi in vivo con agente di contrasto USPIO per valutare longitudinalmente l'artrite settica nel modello di coniglio. Questo metodo permette di monitorare non invasivamente l'infiltrazione cellulare e l'efficacia terapeutica nel tempo.

In vivo Macrofago Imaging Utilizzando MR mirata di contrasto agente per la valutazione longitudinale di artrite settica

Esplora altri video