Riproducibile Paraplegia da Toracica aortica occlusione in un modello murino di Spinal Cord ischemia-riperfusione

L'obiettivo generale del seguente esperimento è studiare gli effetti dell'ischemia del midollo spinale in un modello murino. Questo viene ottenuto innanzitutto inserendo una sonda di flussimetria laser Doppler sull'arteria femorale. Successivamente, si esegue la sternotomia per accedere all'arco aortico e all'arteria sottoclavia sinistra.

Quindi si esegue un'attenta dissezione dell'aorta e delle arterie sottoclavie al fine di ridurre adeguatamente il flusso sanguigno arterioso al midollo spinale. Si ottengono i risultati. Il cho, un deficit neurologico postoperatorio, che si basa sul punteggio neurologico del mouse Baso.

Il principale vantaggio di questa tecnica rispetto ad altri metodi esistenti, come la toracotomia laterale, è che lo spazio pleurico non viene violato. Questo metodo può contribuire a chiarire aspetti della fisiopatologia del midollo spinale, delle lesioni da ischemia perfusoria e a individuare potenziali interventi farmacologici. Le implicazioni di questa tecnica si estendono a terapie finalizzate alla prevenzione della paraplegia conseguente all'ischemia del midollo spinale.

Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulla paraplegia, che complica la chirurgia toracica, può anche essere applicato ad altri processi patologici che causano ischemia acuta del midollo spinale, come l'ipotensione o le patologie vascolari. In generale, le persone nuove a questa tecnica incontrano difficoltà nella dissezione dell'arco aortico poiché è necessaria la massima attenzione per evitare morte, emorragia o pneumotorace. Abbiamo quindi pensato a questa tecnica dopo aver riscontrato diverse difficoltà con l'approccio di toracotomia laterale, ampiamente descritto in letteratura, ma associato a una mortalità più elevata nei nostri animali.

La dimostrazione visiva di questo metodo è fondamentale poiché è necessaria la massima cautela durante la dissezione mediastinica per prevenire la mortalità intraoperatoria. Dopo aver anestetizzato un topo seguendo il protocollo descritto nel testo, assicurandosi che sia sufficientemente sedato e aver rimosso il pelo dalla regione toracica mediana e dalla superficie ventrale dell'estremità inferiore sinistra, inserire una sonda rettale lubrificata nel retto del topo e fissarla al tavolo operatorio. Regolare il lettino riscaldato per mantenere una temperatura rettale obiettivo di 36,5 gradi Celsius.

Successivamente, praticare una piccola incisione sulla arteria femorale ed esporre il tessuto sottocutaneo. Inserire quindi una sonda laser doppler sull'arteria femorale. Regolare la posizione della sonda finché il monitor di perfusione non registra un valore superiore a 800 unità di perfusione, per poter procedere con la dissezione dell'arco aortico e dell'arteria sottoclavia.

Eseguire un'incisione cutanea di due centimetri al di sopra della fossetta sopra-sternale e dissezionare delicatamente la cute dal tessuto sottocutaneo. Liberare la ghiandola sottomandibolare se si verifica sanguinamento. Applicare una leggera pressione con un bastoncino di cotone nel piano avascolare.

Dividere la ghiandola sottomandibolare lungo la linea mediana utilizzando pinze. Sollevare delicatamente lo sterno e con le forbici effettuare con attenzione una sternotomia mediana di un centimetro attraverso la linea mediana dello sterno. Posizionare cinque suture di retrazione su ciascun lato al margine dello sterno e retrarre lateralmente lo sterno fissando le suture al tavolo operatorio.

Successivamente, mediante dissezione ottusa, liberare i muscoli sternoioidei lungo la trachea. Quindi utilizzare le forbici per dividere il muscolo sternoideo sinistro al fine di migliorare l'esposizione. Dissecare il timo dai tessuti circostanti.

Continuare la dissezione ottusa fino a quando i vasi principali sono visibili. Con la massima cautela per evitare l'ingresso nello spazio pleurico, posizionare le pinze vascolari sull'arco aortico e sull'arteria succlavia sinistra. Verificare che il flusso distale sia stato adeguatamente interrotto, il che si manifesterà come una riduzione superiore al 90% delle unità di perfus游戏副本

Proseguire l'occlusione per quattro a otto minuti. Alla fine del tempo, rimuovere la pinza vascolare e verificare l'emostasi prima di chiudere la sternotomia e la cute. Iniziare rimuovendo il punto di trazione sul lato sinistro del topo.

Utilizzare la giusta sutura di retrazione per chiudere la sternotomia e una sutura continua con punto cinque oh per chiudere la cute. Lasciare che il topo si riprenda in una gabbia posizionata su un tappetino riscaldante, prima di restituirlo a una gabbia normale con accesso a cibo e acqua. Monitorare la comparsa di segni di distress respiratorio e, se necessario, praticare l'eutanasia secondo il protocollo indicato nel testo.

Infine, utilizzare la scala Baso per il mouse per il monitoraggio della locomozione dell'animale. A intervalli di 12 ore, i topi sono stati sottoposti a intervento fittizio o a occlusione aortica per quattro a otto minuti. E nel periodo postoperatorio gli animali sono stati valutati mediante il sistema di punteggio per il mouse Baso mostrato qui.

Questo grafico illustra che i topi sottoposti a intervento fittizio non hanno mostrato deficit funzionali osservabili in alcun momento nel periodo postoperatorio. I topi sottoposti a ischemia moderata presentavano una funzionalità quasi normale degli arti posteriori a 12 ore, con un progressivo deterioramento funzionale fino a paralisi completa entro 48 ore. I topi appartenenti al gruppo con ischemia prolungata hanno manifestato paralisi completa subito dopo l'intervento, senza alcun recupero funzionale.

Dopo aver guardato questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come dissezionare in modo sicuro l'arco aortico e ridurre adeguatamente il flusso sanguigno arterioso del midollo spinale.