Name: Utilizzando cronica stress sociale a modello depressione post-partum in lattazione Roditore (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 30 s
Description: Impara a modellare la depressione post-partum usando lo stress sociale cronico nei roditori lattanti. Questo metodo etologico aiuta a studiare i disturbi dell'umore materno e il loro impatto sui cuccioli.

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Vorremmo ringraziare Chantal Lau per consigli sulla valutazione assunzione di latte, Klaus Miczek per consigli sull&#39;uso di stress sociale, e Sheryl Goodman per il feedback sulla rilevanza clinica di stress sociale cronico. Lo sviluppo di questo protocollo è stato sostenuto da NICHD K99/R00 HDO59943 alla BCN.

Adulti Sprague Dawley femmine sono allevati nella nostra struttura animale, cucciolate sono abbattuti a 8-10 cuccioli con un rapporto anche il sesso, e la cura materna e test aggressione avviene nella casa ratti gabbia. Soggetti sperimentali rimangono nella stessa stanza attraverso lo studio. Un pollice separatori alti gabbia in plexiglass trasparente vengono inseriti nella gabbia il giorno 20 o 21 di gestazione. Questi si dividono la gabbia in 4 quadranti per evitare cuccioli di eseguire la scansione fino alla madre, quando sono immessi nella gabbia. Tipico comportamento materno è confermata per tutte le dighe sul giorno di nascita (giorno 1 di lattazione) attraverso l&#39;osservazione diretta di reperimento cucciolo, governare, di cura, di sé e governare. Maschi Intruder sono più piccoli o di dimensioni simili Sprague Dawley maschi, e le femmine non sono mai presentati con lo stesso maschio due volte. La maternità e l&#39;aggressività materna sono video registrato la mattina dei giorni 2, 9, e 16 della lattazione, come descritto di seguito: <ol><li> Rimuovere la lettiera dalla diga, pesare i maschi e le femmine serenziato e luogo intera cucciolata in una gabbia tenuta pulita per 60 min. </li><li> Alla fine della separazione min 60, pesare i maschi e cuccioli femminili separatamente prima di sostituire lettiera in casa gabbia della diga, che divide i cuccioli più uniformemente possibile tra i 3 quadranti non-nido della gabbia. Avviare la registrazione video prima che venga ripristinato al fine di garantire tutti reperimento cucciolo viene registrato. </li><li> Video record di cura materna per 30 min. Consentire dighe per interagire con i loro cucciolate per un altro 90 min. 120 min (30 min di registrazione + addizionale 90 min) dopo aver piazzato cuccioli nella gabbia della diga, pesare di nuovo per determinare l&#39;assunzione di latte durante il periodo di due ore. Un cucciolo è eutanasia da ogni disordine sul comportamento giorni di test dopo il periodo dell&#39;allattamento min 120 per estrarre un campione di latte dallo stomaco. Lo scopo della raccolta del latte dai cuccioli è quello di valutare i livelli di ormoni e altri fattori che possono mediare gli effetti comportamentali e / o di fisiologia dello stress sociale cronico sulla prole. </li&gt; <li> Cuccioli tornare alla diga dopo la pesatura, e di introdurre un romanzo maschio intruso più piccola o di dimensioni simili alla gabbia per 30 minuti per verificare l&#39;aggressione materna. Avviare la registrazione video durante l&#39;introduzione di assicurare che ogni aggressione è registrato. Per i soggetti di controllo, il maschio viene rimosso dopo la registrazione di 30 min. Per i soggetti cronici stress sociale, i maschi vengono lasciati in per altri 30 min. Sulla non-comportamentali giorni di test durante il periodo di 2-16 giorni, i maschi intrusi romanzo sono collocati in gabbie di soggetti CSS per un&#39;ora senza registrazione video. Le esposizioni di stress sociali vengono arrestati se lesione si verifica, e di animali feriti vengono curati e rimossi dallo studio. </li><li> Una bottiglia con 0,02% saccarina viene aggiunto alla