Name: Rigidità regolabile, fissatore esterno per le Rat Femore osteotomia e segmentale Bone Difetto Models (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-10-09T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 9 s
Description: Impara l'osteotomia del femore di ratto con fissatore esterno a rigidità regolabile per modelli di difetto osseo segmentale. Questo metodo standardizzato consente di studiare la rigenerazione ossea e l'influenza dell'ambiente meccanico sulla guarigione in vivo.

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Questo lavoro è stato sostenuto dalla Fondazione AO ​​(S-08-42G) e RISystem AG. Vorremmo estendere un grande &quot;grazie!&quot; alla squadra di Stephan Zeiter presso l&#39;Istituto di Ricerca AO di Davos, in Svizzera per essere così accomodante che ci permette di usare i loro o strutture per le riprese di questa procedura chirurgica.

La cura degli animali e protocolli sperimentali sono stati seguiti in conformità alle linee guida NIH e approvati dal Centro Medico Istituzionale Animal Care and Use Committee Beth Israel Deaconess, Boston, MA. (Numero di protocollo: 098-2009) 1 Preparazione di materiali chirurgici e strumenti <ol><li> Sterilizzare tutti i materiali chirurgici e strumenti utilizzati per eseguire un intervento chirurgico prima dell&#39;uso. Confezione materiali necessari, con o senza vassoio strumento, all&#39;interno di un panno piegato o carta nella confezione e sigillare con nastro autoclave per la sterilizzazione a vapore. La temperatura dell&#39;autoclave deve essere di 125-135 ° C per 20-25 min di tempo di sterilizzazione, e poi 10-15 minuti di tempo di asciugatura. </li><li> Assicurarsi che al momento dell&#39;intervento chirurgico i ratti sono 200-250 g. Questo è molto importante perché se i ratti sono più pesanti di dimensioni, poi un fissatore dimensioni diverse deve essere usato. Per ratti deve essere usato più pesante di 250 ga ingrandita del sistema fissatore esterno. </li> &lt;/ Ol&gt; 2 Procedura chirurgica e Applicazione del fissatore esterno <ol><li> Acquisto Sprague-Dawley (o qualsiasi altro ceppo) ratti (maschio o femmina, 200-250 g) da qualsiasi fornitore di animali certificati. Seguire la cura degli animali appropriata e protocolli sperimentali in conformità con le linee guida nazionali, che è approvato dalla Institutional Animal Care and Use Committee dello sperimentatore. Lasciare un minimo di 48 ore periodo di acclimatazione prima della procedura. </li><li> Per la chirurgia, trasportare il ratto di una sala dedicata procedura chirurgica. </li><li> Anestetizzare ratto con isoflurano prima via camera di induzione, e poi continuare con maschera collegata a una macchina per anestesia a un tasso del 1,5-2% a 1-1,5 L di O 2 / min. All&#39;inizio della chirurgia assicurarsi che l&#39;animale è sotto anestesia profonda. Per fare questo, utilizzare il pedale tecnica reflex da estendere l&#39;arto e pizzicare il web tra le dita dei piedi con le dita (non la punta stessa!). L&#39;animale non è sufficiently anestetizzato se l&#39;arto è ritirata, contrazione muscolare si verifica o se l&#39;animale fa rumore. </li><li> Dopo il ratto è in anestesia generale profonda per la chirurgia, iniettare l&#39;antibiotico (cefazolina, 20 mg / kg) e la buprenorfina analgesico (dose di 0,08 mg / kg) per via intramuscolare nella gamba destra. Per evitare grandi quantità di perdita di fluido durante l&#39;intervento chirurgico somministrare per via sottocutanea calda salina sterile al 3-5% del peso corporeo prima dell&#39;intervento, e se è necessario, al fine. Applicare sterile unguento occhio agli occhi per tenerli idratati per evitare lesioni della cornea. </li><li> Dopo le iniezioni di droga, barba e pulire l&#39;intera zampa posteriore destra del ratto con chlorohezadine o altra soluzione disinfezione e trasferire l&#39;animale al tavolo operatorio. (La gamba operata deve essere uguale a quello che è stato iniettato.) </li><li> Posizionare l&#39;animale su una superficie riscaldata in posizione prona (Figura 1A). Assicurarsi che la maschera facciale rimane sul naso e la bocca di poppaer il trasferimento al tavolo operatorio, e mantenere il regime di anestesia di cui al punto 2.3). Telo l&#39;area della procedura chirurgica con un telo fenestrato sterile in modo che solo la gamba destinata all&#39;intervento è