16 gennaio 2014
Il test del pressor freddo è un classico compito di induzione dello stress utilizzato in una vasta gamma di ricerche che esaminano la relazione tra stress e cognizione, emozione e comportamento. In questo articolo viene presentata un'alternativa pratica e versatile al tradizionale test pressor freddo: l'involucro a braccio pressor freddo.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di indurre uno stato di stress acuto attraverso l'applicazione dell'impacco per il braccio del pressore freddo. Ciò si ottiene rimuovendo prima l'involucro del braccio del pressore freddo dalla cella frigorifera e coprendolo con uno strato protettivo di fogli di plastica. Il secondo passo consiste nel testare la temperatura superficiale dell'involucro del braccio del pressore freddo per assicurarsi che rientri nell'intervallo desiderato e sicuro.
Successivamente, l'impacco per il braccio del pressore freddo viene fissato al braccio del partecipante. Il passaggio finale consiste nel rimuovere l'impacco del braccio del pressore freddo dal braccio del partecipante dopo che è trascorso il periodo di tempo desiderato o su richiesta del partecipante. In definitiva, i dati sul cortisolo salivare e sulla conduttanza cutanea vengono utilizzati per dimostrare che l'impacco freddo del braccio evoca l'attivazione sia dell'asse ipotalamico ipofisi-surrene che del sistema nervoso simpatico.
Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti, come la tradizionale pressa a freddo, è che non comporta l'uso di acqua vera e propria, che può rappresentare un pericolo per apparecchiature sensibili come la risonanza magnetica. Questo metodo può fornire ai ricercatori interessati allo studio dello stress un mezzo efficace, facile e versatile per indurre lo stress in laboratorio. A dimostrare la procedura saranno Stephanie e Travis, entrambi studenti laureati nel mio laboratorio.
Per realizzare l'involucro del braccio del pressore freddo, utilizzare prima del cemento di gomma per applicare due o tre pezzi di Velcro a ciascuna delle due confezioni di gel da sei x 12 pollici. Assicurarsi che il velcro sia equidistante e attendere 24 ore affinché il cemento si asciughi. Quindi piega un pezzo di tessuto spesso di circa 12 x 16 pollici a metà nel senso della lunghezza, quindi posiziona gli impacchi di gel nel senso della lunghezza lungo ciascuna metà interna del tessuto piegato.
Ora attacca il lato complementare di ogni pezzo di Velcro ai lati interni del tessuto usando del cemento di gomma o ago e filo. I pezzi devono essere distanziati in modo che corrispondano al posizionamento del Velcro sulle confezioni di gel. Ciò consentirà di rimuovere facilmente le confezioni di gel per la pulizia e quindi di riattaccarle per la conservazione.
Successivamente, ottenere due pezzi più grandi di velcro di circa due per 10 pollici e tagliare un pezzo a circa un quarto della sua dimensione originale mantenendo l'altro alla dimensione originale, fissare il piccolo pezzo di velcro sulla parte anteriore e posteriore della parte esterna del tessuto sullo stesso lato. Infine, apporre la parte più lunga del Velcro nelle posizioni analoghe sulla parte esterna del lato opposto del tessuto. Questo può essere fatto usando cemento di gomma o ago e filo dopo che questo è stato completato.
Dovrebbe essere possibile avvolgere il tessuto attorno all'avambraccio e alla mano e sfaccettarlo in posizione utilizzando le cinghie in Velcro Una volta completato, conservare l'impacco per braccio a freddo in un congelatore con una temperatura attentamente monitorata tra zero e cinque gradi Celsius. Se il congelatore non può essere impostato su una temperatura specifica ed è inferiore a zero gradi Celsius, attendere che l'involucro del braccio si riscaldi a una temperatura sicura dopo averlo rimosso dal rimessaggio. In caso contrario, esiste la possibilità che un partecipante allo studio sperimenti un'ustione da freddo.
Assicurati di informare i partecipanti più volte durante il consenso e prima della somministrazione dell'impacco per il braccio che sono liberi di ritirare e terminare la procedura in qualsiasi momento. Si consigliano tre dichiarazioni di prelievo discrete. Inoltre, preparati a terminare la procedura in qualsiasi momento se il partecipante diventa angosciato.
Quella che segue è una dichiarazione suggerita che può essere data al partecipante prima dell'esperimento. La fascia per le braccia è progettata per essere stressante e quindi sarà molto scomoda, ma è importante capire che è tuo diritto terminare la procedura o l'esperimento in qualsiasi momento per qualsiasi motivo, indipendentemente dal fatto che la fascia per le braccia sia sul tuo braccio o meno. Capisci?
