Potenziale di membrana Dye Imaging di ventromediale dell'ipotalamo neuroni da topi adulti per studiare glucosio Sensing

L'obiettivo generale di questa procedura è valutare il rilevamento del glucosio nei neuroni ipotalamici ventrali mediali o VMH di topi più anziani, utilizzando il colorante sensibile al potenziale di membrana come indice di attività neuronale. Ciò si ottiene eseguendo prima la perfusione cardiaca per eliminare il sangue dal cervello di un topo anestetizzato prima della rimozione del cervello. Il secondo passo consiste nel creare fette di cervello coronale e sezionare il VMH.

Successivamente, i neuroni VMH vengono dissociati e coltivati su vetrini. Il passaggio finale consiste nel misurare la fluorescenza dei neuroni quando il glucosio diminuisce in presenza di un colorante potenziale di membrana. In definitiva, ogni cambiamento di neuroni nella fluorescenza viene utilizzato per quantificare la risposta di quel neurone inibito dal glucosio ai cambiamenti del glucosio.