esposto. </li><li> Fare un&#39;incisione approssimativo di 3-4 cm (Figura 1B) attraverso la pelle craniolateral esecuzione sulla superficie del femore destro dalla grande trocantere alla regione sovracondiloidea del ginocchio con un bisturi (Figura 1C). Esporre l&#39;albero del femore delicatamente dissezione separando la fascia lata, e fare in modo che il tessuto muscolare non è tagliato. Dopo di che, a parte separare vasto laterale M. e M. bicipite femorale e sollevare il M. tensore della fascia lata per esporre tutta la lunghezza del femore (facendo in modo che il nervo sciatico è conservato; Figura 1D). </li><li> Nella zona prevista di osteotomia, preparare il femore lungo la zona intermedia della diafisi rilasciando il tessuto muscolare surrounding della femur. In primo luogo, iniziare mettendo l&#39;ascensore Henahan perpendicolare alla superficie esposta del femore, e quindi utilizzando un bisturi, rilasciare il muscolo nella zona adiacente. <ol><li> Continua avanzando in avanti e andare in giro per il femore, rimanendo vicino alla superficie dell&#39;osso, fino a tutto il tessuto muscolare circostante viene rilasciato da tutta la sezione centrale delle ossa (in cui verrà creato il difetto), e il tessuto muscolare è completamente pulita dall&#39;osso. Nel fare questo, è molto importante stare vicino alla superficie ossea per evitare di tagliare eventuali vasi principali. </li></ol></li><li> Per un difetto di osso di grandi dimensioni 5 mm, anello 2 pezzi di filo sega Gigli (0,22 mm) attorno all&#39;osso con orientamento medio-laterale (Figura 1E, F). Dopo annodare il filo sega, la posizione di un pezzo sul lato distale del femore, vicino alla giunzione del ginocchio, ed un secondo pezzo sul lato prossimale vicino al dell&#39;anca. Fissare il filo sega Gigli pezzi su ogni lato con S-forma dissezione curva e Ligatpinze ure, in modo che rimanga nel luogo previsto. Se è prevista una sola osteotomia taglio, quindi utilizzare solo un pezzo di filo sega. </li><li> Utilizzare la piastra fissatore esterno come modello per determinare la posizione esatta dell&#39;impianto. La posizione del fissatore esterno deve essere il più vicino possibile al centro del femore. <ol><li> Posizionare la piastra fissatore esterno sulla superficie anterolaterale dell&#39;osso. Ciò si ottiene facendo ruotare esternamente il femore. In questa posizione lo strato di tessuto molle è al suo più sottile, che impedisce un&#39;eccessiva tensione dei tessuti molli sotto la piastra fissatore dopo la ferita è chiusa. </li><li> Poi sollevare leggermente la piastra fissatore esterno dalla superficie ossea per assicurarsi che i fori della piastra sono centrati sulla superficie dell&#39;osso. Tenere il fissatore esterno con un morsetto che rimanga parallelo all&#39;asse longitudinale dell&#39;osso, e quindi utilizzare un utensile elettrico o un trapano a mano preforatura primo foro sul lato prossimale del femore con l&#39;0,79mm punta. Prima di avanzare in avanti, assicurarsi che la punta del trapano è ancora incentrato sulla superficie ossea. </li><li> Se la punta del trapano si allenta, utilizzare il contatore platina 1,00 millimetri (Figura 8F) per centrare la posizione del primo foro. Il contatore zavorra deve essere utilizzato per posizionare tutti i restanti perni di montaggio. Ciò garantirà un perfetto allineamento dei fori e la piastra fissatore rispetto alla superficie dell&#39;osso. </li></ol></li></ol> 3. fissatore esterno Metodo impianto Uso della Guida Saw <ol><li> Assicurarsi che la piastra del fissatore esterno non è montato a testa in giù prima di ritaglio sulla guida della sega. Determinare questo confrontando la dimensione dei fori sulla piastra. Il lato corretto è con il diametro del foro più grande rivolta verso l&#39;alto. Se la differenza tra le dimensioni dei fori all&#39;interno del fissatore non è evidente, utilizzare il contatore delle platine. <ol><li> Inserire la punta del contatore platina in uno dei fori sullala piastra fissatore, se il contatore zavorra adatta facilmente nel foro allora questo è il rialzo del fissatore, tuttavia, se la punta del contatore platina non va bene allora questo è un lato inferiore del fissatore, e deve essere capovolto per il fissaggio di conseguenza. (Importante:.. Assicurarsi di forare perpendicolare all&#39;asse longitudinale dell&#39;osso in modo da assicurare