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DOI: 10.3791/50925-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
The zebrafish serves as a powerful model for studying muscular dystrophies and related neuromuscular diseases. This article details noninvasive assays to assess muscular organization and locomotion in zebrafish embryos.
Il pesce zebra è ora uno strumento consolidato e potente per modellare distrofie muscolari, miopatie congenite e malattie neuromuscolari correlate. La birifrangenza e il comportamento di fuga evocato dal tatto sono due comuni test non invasivi utilizzati per determinare il grado di disorganizzazione muscolare e compromissione locomotiva degli embrioni di zebrafish durante lo sviluppo precoce.
L'obiettivo generale di questa procedura è valutare l'entità dell'organizzazione miofibrillare nelle larve di zebrafish traslucide e quantificare la loro distanza di nuoto in risposta alla stimolazione tattile per entrambi i metodi. Ciò si ottiene prima accoppiando il pesce zebra e poi raccogliendo uova vitali nella seconda fase del test per la valutazione della struttura muscolare. Un embrione di pesce zebra anestetizzato rivestito viene posizionato direttamente tra due lenti polarizzate su un tavolino per stereomicroscopio in modo che il pesce sia orientato lungo l'asse laterale del suo corpo e sia il più piatto possibile.
La birifrangenza viene quindi visualizzata e l'integrità muscolare viene quantificata. Nella seconda fase del saggio di fuga evocata al tatto, una singola larva rivestita viene posta in una profonda capsula di Petri e poi centrata nel campo visivo dello stereomicroscopio. Uno stimolo meno sensoriale viene inviato alle larve toccando la coda con uno spillo da insetto e la reazione dell'animale viene ripresa fino a quando l'embrione smette di nuotare o nuota fuori dal campo visivo.
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