casa gabbia diga alle 03:00 nei giorni 2, 9, e 16 alternando tra il lato destro e sinistro. Sia l&#39;acqua di rubinetto e bottiglie saccarina sono pesati a 3:00, poi di nuovo alle 8 del mattino successivo per determinare la preferenza saccarina. </li><li> I cuccioli sono svezzati il ​​giorno 23, e dighe ari euthanized a questo punto per ottenere campioni plasmatici basali ed estrarre il cervello per l&#39;analisi di espressione genica di fisiologicamente rilevanti e comportamentale nuclei bersaglio. </li></ol> Maternal Behavior Scoring Le cure materne comportamenti aggressione specificati nelle tabelle 1 e 2 sono segnati dai video utilizzando ODLog software di analisi comportamentale. Le chiavi sono assegnate a ciascun comportamento, e il tasto viene tenuto premuto mentre ogni comportamento viene eseguita per registrare la durata di tale comportamento. Frequenze sono la somma dei tratti chiave per ogni comportamento. Questo programma crea sia un file di dati di tempo completo timbrato cinque bidoni seconda e una tabella riassuntiva con le frequenze e le durate totali per i comportamenti definiti sulla registrazione 30 min. Sia l&#39;aggressività materna e cure materne sono segnati per i video aggressione materna, come le dighe rispondono maternamente per i cuccioli, mentre l&#39;intruso maschio è nella gabbia. </p&gt; Subito dopo aver piazzato i cuccioli nella gabbia, la diga recupererà ogni cucciolo individualmente al nido. Recupero completo è segnato una volta quando tutti cuccioli sono nel nido. Mentre il recupero completo è solitamente segnato solo una volta, a volte può essere segnato due volte se la diga trasferisce l&#39;intera cucciolata in un nuovo sito, dopo un recupero completo iniziale. Comportamento di nidificazione viene segnato ogni volta che il materiale di nidificazione è manipolato dalla diga con la bocca o le zampe. Toelettatura Pup include leccare o manipolazione del pelo del cucciolo dalla diga con le zampe. Scoring Infermieristica è iniziata dopo la diga è stata in una accovacciato fermo o postura di cura incline per 10 secondi. Questo per dare il tempo per i cuccioli di iniziare da latte. Totale cura materna è la durata combinata di nidificazione, toelettatura cucciolo, e di cura, ma può limitarsi a governare e di cura di concentrarsi sul comportamento pup-diretto. Auto toelettatura è definita come la manipolazione della propria pelliccia della diga con la bocca o le zampe. L&#39;attività è segnato durzione qualsiasi attività locomotoria non associato ai comportamenti precedentemente definiti. Aggressione materna consiste di attaccare, mordere, calciare, e pinning. Attaccare è definito come la boxe o di lotta del maschio intruso. Mordere è segnato quando la diga usa i denti su l&#39;intruso, e pinning viene registrato quando la diga tiene il maschio verso il basso con le sue arti o del corpo. Aggressione totale è la somma di attaccare, mordere, calciare, e pinning. Statistiche Comportamenti materni, l&#39;assunzione di latte, e la preferenza saccarina del controllo e CSS dighe sono stati confrontati ogni giorno di lattazione con una coda t-test per valutare gli effetti dei CSS sui singoli giorni. Dati di crescita nei giorni 2, 9, e 16 della lattazione, sono stati confrontati con una coda t-test su peso (in grammi) al giorno 2 o la crescita percentuale rispetto al giorno 2 (giorno 9 o 16 peso / giorno 2 x peso 100). I livelli di espressione di mRNA OXT sono stati normalizzati contro tre combinata housekgeni eeping, b-actina, ipoxantina fosforibosiltransferasi (HPRT) e gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH). Livelli di espressione di mRNA oxt relativi sono stati confrontati con i singoli test t su ciascun peptide o recettore per ciascuna regione del cervello. Tutti i risultati grafici sono presentati come gruppo significa + SEM, e il livello di significatività statistica è stata p ≤ 0.05.

