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Raccolta e identificazione di elminti dalla fauna selvatica
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Helminth Collection and Identification from Wildlife

Raccolta e identificazione di elminti dalla fauna selvatica

Full Text
16,520 Views
09:37 min
December 14, 2013

DOI: 10.3791/51000-v

Maria S Sepulveda1, John M Kinsella2

1Department of Forestry and Natural Resources,Purdue University, 2Helm West Laboratory

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Gli animali selvatici sono comunemente parassitati da una vasta gamma di elminti. I quattro tipi principali di elminti sono "nematodi" (nematodi), "vermi dalla testa spinosa" (acantocefali), "trematodi" (trematodi) e "tenie" (cestodi). Qui descriviamo come gli elminti vengono raccolti da un animale vertebrato e come vengono conservati e identificati tassonomicamente.

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di raccogliere, conservare e identificare i caschi della fauna selvatica. Ciò si ottiene con la prima necroscopia, un animale selvatico. Successivamente, i caschi vengono raccolti da diversi organi, quindi i caschi vengono conservati utilizzando una varietà di tecniche per una successiva identificazione.

Infine, gli elmi vengono ripuliti, colorati e montati e le specie vengono identificate. In definitiva, è possibile ottenere risultati che mostrano strutture specifiche del casco attraverso tecniche di pulizia e/o colorazione che possono aiutare notevolmente nell'identificazione delle specie. Sebbene questo metodo possa essere applicato per l'identificazione di elmi di mammiferi, uccelli, rettili e anfibi.

Può essere applicato anche ad altri organismi come i pesci. Per iniziare, posiziona l'animale su una superficie piana e usa una lente d'ingrandimento per esaminare tutte le aperture esterne, comprese le orecchie, la cavità orale e gli occhi per la presenza di nematodi, CSE, dita dei piedi e trematodi. Usando una lama affilata o un coltello e un paio di pinze da dissezione.

Praticare un'incisione sulla cavità addominale facendo attenzione a non rompere alcun organo. Quindi, con un tagliaossa o una piccola sega a mano, se necessario, aprire la cavità toracica. Esaminare entrambe le cavità alla ricerca di fal, nematodi e grandi trematodi.

Quindi legare un filo vicino all'inizio dell'esofago e un altro alla fine dell'intestino crasso per l'esame. Sotto uno stereomicroscopio, separare il cuore e i principali vasi sanguigni, la trachea e i polmoni in singole piastre di Petri. Rimuovere il fegato, la cistifellea e il dotto pancreas, la milza, i reni e la vescica urinaria ed esaminarli allo stereomicroscopio.

Quindi rimuovere l'intero apparato digerente e mettere ogni sezione in un piatto di vetro. Dopo che gli organi sono stati rimossi, utilizzare un tubo flessibile o un flacone a spruzzo riempito con soluzione fisiologica allo 0,9% per lavare la cavità corporea, permettendole di filtrare attraverso un setaccio a maglie di 106 micrometri. Lavare il contenuto del setaccio in una capsula di Petri ed esaminare il contenuto con uno stereomicroscopio Per i vermi Fal o i trematodi sanguigni utilizzando le forbici, aprire ogni sezione del tratto digestivo.

Raschiare la mucosa ed esaminarla attentamente per la presenza di parassiti di grandi dimensioni. Gli psci dell'encanto cephas sono spesso profondamente radicati nella parete dell'intestino. Pertanto, se necessario, utilizzare pinze e/o piccole forbici per stuzzicarli con cura dal tessuto.

Mettere ogni sezione aperta sotto l'acqua corrente e lavare il contenuto in un setaccio da 106 micrometri. Quindi aprire il cuore e i principali vasi sanguigni, la trachea, le urine e la cistifellea ed esaminare il contenuto Allo stesso modo, utilizzare una lama affilata e una pinza per affettare e separare organi solidi come fegato, polmoni, reni, milza e pancreas, lavare ed esaminare il contenuto. Registra i tipi di parassiti.

Trovato il numero di ogni tipo e gli organi in cui si trovano. Etichettare fiale o barattoli inserendo all'interno un piccolo pezzo di una semplice scheda etichettata a matita per conservare i caschi per successivi studi genetici. Per prima cosa mettili direttamente nell'etanolo.

Dopo aver fissato il campione per uno o più giorni, trasferirlo in una fiala di vetro da cinque millilitri riempita con etanolo al 70% per la conservazione a lungo termine. Per conservare i trematodi, posizionare i campioni vivi su un microscopio di vetro, far scivolare una goccia di soluzione fisiologica, applicare un vetrino di vetro e passare il vetrino su una fiamma senza far bollire la soluzione salina. Quindi far cadere il vetrino in una capsula di Petri contenente alcol, acido acetico di formina o un FA e lasciare che il vetrino galleggiasse via.