un perfetto orientamento del fissatore alla superficie dell&#39;osso La direzione del primo foro determina l&#39;orientamento finale del fissatore sull&#39;osso Ricordare l&#39; perni di montaggio sono della stessa lunghezza, e se il fissatore non è parallelo all&#39;asse longitudinale dell&#39;osso la distanza tra il fissatore e l&#39;osso varieranno troppo e potrebbero impedire la capacità di tutti i quattro perni di montaggio per penetrare entrambe le corticali.) </li><li> Dopo l&#39;orientamento è confermato, agganciare la piastra sulla guida della sega (Figura 2A, B) e quindi fissare l&#39;unità con l&#39;osso in modo che il primo foro preforatoè allineato con il primo foro sulla piastra (Figura 2C). Utilizzare la chiave scatola quadrata 0,70 millimetri inserito nel trapano a mano per guidare il primo perno di fissaggio nel foro. In questo modo si consentirà il posizionamento riproducibile per i restanti perni di montaggio. </li><li> Dopo il primo perno di montaggio è a posto, quindi praticare il foro più lontano dal primo perno di montaggio sul lato distale, e guidare il secondo perno di fissaggio nel foro. L&#39;ordine impianto dei due perni di montaggio centrali non è importante. </li></ol></li></ol> 4. fissatore esterno Metodo impianto Senza la Guida Saw: L&#39;applicazione del fissatore esterno può essere eseguita anche senza usare la guida di sega. Le fasi iniziali del impianto fissatore esterno sono gli stessi fino l&#39;unità con la guida sega viene troncato con l&#39;osso (passo 3.1). Se la guida di sega non viene utilizzato, è molto importante per mantenere la piastra fissatore nell&#39;orientamento corretto durantel&#39;intera procedura di applicazione. Il femore deve essere ruotata esternamente nella direzione antero-laterale. <ol><li> Tenere la piastra fissatore esterno con un morsetto o S-dissezione forma ricurva e pinze legatura in modo da essere parallela all&#39;asse longitudinale dell&#39;osso (Figura 3A). L&#39;applicazione del primo perno di montaggio determinerà l&#39;allineamento del fissatore, quindi, la rotazione dell&#39;osso deve essere mantenuto fino a quando il primo perno è inserito (Figura 3B). Dopo il primo perno è a posto, utilizzare attentamente le pinze per tenere la piastra fissatore che agisce come una guida trapano. </li><li> Inserire la punta nel secondo foro - questo è il foro più distale al divario osteotomia programmata (Figura 3C). Prima di forare, accertarsi che il secondo foro ha lo stesso orientamento della prima buca; anche fare in modo che dopo la foratura è completa, entrambe le corticali sono penetrati. </li><li> Inserire il 0,70 millimetri bo piazzax chiave per il trapano a mano e quindi inserire il perno di montaggio nella punta. Inserire con cautela nella piastra del fissatore esterno senza perdere l&#39;allineamento del primo foro preforato. </li><li> Non appena la punta è in contatto con l&#39;osso, iniziare ruotando la chiave in continuo carico assiale applicata all&#39;estremità prossimale del trapano a mano. Dopo circa 5 giri completi, assicurarsi che il filo alla fine prossimale del perno di montaggio cattura il corpo della piastra di fissatore esterno. Questo thread blocca il sistema. Fermare la rotazione quando l&#39;estremità del filo osso è vicino alla superficie superiore dell&#39;osso (Figura 3D). </li><li> Dopo i perni sul lato più distale e prossimale sono a posto, preforare i restanti due fori centrali. L&#39;ordine impianto dei due pin centrali non è importante (Figure 3C). </li><li> Dopo il fissatore esterno è a posto, utilizzare il filo Gigli 0,22 millimetri sega diretto dalla guida sega per rendere il difetto segmentale (Figure 4A). Se si sceglie il secondo metodo, la guida sega è ritagliato prima di effettuare un difetto. <ol><li> Per questo, passare un filo Gigli 0,22 millimetri vide attraverso le due scanalature sotto il femore (Figura 5A) per creare un difetto segmentale 5 millimetri dal movimento alternato avanti e indietro (Figura 5B) usando irrigazione sufficiente (uso siringa da 5 ml di soluzione salina a dispensare il tempo della creazione difetto). Per evitare danni ai tessuti molli, tagliare il filo vicino sega all&#39;osso da un lato dopo aver completato l&#39;osteotomia. Rimuovere la guida della sega (Figura 4B). </li></ol></li><li> Dopo aver creato il difetto o osteotomia, rimuovere