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Gli autori non hanno interessi finanziari in competizione.

I dati ottenuti dal paradigma CSS è più probabile che sia coerente e ripetibile in un ambiente di ricerca comportamentale stabile. Si sostiene che la custodia e l&#39;allevamento di animali da laboratorio è un componente che deve essere più considerato con attenzione, in ogni tipo di studio, in particolare studi comportamentali. Abitazioni e allevamento pratiche che possono introdurre confonde includono: partendo con dighe in gravidanza spediti dal fornitore, muovendosi dighe tra camere giornaliere per i test comportamentali, la variazione nel tempo della giornata di test comportamentali, l&#39;eccessiva esposizione di dighe a nuove visioni, suoni, odori o , non si usa a casa gabbia per il test comportamentale, una mancanza di materiale di nidificazione o incoerenti, e poveri di routine la cura degli animali (ad esempio, l&#39;esposizione a letto bagnato e sporco). Inoltre, l&#39;inclusione di altri test comportamentali durante l&#39;allattamento (per esempio forzato nuotare test o elevated plus maze) può introdurre confonde. Tuttavia, l&#39;uso di un ambiente gabbia romanzo o altrafattore di stress acuto può essere utile per rivelare differenze comportamentali non apparenti con sede prove in gabbia a causa di potenziali interazioni tra stress cronico, stress acuto, e il comportamento. Il protocollo attualmente descritta è efficace con ratti Sprague Dawley, ma può essere necessaria modifiche del protocollo per altri ceppi e specie. Ad esempio, i cuccioli devono essere protetti con una barriera di maschi molto aggressivi lunghi Evans per evitare lesioni. Pratiche critiche per la somministrazione stress sociale includono l&#39;uso di maschi più piccole o di dimensioni simili e aventi la prima interazione di un intruso maschio con una giornata altamente aggressivo 2 diga per garantire sconfitta e costante comportamento sottomesso nei maschi. Se i maschi si attaccano una cucciolata, devono essere rimossi dallo studio, in quanto è probabile che attaccheranno cucciolate successive. Una possibilità per ridurre la probabilità di maschi troppo aggressivi è di averli sconfitti da un maschio più grande prima dell&#39;inizio della study. Per il punteggio comportamentale, è necessario fornire un quadro completo del comportamento della registrazione e l&#39;analisi sia della frequenza e della durata della maggior parte dei comportamenti, e l&#39;uso di intervalli di registrazione più brevi o di controlli può comportare la raccolta di dati sufficienti per testare a fondo il ipotesi. Formazione approfondita e coerente dei marcatori può essere realizzato con l&#39;uso precedentemente segnato video comportamentali. L&#39;applicazione principale del modello CSS è la sperimentazione di trattamenti farmacologici attuali e nuovi per la depressione post-partum e l&#39;ansia. Un uso ulteriore di questo modello è quello di studiare gli effetti di pratiche e procedure in materia di cure materne, come ad esempio taglio cesareo nascite, parto indotto, e vari programmi allattamento comuni. Ulteriori indagini dei potenziali effetti dello stress sulla lattazione sarà prezioso data la mancanza di studi su questo argomento. Mentre campioni di latte dalle dighe sarebbe utile, la necessità di anestesia e OXT esogenonella raccolta di questi campioni introduce diverse confonde comportamentali e fisiologiche, quindi studi sugli effetti dello stress sulla lattazione possono non essere favorevole alla analisi comportamentale simultanea. Il potenziale per gli studi transgenerazionali con il modello CSS è grande, e queste indagini può anche includere differenti trattamenti stress della prole adulta per indagare potenziali interazioni tra primi stress della vita e in seguito l&#39;esposizione allo stress. L&#39;importanza del modello CSS e associati centri di test comportamentali sulla rilevanza etologiche e traslazionale. Si ipotizza che la mancanza di efficacia degli attuali trattamenti per la depressione e ansia è dovuta ad una mancanza di sovrapposizione tra etologici studi su animali e umani. I modelli animali di depressione e ansia spesso si basano su solidi fattori di stress fisici o ceppi altamente selezionati che possono spiegare la constatazione che gli attuali trattamenti antidepressivi sono più efficaci con depressione grave. Ph<html> fattori di stress ico come moderazione e l&#39;esposizione a una vasta gamma di fattori di stress randomizzati non simulano esperienze umane comuni. Il razionale per l&#39;esposizione randomizzato utilizzato su paradigmi di stress lieve cronica è quello di prevenire l&#39;acclimatazione. Questa è una preoccupazione significativa, ma la situazione ideale può essere quella di utilizzare un protocollo che gli animali non adatti alla che assomiglia più da vicino l&#39;eziologia della depressione e ansia negli esseri umani, come lo stress sociale. Oltre a promuovere l&#39;uso di fattori di stress più etologici, un altro vantaggio del modello CSS è l&#39;uso di una misura rilevante di anedonia, comportamento materno. Questo è un robusto comportamento mediato premio che media direttamente gli effetti negativi della depressione nella madre sulla prole. L&#39;integrazione combinata di fattori di stress etologiche e di misure di anedonia in depressione e l&#39;ansia della ricerca sarà particolarmente vantaggioso nella individuazione delle misure preventive e trattamenti sicuri ed efficaci. &quot;&gt; Lo stress sociale è stato utilizzato con successo in maschi e femmine nullipare per diversi anni, e l&#39;espansione di questo lavoro in femmine materna è in grado di produrre una grande quantità di nuovi dati per la depressione post-partum e presto lo stress della vita dei disturbi associati sia nei maschi e femmine. Si ipotizza che il maggiore uso di modelli animali etologici nella depressione e l&#39;ansia della ricerca porterà a trattamenti più efficaci a causa della raccolta di dati comportamentali che è etologicamente e translationally rilevante, meno variabile e più ripetibile.