Fissare i trematodi morti in una FA o in una formina tamponata al 10% per 48 ore prima di trasferirli in un barattolo riempito con etanolo al 70% per la conservazione a lungo termine. Per fissare l'estos, rilassa gli animali vivi in una capsula di Petri versandoci sopra dell'acqua bollente, quindi trasferiscili in un barattolo riempito con etanolo al 70% per la conservazione a lungo termine. Rilassa le encanto cepha vive mettendole in una capsula di Petri di acqua del rubinetto in frigorifero per una o diverse ore fino a quando la proboscide non è completamente evitata.

Trasferiscili in un barattolo riempito con etanolo al 70% o un FA per la conservazione a lungo termine. Uccidi i nematodi piccoli o fragili e l'etanolo caldo al 70% e conservalo in un barattolo riempito con etanolo al 70% con glicerina al 5% per uccidere. Nematodi medio-grandi.

Metterli nell'acido acetico glaciale freddo e, dopo 15 minuti, trasferirli in un barattolo riempito con il 70% di etanolo e il 5% di glicerina. Preparare l'ematina di Harris sciogliendo l'ematina e l'alcol e sciogliendo il solfato di alluminio ammonio in acqua surriscaldata. Mescolare entrambe le soluzioni e portare a ebollizione.

Quindi aggiungere lo iodato di sodio e far bollire per due o tre minuti. Quando la soluzione si è raffreddata, utilizzare carta da filtro 5 41 per filtrare la soluzione per colorare palesemente Trematodes estos e decantare Cephas Posizionare in ematina Harris o semicon Carminio durante la notte per trattenere i campioni. Mettere in etanolo acido al 70% fino a quando gli organi sono visibili.

Per arrestare la decolorazione, trasferire i campioni al 70% di etanolo basico per almeno 30 minuti. Disidratare i campioni in una serie di etanolo e utilizzare xilene o salicilato di metile per eliminarli per montare i campioni su un vetrino da microscopio, aggiungere una goccia di Canada Bossum e un vetrino coprioggetti. Lasciare asciugare per una notte, eliminare i nematodi di piccole e medie dimensioni e i cefi encanto mettendoli in montature di fenolo latto su un vetrino da microscopio e coprendo con un vetrino coprioggetti per 15-30 minuti Per i nematodi di grandi dimensioni e i cephas encanto.

Mettere in fenolo all'80% per un massimo di 60 minuti. Esaminare al microscopio ottico per verificare la pulizia delle strutture più piccole per l'esame del culex atos. Tagliarlo e posizionarlo sulla quantità di lattofenolo.

Su un vetrino da microscopio. Usa un vetrino coprioggetti per schiacciare il culex per consentire la misurazione e il conteggio dei ganci stellari della rosa. Tagliare l'estremità anteriore e montarla su Foss al microscopio.

Far scivolare sotto alcune gocce di fenolo latto o in una gelatina di glicerina per il montaggio permanente. Osservare l'apparato boccale al microscopio ottico. Dopo aver tagliato le code dei grandi nematodi e averli montati nel lattofenolo, osservate i paoli ventrali e la morfologia spica dei maschi al microscopio ottico utilizzando i metodi descritti in questo video.

Un'indagine sui caschi degli scenari dei Sox è stata condotta nella contea di Missoula, nel Montana. Tra il 2007 e il 2011. Un totale di 56 toporagni sono stati raccolti da trappole a caduta ed esaminati entro due ore dalla morte.

La prevalenza complessiva dell'infezione era del 96%Solo due toporagni erano privi di parassiti. Sono state identificate 15 specie di elmetti, tra cui nove specie di estos e sei specie di nematodi. Una specie del genere Esto staphylo authorities non era precedentemente descritta.

Gli organi trovati infetti includevano l'intestino tenue, lo stomaco, i polmoni e la vescica urinaria. L'intensità totale dell'infezione variava da sette a 234 vermi per ricchezza di specie ospiti infette o il numero di specie di elmetto per ospite infetto variava da uno a otto con una media di 4,1 una volta padroneggiata. Questa tecnica può essere eseguita in una o due R su un piccolo mammifero come uno scoiattolo e da quattro a cinque R su un mammifero più grande come un procione.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere un'ottima comprensione di come raccogliere, conservare e identificare i caschi dalla fauna selvatica.

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Parole chiave: Elminto Nematode Acanthocephalan Trematode Cestodo Necroscopia Setacciamento Microscopio Fissazione Clearing Colorazione Identificazione delle specie Animale vertebrato

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