la guida della sega e chiudere la ferita a strati, il muscolo prima (Figura 4C), e poi la pelle (Figura 4D). Prima che la ferita è chiusa, trattare il difetto, come previsto nel protocollo di studio. Chiudere lo strato muscolare e fascia lata utilizzando Ethibond Vicryl sutura 4-0, e la pelle con Ethicon monocryl 3-0 suture. Evitare di trascinare materiale di sutura su superfici non sterili, mentre suturare le ferite. Nota: Per evitare la ferita mordere, la sutura non deve finire distale all&#39;impianto inferiore. Allo stesso modo, colla di pelle può essere usato al posto di una sutura. </li><li> Nei primi tre giorni postoperatori, dare l&#39;analgesico ratto ogni 12 ore ed un antibiotico ogni 24 ore. Naturalmente, il regime post-operatorio di farmaci varia a seconda della marca e del marchio dei farmaci utilizzati da ciascun ricercatore (fare riferimento alle istruzioni specifiche di droga). </li><li> Monitorare gli animali spesso dopo la procedura per assicurarsi che essi recuperare da anestesia e solo poi tornare alla struttura alloggiativa. Fornire alloggi solitaria per i primi giorni dopo l&#39;intervento chirurgico per assicurarsi che non ci siano complicazioni. </li><li> Monitorare l&#39;acqua, l&#39;assunzione di cibo e il peso corporeo dopo l&#39;intervento chirurgico per assicurarsi che l&#39;animale non è nel dolore e angoscia. Se l&#39;animale mostra un livello di attività ridotta, difficoltà a muoversi (possibile guasto dell&#39;impianto), ataxiuna, pelliccia grassa trasandato, porfirina macchie intorno agli occhi e le narici, postura ingobbita, difficoltà respiratoria, ridotta assunzione di cibo e acqua, ecc consultare un veterinario. </li></ol> 5 Cambio di fissatore esterno Rigidità In vivo <ol><li> Se il protocollo di studio richiede il cambio di fissatore rigidità durante il processo di guarigione in vivo questo si ottiene modificando gli elementi di connessione protetta con le speciali viti autobloccanti con 0,5 millimetri di dialogo Chiave quadrata attaccato al trapano a mano. Per questa procedura, anestetizzare il ratto (vedere la 2.3 nel protocollo) e dare analgesia (fare riferimento alla 2.4 nel protocollo) una sola volta al momento della procedura (Figura 6A). <ol><li> Sedare il ratto, e poi inserire la punta della chiave scatola quadrata 0,50 millimetri nella vite di collegamento posta sul lato del fissatore assemblato, e iniziare con cautela ruotando in senso antiorario fino a quando il perno è a metà strada (figura 6B </strong&gt;). Dopo questa parte è completa, ripetere la procedura per il secondo perno che si trova sullo stesso lato della piastra fissatore esterno (figura 6C). </li><li> Quando entrambi i perni sullo stesso lato sono a metà strada fuori, utilizzare una pinza o una pinza per rimuovere l&#39;elemento di collegamento sul lato opposto con un movimento dolce (Figura 6D). L&#39;elemento di connessione deve staccarsi facilmente, se non esiste, quindi eseguire un ulteriore paio di giri su entrambe le viti ad incastro per assicurarsi che la punta della vite di blocco non è inserita nell&#39;elemento di collegamento. </li><li> Dopo l&#39;elemento di collegamento viene rimosso, far scorrere l&#39;elemento di collegamento rigidità desiderata al posto di quello rimosso (Figura 6E), e dal lato opposto utilizzando la chiave a tubo quadrato inizia a girare fino alla vite di collegamento è a metà strada sul lato opposto (Figura 6F). Ripetere la stessa procedura per la seconda vite ad incastro (Figura 6G). Importante: thsi richiederanno il passaggio verso il lato opposto della piastra per assicurarsi che entrambe le viti autobloccanti sono a metà strada sul lato dove l&#39;elemento di collegamento è stato sostituito (Figura 6H, I). </li><li> Dopo questa parte è completata con successo, rimuovere il secondo elemento di connessione (Figura 6J) e sostituirlo con lo stesso elemento di connessione rigidità come quella sostituita dalla parte opposta (Figura 6K). Dopo il secondo elemento di connessione è a posto, cominciare a guidare la vite incastro fino alla fine vite incastro esce dal lato opposto della piastra, e la punta della vite incastro è uscito lo stesso importo su ciascun lato (Figura 6L). Ripetere la stessa procedura per la seconda vite ad incastro (Figura 6 M, N). Questa procedura richiede circa 15 minuti per completare. </li></ol></li></ol>