Sì, capisco. Se si eseguono esperimenti di risonanza magnetica con il braccio a freddo, avvolgere il primo schermo per la sicurezza della risonanza magnetica e ricordare al partecipante che l'esperimento di imaging può essere interrotto in qualsiasi momento. La risonanza magnetica funzionale non sarà dimostrata qui, ma si noti che la fascia del braccio non deve essere lasciata in posizione per più di pochi minuti durante un'attività funzionale.
Prima di utilizzare la fascia per le braccia, coprire le confezioni di gel con uno strato di fogli di plastica per evitare il contatto diretto tra le confezioni di gel e la pelle del partecipante. Quindi misurare la temperatura superficiale di ogni confezione di gel coperta utilizzando un termometro a infrarossi in due o tre punti lungo la sua lunghezza per garantire una temperatura sicura. Se la temperatura è troppo bassa, attendere che passi più tempo e misurare.
Ancora una volta, prendi tutte le misurazioni di base necessarie per l'esperimento, come un campione di cortisolo salivare. Quindi, una volta raggiunta la temperatura desiderata, avvolgere l'involucro del braccio attorno all'avambraccio del partecipante e fissarlo con la mano in posizione Con le cinghie in velcro, lasciare l'involucro del braccio in posizione per il periodo di tempo desiderato. Si consigliano circa due minuti.
Assicurati di rimuoverlo immediatamente su richiesta del partecipante o dopo che è trascorso il tempo specificato. Questo passaggio può essere eseguito anche all'interno del foro della risonanza magnetica, se applicabile. Acquisire ulteriori campioni di cortisolo salivare o misurazioni della conduttanza cutanea, se necessario.
Può anche essere somministrato un questionario post-sperimentale per consentire al partecipante di riportare valutazioni soggettive dello stress percepito. Quindi, una volta completato l'esperimento, rimuovere il foglio di plastica e conservare l'involucro del braccio del pressore freddo per un uso futuro come descritto in precedenza. Qui possiamo vedere i livelli medi di cortisolo salivare al basale e dopo due esecuzioni di attività FMRI sia per il controllo senza stress che per i gruppi di avvolgimento del braccio a freddo.
Un test T indipendente a una coda tra il controllo senza stress e l'area del gruppo di pressione a freddo sotto la curva rispetto all'aumento ha indicato un aumento significativo del cortisolo salivare per il gruppo di pressione a freddo. I valori dell'area negativa sotto la curva, che indicano una diminuzione netta del cortisolo salivare, sono stati mantenuti come indice di diminuzione. Infine, qui possiamo vedere i livelli medi di conduttanza cutanea trasformati a radice quadrata in microsiemens durante l'avvolgimento del braccio a freddo o l'applicazione dell'avvolgimento del braccio senza controllo dello stress I livelli di conduttanza cutanea del gruppo di avvolgimento del braccio a freddo sono significativamente più alti di quelli esibiti dal gruppo senza controllo dello stress.
Durante l'esecuzione di questa procedura, assicurarsi di monitorare attentamente la temperatura degli avvolgimenti del braccio del pressore freddo. Assicurati che i partecipanti comprendano che sono liberi di ritirarsi o terminare la procedura in qualsiasi momento. Infine, preparati a rimuovere l'impacco del braccio del pressore freddo su richiesta del partecipante o se mostra segni di sofferenza insolita.
Questa tecnica può essere utile ai ricercatori interessati a studiare l'influenza degli stress sul comportamento e sulla funzione, ma hanno scoperto che il tradizionale pressore a freddo è ingombrante o non fattibile. Inoltre, può essere facilmente utilizzato in combinazione con altre tecniche di induzione dello stress.
L'avvolgimento del braccio per il test del pressore freddo è un metodo innovativo per indurre stress acuto in contesti di ricerca. Questa tecnica offre un'alternativa più sicura ai test tradizionali del pressore freddo, riducendo al minimo i rischi per l'attrezzatura sensibile.
L'avvolgimento per il test pressorio freddo (CPAW) offre un'alternativa pratica e compatibile con la risonanza magnetica per l'induzione di stress acuto negli ambienti di ricerca traslazionale. Permettendo un'attivazione robusta sia dell'asse SAM che di quello HPA senza l'uso di acqua, il CPAW supporta studi sulla risposta allo stress in contesti in cui i tradizionali test pressori freddi risultano impraticabili. Questo metodo aumenta la fiducia predittiva nella ricerca sui biomarcatori dello stress e ne facilita l'integrazione in complessi flussi sperimentali.
CPAW si inserisce nel percorso dalla scoperta alla fase preclinica, consentendo l'induzione di stress acuto per la validazione di bersagli, la scoperta di biomarcatori e la ricerca traslazionale.