L&#39;eziologia dei disturbi dell&#39;umore, tra cui la depressione post-partum, spesso comporta l&#39;esposizione a 1,2 stress cronico. Anche se la depressione nelle madri ha effetti negativi sia sulla genitorialità 3 e lo sviluppo psicologico della prole 4, la stragrande maggioranza degli studi sulla depressione e ansia attenzione su animali maschi e gli esseri umani. Anche se ci sono un paio di modelli animali di comportamento materno alterato con lo stress cronico, la maggior parte sono componenti fisiologiche sostanziali che non possono riguardare fattori di stress psicosociale cronico comunemente vissuti dagli esseri umani o di concentrarsi principalmente sul periodo pre-parto. Stress cronico moderazione nei ratti in gravidanza aumenta la maternità e l&#39;ansia e riduce l&#39;aggressività materna in alcuni studi 5, ma diminuisce la cura materna in altri 6. Lo stress Restraint è un potente fattore di stress fisico 7, e alcuni rapporti sono incompatibili con il attenuato cura materna osservata in mot umanolei con la depressione post-partum 4. Prenatal ultramild lo stress non influisce cura cucciolo, ma non riduce l&#39;aggressività materna 8. Ultramild paradigmi di stress usano una varietà di fattori di stress randomizzati (ad esempio 30 gradi di inclinazione della gabbia, invertito ciclo di luce, confino, durante la notte l&#39;illuminazione, e la gabbia sporca) per diversi giorni, e l&#39;effetto dei singoli componenti è spesso poco chiaro. E &#39;probabile che alcuni fattori di stress utilizzati in ultramild paradigmi di stress, come la rovesciata ciclo di luce e durante la notte l&#39;illuminazione direttamente influenzare la cura materna indipendente da eventuali effetti dello stress, come la cura materna nei topi ha un ritmo circadiano. L&#39;esposizione a letto umido è un significativo stress termico per i cuccioli, e può provocare mortalità dei cuccioli, in meno di 24 ore in giovani cucciolate (osservazioni personali). Recenti studi sui roditori si sono concentrati sull&#39;uso di fattori di stress etologicamente rilevanti, come ad esempio lo stress sociale cronico (CSS), per lo studio degli effetti dello stress su offpring comportamento e disturbi dell&#39;umore 9-13. Nel tentativo di sviluppare un modello etologico per la depressione post-partum, ridurre la componente fisiologica del fattore di stress utilizzati, e generare i risultati comportamentali e fisiologici consistenti, il nostro laboratorio si è concentrata sull&#39;uso di stress sociale. Mentre sconfitta sociale cronica viene efficacemente utilizzato come modello per il social depressione indotta da stress nei roditori maschi 14, questo non è un modello di comportamento ecologicamente rilevanti per molti roditori materni se si utilizzano gli intrusi maschili, come una singola sconfitta sociale di un roditore materna di solito si traduce nel cannibalismo della cucciolata dalla intruso maschile. Tuttavia, l&#39;esposizione acuta ad un romanzo intruso maschio, senza sconfitta sociale della diga, suscita forti risposte di stress comportamentali ed endocrino in allattamento femmine 15-18. Vi sono anche prove che lo stress cronico durante l&#39;allattamento, compresa l&#39;esposizione a un intruso maschio, danneggia direttamente la produzione di latte 19,20, che possono avere un impatto crescita della prole.Questi risultati nei ratti materni sono supportate da studi in femmine vergini, dove l&#39;instabilità sociale cronica (variando l&#39;isolamento e l&#39;affollamento) aumenta l&#39;attività dell&#39;asse ipotalamo-ipofisi-surrene 11,21, altera la regolazione della temperatura del corpo, riduce il saccarosio e l&#39;assunzione di cibo, ed è stato proposto come modello animale per la depressione femmina 11. Auto grooming, una misura di ansia 22,23 è inoltre sensibile alle manipolazioni stress sociale 24,25. Stress sociale cronico (CSS) durante l&#39;allattamento può interrompere il comportamento materno e attenuare la crescita della diga e la prole. La presentazione quotidiana di un romanzo intruso maschio durante l&#39;allattamento diminuisce cura materna, aumenta l&#39;aggressività materna nei confronti di un romanzo intruso maschio e di auto governare, e inibisce la crescita sia la diga e la sua stirpe 10. Questi effetti indicano che CSS è un modello etologico pertinente ed efficace per i disturbi dell&#39;umore che coinvolgonodanni nella cura materna, anedonia, ansia elevata, e la crescita prole attenuato, come la depressione post-partum. Sia la cura materna e dati prole indicano che i CSS possono avere effetti duraturi sulle generazioni future, e di ricerca sugli effetti dello stress cronico sul comportamento materno sostenere l&#39;ipotesi che gli effetti dello stress cronico sul comportamento materno sono ormonale mediata (Murgatroyd e Nephew 2012 ). Inoltre, i recenti dati del femminile figli adulti di dighe stressati supporta l&#39;ipotesi che i CSS come una forma di stress primi anni di vita provoca cambiamenti nel centro di ossitocina (OXT) e prolattina (PRL), che sono associati con comportamenti di cura inefficiente 12. Il modello CSS integra altri modelli efficaci di stress interruzioni indotte nel comportamento materno, ad esempio limitando materiale di nidificazione 26,27 e la separazione materna 28,29. Aspetti unici del modello CSS sono che è etologicamente rilevanti sia nei roditori e nell&#39;uomo,ha una componente fisiologica relativamente minore, e può essere combinato con fattori di stress simili in altre fasi della vita (la sconfitta, l&#39;instabilità sociale cronico sociale). Gli obiettivi primari nello sviluppo del paradigma CSS dovevano usare un rilevante fattore di stress etologicamente e clinicamente, indurre anedonia (come misurato da cure materne e la preferenza saccarina), aumentare le misure comportamentali di ansia, e di mettere in pericolo lo sviluppo fisiologico, comportamentale e o endocrino cucciolo. Lo scopo del modello è quello di testare i trattamenti e le pratiche per la depressione post-partum e l&#39;ansia attuali e romanzo.