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</ol>

L&#39;autore Romano Matthys è un dipendente di RISystem AG Davos, Svizzera, che produce gli impianti, gli strumenti specifici impianti e materiali di consumo utilizzati in questo articolo. L&#39;autore Vaida Glatt non ha interessi finanziari in competizione.

Le fasi più critiche di una procedura chirurgica per creare un grande difetto osseo sono: 1) la scelta del corretto peso corporeo del topo in base al formato del fissatore esterno; 2) il mantenimento di un ambiente sterile durante il procedimento; e 3) seguendo il protocollo procedura chirurgica. I principali obiettivi di questo studio erano di progettare, produrre e caratterizzare un nuovo, rigidezza variabile fissatore esterno per il ratto femorale modello grande difetto, e di utilizzare q...

Un certo numero di studi hanno migliorato la nostra comprensione dei meccanismi biologici coinvolti nella riparazione del tessuto osseo 1-6. Gli effetti di condizioni meccaniche sulla riparazione ossea, come assiale, taglio e movimenti interframmentarie (IFM) sono stati studiati approfonditamente 7-15. Negli ultimi anni, sempre più studi hanno cominciato ad emergere che descrive l&#39;influenza dell&#39;ambiente meccanica sulla guarigione ossea con fratture, osteotomia e grande difetto osseo segmentale in modelli in vivo. Pertanto, sono necessari metodi di fissazione affidabili per ottenere i risultati degli studi riproducibili e affidabili. L&#39;ambiente meccanico intorno alla guarigione della frattura è molto importante in quanto determina il modo in cui la frattura guarirà. Pertanto, la scelta del dispositivo di fissaggio è molto importante e devono essere accuratamente scelte a seconda del disegno dello studio, e di altri fattori quali la dimensione gap e il tipo di frattura. Proprietà meccaniche del dispositivo di fissaggio di unre ancora più importante quando si studia la guarigione ossea di grandi difetti ossei stabilire una fissazione che non solo fornisce una taglia gap costante per tutto il periodo dell&#39;esperimento di pieno carico, ma anche un ambiente meccanico ideale per la guarigione ossea. Fissatori esterni sono comunemente utilizzati in frattura e difetto osseo di guarigione modelli sperimentali grandi perché hanno un vantaggio rispetto agli altri dispositivi di fissaggio. Il vantaggio principale di fissatori esterni sono che consentono la variazione dell&#39;ambiente meccanica al sito del difetto in vivo senza un intervento secondario, che può essere ottenuto modificando o regolando la barra stabilità del dispositivo durante il corso dell&#39;esperimento come guarigione ossea progredisce. Inoltre, esso consente l&#39;applicazione di stimolazione meccanica locale specifica per migliorare la riparazione di ossa, e fornisce anche la possibilità di misurare la rigidità del tessuto callo in vivo. Tuttavia, i dispositivi hanno anche alcuni svantaggiche comprendono: irritazione dei tessuti molli, infezioni e pin rottura. Purtroppo, tali impianti non erano disponibili &quot;off the shelf&quot; al momento dello sviluppo dell&#39;impianto, e gli investigatori sono stati costretti a personalizzato progettare i propri fissatori per un determinato uso. Pertanto, un vincolo di ricerca in questo settore è stata la mancanza di controllo sperimentale sull&#39;ambiente meccanico locale all&#39;interno di un grande difetto segmentale e osteotomie come si guarisce. Le caratteristiche meccaniche di un fissatore esterno sono definite da, e possono essere modulate, un gran numero di variabili che include: la distanza tra i perni, diametro del perno, materiale perno, il numero di pin, fissatore lunghezza della barra, numero misura fissatore, materiale fissatore bar, spessore barra fissatore e la distanza dalla superficie dell&#39;osso alla barra fissatore (offset). Sorprendentemente, solo una scarsità di studi potrebbe essere trovato che hanno indagato i contributi meccaniche dei singoli componentidi fissatori o configurazioni interi fotogrammi utilizzati in studi su roditori 16,18,28. Per esempio, i risultati di uno studio hanno mostrato che uno dei principali fattori che contribuiscono a determinare la rigidezza complessiva del costrutto fissaggio è stato dominato dalla flessibilità dei perni in relazione alle loro offset, diametro e proprietà dei materiali 28. I risultati degli studi sopra menzionati indicano chiaramente che conoscere l&#39;ambiente meccanica fornita dal dispositivo di fissaggio è estremamente importante, ma, in molti casi non è indagato in dettaglio. Il presente articolo riporta la progettazione, le specifiche, e in vivo l&#39;impianto di un fissatore esterno che risolve questo problema. Questo fissatore consente anche la modulazione dell&#39;ambiente meccanica come la guarigione progredisce, una proprietà che consente lo studio della meccano-sensibilità delle diverse fasi del processo di guarigione in vivo. Inoltre, così come impone un meccanico locale controllato e riproducibileAl ambiente, la sua accessibilità permette anche la modulazione di questo ambiente a diversi stadi di guarigione ossea. Il fissatore abbiamo progettato era basata su fissazione esterna, che è ampiamente usato per la frattura fissazione 16-21 e modelli di grandi dimensioni difetto negli animali da esperimento 22-27. La differenza tra il fissatore esterno e gli altri disegni esistenti riportati in letteratura è che la loro barra stabilità è fissato con viti di avere una presa stretta con fili di Kirschner (K-fili). Questo tipo di progetto richiede viti per essere controllati ogni due settimane (a volte anche settimanale) per fare in modo che la distanza di offset viene mantenuto come il carico viene applicato attraverso cuscinetto di peso per evitare l&#39;allentamento della barra di stabilità. Se si verifica tale allentamento, permette una indesiderate condizioni di carico aggiuntive come angolare, trasversale e movimenti torsionali taglio alla guarigione ossea (sulla base di esperienze personali, la comunicazione con researchers). Sapendo questo, un fissatore esterno è stato progettato come tale che, quando la rigidità del fissatore deve essere cambiato, sarebbe essere raggiunto rimuovendo elementi di collegamento allegati al modulo principale in cui sono inserite i perni di montaggio. L&#39;esperimento pilota in vivo è stata effettuata con il nuovo prototipo fissatore esterno per assicurarsi che soddisfi tutte le esigenze proposte prima di essere prodotto in grandi quantità. L&#39;obiettivo principale di questo lavoro è quello di presentare un nuovo metodo chirurgico per un fissatore esterno utilizzato per i grandi difetti ossei e osteotomie nel ratto con la possibilità di cambiare la rigidità in vivo durante il processo di guarigione. Questo metodo di fissaggio viene applicato in vivo sul femori di topi.