<table><tbody><tr><td>Software ODlog per analisi video </td><td>Macropod</td><td>versione 2.7.2</td><td>disponibile per PC o Mac </td></tr><tr><td>Videoregistratore </td><td>Sony</td><td>HDR-CX130</td><td></td></tr></tbody></table>

utilizzando cronica stress sociale a modello depressione post-partum in lattazione roditore

Using Chronic Social Stress to Model Postpartum Depression in Lactating Rodents

L&#39;esposizione a stress cronico è un fattore predittivo affidabile di disturbi depressivi, e lo stress sociale è un comune fattore di stress etologicamente rilevanti sia negli animali e nell&#39;uomo. Tuttavia, molti modelli animali di depressione sono stati sviluppati nei maschi e non sono applicabili o efficaci in studi di donne post-partum. Recenti studi hanno riportato effetti significativi di stress sociale cronico durante l&#39;allattamento, un fattore di stress etologicamente pertinente ed efficace, il comportamento materno, la crescita, e comportamentali neuroendocrinologia. Questo manoscritto descrive questo paradigma cronica stress sociale utilizzando l&#39;esposizione ripetuta di una diga in allattamento per un romanzo intruso maschio, e la valutazione degli effetti comportamentali, fisiologici, e neuroendocrina di questo modello. Stress sociale cronico (CSS) è un modello utile per studiare gli effetti dello stress sul comportamento e la fisiologia della diga, così come la sua stirpe e per le generazioni future. L&#39;esposizione di cuccioli di CSS può essere utilizzato anche come un precocela vita di stress che ha effetti a lungo termine sul comportamento, fisiologia e neuroendocrinologia.

Esposizione di una diga in allattamento al CSS deprime la durata del grooming cucciolo e totale cura materna nel corso di una 30 minuti di registrazione video il giorno 9 di lattazione (Nephew e Ponti 2011, figura 2). Il giorno 16 di lattazione, l&#39;aggressività e l&#39;auto toelettatura, una misura di ansia, sono aumentati (Nephew e Ponti 2011, figura 3). Assunzione di latte da parte dei cuccioli di CSS dighe è del 40% meno di dighe di controllo nei giorni 9 e 16 di lattazione (Figura 4), ​​e la crescita dei piccoli è attenuato in questi due giorni (Nephew e Ponti 2011, Figura 5). Saccarina preferenza è più basso il giorno 16 nelle femmine trattate CSS (Figura 6). Nell&#39;adulto F1 femminile prole di madri trattate CSS, l&#39;assunzione di latte (Figura 7) e la saccarina preferenza (Figura 8) sono depressi nei giorni 2 e 16. Espressione genica ossitocina nel nucleo supraoptic è inferiore in queste dighe (Figura 9 </strong&gt;), e risultati simili sono stati riportati nel nucleo paraventricolare, centrale dell&#39;amigdala, mediale e amigdala (Murgatroyd e nipote, 2012). <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMENTO </td><td> DESCRIZIONE </td></tr><tr><td> Retrieval </td><td> Di carico di cuccioli di nuovo al nido </td></tr><tr><td> Recupero completo </td><td> Tempo necessario per recuperare tutti gli 8 cuccioli </td></tr><tr><td> Nesting </td><td> Manipolazione di biancheria da letto in zona nido con la bocca o zampe </td></tr><tr><td> Grooming Pup </td><td> Leccare o manipolazione del pelo del cucciolo con le zampe </td></tr><tr><td> Infermieristica </td><td> Quando diga è in una posizione accovacciata o infermieristico prona </td></tr><tr><td> Total Care materna </td><td> Totale durazione di Nesting, Grooming Pup, e infermieristica </td></tr><tr><td> Auto Grooming </td><td> Manipolazione di dighe propria pelliccia con la bocca o zampe </td></tr><tr><td> Attività </td><td> Qualsiasi attività locomotoria non associata a comportamenti di cui sopra </td></tr></tbody></table> Tabella 1. Cure materne. <table border="1"><tbody><tr><td> COMPORTAMENTO </td><td> DESCRIZIONE </td></tr><tr><td> Attaccare </td><td> Boxing o lotta di intruso maschio </td></tr><tr><td> Mordere </td><td> L&#39;uso di denti per attaccare intruso maschio </td></tr><tr><td> Kicking </td><td> Uso dei piedi per colpire intruso maschile, simile ad un coniglio calci </td></tr><tr><td> Pinning </td><td> Femminile materno tenendo maschio giù con gli arti o il corpo </td></tr><tr><td> AAggressione Tal </td><td> Somma delle durate di attaccare, mordere, calciare, e pinning </td></tr></tbody></table> Tabella 2. Aggressione materna. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig1.jpg" alt="Figura 1" /> Figura 1. Pianificare il protocollo cronica stress sociale. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig2.jpg" alt="Figura 2" /> Figura 2. Stress sociale cronico diminuisce cure materne il giorno 9 di lattazione. Esponendo una diga in allattamento per un romanzo intruso maschio per un&#39;ora al giorno per 7 giorni ha ridotto il tempo dedicato alla toelettatura cucciolo e totale cura materna, che include grooming cucciolo, assistenza infermieristica, e comportamenti di nidificazione nel corso di un 30 min materna comportamento di registrazione video (Nephew e Ponti, 2011). * Indica una differenza significativa tra il controllo e lo stress gruppi, p &lt;0.05, di n = 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig3.jpg" alt="Figura 3" /> Figura 3. Stress sociale cronico aumenta l&#39;aggressività materna e ansia il giorno 16 di lattazione. Esposizione di una diga in allattamento per un romanzo intruso maschio per un&#39;ora al giorno per 14 giorni ha aumentato la durata (A) e la frequenza (B), di aggressione e di auto toelettatura e diminuito locomotore attività nel corso di un 30 min aggressione materna di registrazione video (Nephew e Ponti, 2011). * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig4.jpg" alt="Figura 4" /> Figura 4. Stress sociale cronico diminuisce l&#39;assunzione di latte da parte della prole. Assunzione totale di latte da cucciolate di 8-10 cuccioli in un intervallo di due ore di cura è stato ridottonelle madri stressate nei giorni 9 e 16 di lattazione. * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig5.jpg" alt="Figura 5" /> Figura 5. Stress sociale cronico attenua crescita della prole nei giorni 9 e 16 di lattazione. Esponendo le dighe di stress sociale cronico per 15 giorni durante l&#39;allattamento risultati in crescita del cucciolo attenuato (Nephew e Ponti 2011). * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig6.jpg" alt="Figura 6" /> Figura 6. Stress sociale cronico induce diminuita assunzione saccarina il giorno allattamento 16. Quindici giorni di stress sociale, diminuisce l&#39;apporto percentuale di saccarina relativa all&#39;acqua per un periodo di 17 ore. * Indica una significativa differenza tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 9-10. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig7.jpg" alt="Figura 7" /> Figura 7. Cronica precoce stress sociale vita diminuisce l&#39;assunzione di latte da parte nati da madri di F1. Assunzione di latte totale per la prole di dighe F1 (cucciolate di 8-10 cuccioli) in un intervallo di cura due ore è stato ridotto nei giorni 2 e 16 della lattazione. * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, n = di 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig8.jpg" alt="Figura 8" /> Figura 8. Cronica precoce stress sociale vita induce assunzione saccarina diminuito nei giorni di lattazione 2 e 16. Quindici giorni di stress sociale, diminuisce l&#39;apporto percentuale di saccarina relativa all&#39;acqua per un periodo di 17 ore. * Indica una differenza significativa tra il controllo e lo stressgruppi, p &lt;0.05, n = di 12-14. <img src="/files/ftp_upload/50324/50324fig9.jpg" alt="Figura 9" /> Figura 9. Cronico primi anni di vita stress sociale diminuisce l&#39;espressione di mRNA ossitocina nel nucleo supraoptic. Femmina adulta nati da madri esposte a stress sociale cronico hanno attenuato centrale attività ossitocina, che è associato con l&#39;efficienza di cura è diminuito (Murgatroyd e nipote, 2012). I livelli di espressione di mRNA OXT sono stati normalizzati contro tre geni housekeeping combinati, b-actina, ipoxantina fosforibosiltransferasi (HPRT) e gliceraldeide-3-fosfato deidrogenasi (GAPDH). * Indica una differenza significativa tra i gruppi di controllo e di stress, p &lt;0.05, di n = 16-18.