<table><tbody><tr><td>RatExFix simple 100%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.120</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix simple 70%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.123</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix simple 40%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.121</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix simple 10%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.122</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Elemento di collegamento 100%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.130</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Elemento di connessione 70%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.131</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Elemento di connessione 40%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.132</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Elemento di connessione 10%</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.612.133</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Corpo</td> <td>principaleRISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.611.101</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Vite ad incastro</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.412.110</td><td></td></tr><tr><td>RatExFix Perno di montaggio 0,85 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.412.100</td><td></td></tr><tr><td>Guida per sega RatExFix 100% 5 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.312.100</td><td></td></tr><tr><td>Accu Pen 6V+</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.390.211</td><td></td></tr><tr><td>Trapano a mano</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.390.130</td><td></td></tr><tr><td>Punta da trapano 0,79 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.593.203</td><td></td></tr><tr><td>Sega a filo Gigly 0,22 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.590.100</td><td></td></tr><tr><td>Chiave a tubo quadrata 0,70 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.590.112</td><td></td></tr><tr><td>Scatola quadrata chiave 0,50 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.590.111</td><td></td></tr><tr><td>Punta di centraggio 1,00 mm</td><td>RISystem AG Davos, Svizzera</td><td>RIS.592.205</td><td></td></tr><tr><td>Bisturi Manico a lama</td><td>Strumenti</td><td></td><td></td></tr> per scienze fini <tr><td>Lama per bisturi (misura 15)</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pinze per tessuti</td><td>Strumenti per scienze</td><td></td><td></td>fini</tr><tr><td>Forbici</td><td>Strumenti per le</td><td></td><td></td>scienze fini</tr><tr><td>Divaricatore</td><td>Strumenti</td><td></td><td></td>per le scienze fini</tr><tr><td>Porta ago</td><td>Strumenti per le scienze</td><td></td><td></td>fini</tr><tr><td>Ascensore Henahan</td><td>Strumenti</td><td></td><td></td>per le scienze fini</tr><tr><td>Pinze per dissecazione e legatura curve a forma di S&nbsp;</td><td>Strumenti</td><td></td> Fine Science <td>2</td></tr><tr><td>Pinze per medicazione</td><td>Strumenti Fine Science</td><td></td><td>2</td></tr><tr><td>Telo fenestrato sterile</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per chirurgia</td></tr><tr><td>Garza sterile</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per chirurgia</td></tr><tr><td>Siringa da 5 ml&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>&nbsp; per l'irrigazione dell'ago difettoso</td></tr><tr><td>24-27G&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>&nbsp; per l'irrigazione di difetto</td></tr><tr><td>1 cc Siringhe da insulina&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per iniezioni di farmaci</td></tr><tr><td>soluzione fisiologica sterile&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per l'irrigazione dei difetti ossei</td></tr><tr><td>guanti sterili</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per eseguire interventi chirurgici</td></tr><tr><td>di cloroezamide</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>soluzione disinfettante per sito chirurgico</td></tr><tr><td>Sutura Vicryl 4-0 con SH-1</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per suturare il muscolo.</td></tr><tr><td>Sutura Ethibond 3-0&nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td></td><td>per suturare la pelle</td></tr><tr><td>Isofluorine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>per anestesia</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>analgesia durante e dopo l'intervento chirurgico</td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td>antibiotico durante e dopo l'intervento chirurgico</td></tr><tr><td>Ratti Sprague-Dawley o qualsiasi altro ceppo</td><td>Charles River Laboratories International, Inc. (Wilmington, MA USA)</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

rigidità regolabile, fissatore esterno per le rat femore osteotomia e segmentale bone difetto models