Questo articolo descrive l&#39;uso dei residenti intruso stress sociale cronico come un paradigma etologicamente rilevanti per modello post-partum la depressione e l&#39;ansia in lattazione roditori.

Utilizzando cronica stress sociale a modello depressione post-partum in lattazione Roditore

Exposure to chronic stress is a reliable predictor of depressive disorders, and social stress is a common ethologically relevant stressor in both animals ...

L'obiettivo generale del seguente esperimento è creare un modello di roditore ecologicamente rilevante per lo studio dei disturbi dell'umore nel periodo postpartum. In primo luogo, i piccoli vengono sottoposti a un periodo di separazione dalla madre. Successivamente, i piccoli vengono restituiti alla gabbia d'origine e vengono registrati i comportamenti di cura materna per indurre uno stress sociale.Viene introdotto un nuovo intruso maschio. L'aggressività materna viene registrata per 30 minuti o più al fine di indurre uno stress sociale cronico. I nostri risultati indicano che lo stress sociale cronico rappresenta un paradigma efficace e affidabile per ridurre le cure materne.Un altro vantaggio di questa tecnica rispetto ai modelli esistenti di depressione indotta da stress, come lo stress da immobilizzazione ripetuta, la sconfitta sociale o i paradigmi di stress cronico lieve, che utilizzano una varietà randomizzata di stressori, è che lo stress sociale non introduce confondenti maggiori di tipo logistico o fisiologico. L'uso di paradigmi di stress sociale cronico potrebbe portare all'individuazione di misure preventive e trattamenti migliori per i disturbi dell'umore nelle madri e nella loro prole. Gli adulti femmina Dolly sono allevati in sede e i test vengono effettuati nella gabbia di residenza, situata nella stessa stanza per tutta la durata dello studio.Al giorno 20 o 21 di gravidanza, vengono posizionati nella gabbia standard separatori alti un pollice realizzati in plexiglass trasparente. Questi dividono la gabbia in quattro quadranti per impedire ai cuccioli di tornare dalla madre durante i test. Il comportamento materno tipico viene confermato per tutte le madri nel giorno della nascita.Mediante osservazione diretta del recupero dei cuccioli, del grooming, dell'allattamento e del grooming autoindotto. I maschi intrusi utilizzati in questo studio sono più piccoli o di dimensioni simili. Sprague Dolly, maschi e femmine non vengono mai esposti due volte allo stesso maschio.L'utilizzo di maschi di dimensioni simili a quelle delle femmine accudenti aiuta a prevenire l'infanticidio. Una videocamera è montata vicino alla gabbia in modo che i comportamenti possano essere registrati durante il test. Per iniziare, rimuovere la nidiata dalla madre, pesare separatamente il maschio e la femmina, quindi posizionarli in una gabbia pulita di contenimento per 60 minuti.Al termine di questa separazione di 60 minuti, pesare nuovamente i cuccioli. Prima di reintrodurre i cuccioli nel loro contenitore d'origine, avviare la registrazione video per assicurarsi che tutto il comportamento di recupero dei cuccioli venga registrato. Distribuire i cuccioli in modo il più uniforme possibile tra i tre quadranti non sottoposti a test del contenitore.Dopo questo reinserimento, registrare il comportamento di cura materna per 30 minuti. I comportamenti di cura materna includono tipicamente il recupero delle nidiate nel nido, il costruire il nido, la pulizia dei piccoli o di sé stessa, o l'allattamento. Quando la femmina ha interagito con la nidiata per un totale di 120 minuti, pesare nuovamente i piccoli per determinare l'assunzione di latte.Nel periodo di due ore, un cucciolo viene soppresso da ciascuna nidiata nei giorni dei test comportamentali successivi a questo periodo di allattamento. Per prelevare un campione di latte dallo stomaco, rimettiamo i cuccioli alla femmina. Dopo averli