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

L&#39;ambiente meccanico intorno alla guarigione delle ossa rotte è molto importante in quanto determina il modo in cui la frattura guarirà. Negli ultimi dieci anni c&#39;è stato un grande interesse clinico nel migliorare la guarigione ossea alterando l&#39;ambiente meccanico attraverso la stabilità di fissazione intorno alla lesione. Un vincolo di ricerca sugli animali preclinica in questo settore è la mancanza di controllo sperimentale sull&#39;ambiente meccanico locale all&#39;interno di un grande difetto segmentale e osteotomie come guarire. In questo articolo riportiamo la progettazione e l&#39;uso di un fissatore esterno per studiare la guarigione di grandi difetti ossei segmentale o osteotomie. Questo dispositivo permette non solo per rigidezza assiale controllato sulla lesione ossea come si guarisce, ma consente anche la variazione di rigidezza durante il processo di guarigione in vivo. Gli esperimenti condotti hanno dimostrato che i fissatori sono stati in grado di mantenere una distanza difetto femorale 5 millimetri nei ratti in vivo durante la gabbia senza restrizioniattività per almeno 8 settimane. Allo stesso modo, abbiamo osservato nessuna distorsione o infezioni, incluse le infezioni PIN durante l&#39;intero periodo di guarigione. Questi risultati dimostrano che il nostro fissatore esterno di nuova concezione è stato in grado di stabilizzare riproducibile e standardizzata, e l&#39;alterazione dell&#39;ambiente meccanica di ratto in vivo di difetti ossei di grandi dimensioni e vari osteotomie dimensioni. Ciò conferma che il fissatore esterno è adatto per le indagini di ricerca preclinici usando un modello di ratto nel campo della rigenerazione e la riparazione ossea.

Caratteristiche del design Stabilizzazione del femore ratto con il fissatore esterno consente la creazione di osteotomie da 0,5 a 5 mm. Il sistema di fissatore esterno è un fissatore esterno bloccato in polietere etere chetone (PEEK - [il corpo principale]) e lega di titanio-alluminio-niobio (TAN - [i perni di montaggio]), che offre un design semplice, riproducibile e registrabile, ed è disponibile in quattro differenti rigidezze: 10, 40, 70 e 100% (100% essendo la norma, fissatore più rigido <...

Un vincolo della ricerca preclinica nel campo della riparazione ossea è la mancanza di controllo sperimentale sull'ambiente meccanico locale all'interno di una lesione ossea in via di guarigione. Riportiamo la progettazione e l'uso di un fissatore esterno per la riparazione ossea con la capacità di modificare la rigidità del fissatore in vivo.

Rigidità regolabile, fissatore esterno per le Rat Femore osteotomia e segmentale Bone Difetto Models