pesati e avviato la registrazione video, introduciamo nella gabbia un intruso maschio nuovo di dimensioni minori o simili per 30 minuti per valutare l'aggressività materna.I comportamenti di aggressività materna includono tipicamente attacchi, morsi, calci o immobilizzazioni del maschio intruso da parte della femmina madre. Per i soggetti di controllo, il maschio viene rimosso dopo la registrazione video di 30 minuti dell'aggressività materna nei giorni due, nove e sedici della lattazione; per i soggetti sottoposti a stress sociale cronico, i maschi rimangono con le madri per 60 minuti ogni giorno. Nel periodo di 15 giorni compreso tra il giorno due e il giorno 16 della lattazione, nei giorni due, nove e sedici, i primi 30 minuti vengono registrati in modo analogo ai soggetti di controllo nei giorni due, nove e sedici del test; una bottiglia contenente saccarina allo 0,02% viene aggiunta alla gabbia domestica della madre alle 15:00, alternando il lato destro e sinistro.I flaconi vengono successivamente pesati per determinare la preferenza per la saccarina. I piccoli vengono svezzati al giorno 23 e le madri vengono sacrificate per ottenere campioni destinati ad ulteriori analisi. Le femmine adulte figlie di madri sottoposte a stress sociale cronico generano in seguito una propria prole.Per ulteriori analisi, si utilizza un software di analisi comportamentale per valutare il comportamento materno registrato durante lo studio. Sia l'aggressività materna che le cure materne vengono valutate in tutti i video relativi all'aggressività materna. Questo programma genera sia un file di dati completo con intervalli di cinque secondi temporizzati sia una tabella riassuntiva con le frequenze totali e le durate dei comportamenti selezionati durante la registrazione di 30 minuti.Lo stress sociale cronico causato dall'esposizione di una femmina allattante a un intruso maschio per un'ora al giorno per 15 giorni ha determinato una riduzione della durata della pulizia della prole e delle cure materne totali. Dal nono al sedicesimo giorno di allattamento, la femmina ha mostrato un aumento della pulizia autoindotta, un indicatore di ansia e comportamenti aggressivi. Di conseguenza, l'assunzione di latte da parte della prole è diminuita rispetto ai controlli nei giorni nove e sedici di allattamento, e la crescita dei piccoli è risultata significativamente ridotta in entrambi questi giorni.Lo stress sociale ha inoltre ridotto la preferenza per la saccarina, un indicatore di anedonia, e ha influenzato l'assunzione di latte misurata nei cuccioli di femmine adulte. La prole di madri sottoposte a stress sociale ha mostrato una riduzione della preferenza per la saccarina nei giorni due e sedici della lattazione; anche la preferenza per la saccarina delle madri F1 esposte a stress sociale cronico in età precoce era inferiore. Nei giorni due e sedici della lattazione, l'espressione dell'mRNA dell'ossitocina era attenuata nel nucleo sopraottico delle madri F1 stressate in giovane età, e effetti simili sono stati osservati nel nucleo paraventricolare.Quando si stabilisce un protocollo di stress sociale cronico, è importante ridurre al minimo l'esposizione a ulteriori fattori di stress, come il trasporto delle femmine con la loro prole, disturbi eccessivi da parte dell'uomo, gabbie sporche e altri stimoli acustici o olfattivi avversivi. Una struttura stabile per l'alloggio e una gestione animale costante produrranno dati più riproducibili. Seguendo questa procedura, una vasta gamma di tessuti può essere campionata in diversi punti temporali per indagare gli effetti dello stress sociale cronico su altri sistemi organici.Inoltre, gli stressori sociali possono essere applicati in diverse fasi della storia della vita per studiare sia la suscettibilità che la resilienza ai disturbi indotti da stress.

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