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

L'obiettivo generale di questa procedura è eseguire un intervento chirurgico per creare un difetto osseo di grandi dimensioni, al fine di studiare nuovi trattamenti per la rigenerazione e la riparazione ossea. Questo viene realizzato innanzitutto impiantando un fissatore esterno sul femore di un ratto. Successivamente, si utilizza un filo flessibile per creare un difetto osseo segmentale di cinque millimetri.Successivamente, un trattamento come la proteina morfogenetica dell'osso due viene somministrato su un'impalcatura per potenziare la guarigione ossea. Infine, la rigidità in vivo nel punto temporale selezionato viene modificata. In definitiva, si possono ottenere risultati che mostrano il progresso della rigenerazione ossea con terapie farmacologiche e l'influenza dell'ambiente meccanico locale sull'esito della guarigione mediante analisi in vivo, radiografiche e micro-TC, nonché attraverso istologia, test biomeccanici e valutazione molecolare al termine dello studio.Il principale vantaggio di questa tecnica rispetto ai dispositivi di fissazione esterna esistenti è che è disponibile in commercio ed è un sistema standardizzato ad angolo auto-bloccante o stabile, in cui le viti sono incorporate in una piastra, mentre altri design presenti in letteratura prevedono una piastra fissata con viti per ottenere un gruppo stretto con fili RSNA, il che rende questo tipo di design soggetto a allentamento e richiede il riannodamento delle viti ogni due settimane. Inoltre, è leggero, di piccole dimensioni e realizzato in PEAK, il che consente l'uso di immagini radiologiche in vivo. E, ultimo ma non meno importante, il design permette la regolazione in vivo della rigidità della fissazione dopo aver anestetizzato un ratto con isoflurano, verificato il livello di sedazione, somministrato antibiotico e analgesico, e rasato e pulito l'intera zampa posteriore destra.Secondo il protocollo descritto, utilizzare un bisturi per effettuare un'incisione approssimativa sulla superficie del femore destro, in senso cranio-laterale attraverso la cute, da tre a quattro centimetri dal trocantere maggiore fino alla regione sopracondilea del ginocchio, con una dissezione delicata. Separare la fascia lata e, senza recidere il tessuto muscolare, esporre il diafisi del femore; quindi allargare i muscoli vasto laterale e i muscoli bicipiti femorali e sollevare il muscolo tensore della fascia per esporre l'intera lunghezza del femore, al fine di liberare il tessuto muscolare dal femore prima dell'osteotomia. Posizionare un sollevatore di Hohmann perpendicolarmente alla superficie esposta del femore, quindi, utilizzando un bisturi, staccare il muscolo nella zona adiacente e continuare ad avanzare attorno al femore, mantenendosi vicini all'osso fino a quando tutto il tessuto muscolare circostante non è stato completamente liberato lungo tutta la porzione mediale dell'osso.Per creare un difetto osseo di cinque millimetri, utilizzare due pezzi di filo flessibile per segare attorno all'osso in un'orientazione mediale. Successivamente, posizionare un pezzo sul lato distale del femore, vicino all'articolazione del ginocchio, e un secondo pezzo sul lato prossimale, vicino all'articolazione dell'anca. Quindi, utilizzando una pinza a curva ad S, praticare una dissezione e applicare una legatura.Tagliare il pezzo di filo flessibile su ciascun lato in modo che rimanga fermo dopo aver ruotato esternamente il femore; posizionare quindi la piastra del fissatore esterno sulla superficie anterolaterale dell'osso. In questa posizione, lo strato di tessuto molle è al suo minimo spessore, prevenendo così una tensione eccessiva del tessuto molle sotto la piastra del fissatore. Dopo aver chiuso la ferita, sollevare leggermente la piastra del fissatore esterno dalla superficie ossea per assicurarsi che i fori della piastra siano centrati rispetto alla superficie dell'osso.Per evitare che la punta del trapano scivoli, utilizzare il contromandrinatore da 1,00 millimetro per centrare la posizione del primo foro creando una piccola incisione. Utilizzare una piccola morsetta per mantenere il fissatore esterno parallelo all'asse longitudinale dell'osso e, con un trapano elettrico dotato di una punta da 0,79 millimetri, posizionare la punta centrata nella piccola incisione precedentemente creata sulla superficie ossea. Praticare il primo foro sul lato prossimale del femore, quindi inserire la punta del contromandrinatore in uno dei fori della piastra del fissatore. Se la punta del contrappeso entra facilmente nel foro, allora questo è il lato superiore del fissatore. Se non entra, capovolgere la piastra del fissatore per assicurarsi che i fori più grandi della piastra siano orientati verso l'alto. Dopo aver confermato l'orientamento, fissare la piastra sulla guida per sega e quindi agganciare l'unità sull'osso in modo che il primo foro preforato sia allineato con il primo foro della piastra.Utilizzare la chiave a bussola quadrata da 0,70 millimetri inserita nel trapano manuale per inserire il primo perno di montaggio nel foro. Questa operazione permetterà un posizionamento riproducibile dei perni di montaggio rimanenti non appena la punta del perno di montaggio entrerà in contatto con l'osso. Iniziare a ruotare la chiave applicando un carico assiale continuo all'estremità prossimale del trapano manuale.Dopo circa cinque giri completi, assicurarsi che il filetto all'estremità prossimale del perno di montaggio agganci il corpo della piastra del fissatore esterno. Questo filetto blocca il sistema. Arrestare la rotazione quando l'estremità del filetto osseo è vicina alla superficie superiore dell'osso.Dopo aver posizionato il primo perno di montaggio, inserire il contromandrino da 1,0 millimetro nel trapano manuale e farlo passare attraverso il foro più distante finché la punta non entra in contatto con l'osso. Quindi iniziare a ruotare il contromandrino applicando un carico assiale continuo all'estremità prossimale del fermo del trapano manuale. Dopo due o tre giri completi, questa scanalatura appena creata impedisce al trapano da 0,79 millimetri di scivolare via.Quindi praticare il foro più lontano dal primo perno di fissaggio sul lato distale. Inserire la chiave a bussola quadrata da 0,70 millimetri nel trapano elettrico, quindi inserire il perno di fissaggio nella punta. Inserire con attenzione la punta nella piastra del fissatore esterno senza perdere l'allineamento del secondo foro preforato.Dopo aver posizionato i perni alle due estremità, eseguire la svasatura e la preforatura dei due fori centrali rimanenti. L'ordine di impianto dei due perni centrali non è importante. Dopo che il fissatore esterno è stato posizionato oltre 0,22 millimetri.Utilizzando un segaccio oscillante, tagliare uno per volta lungo le due scanalature al di sotto del femore e, mentre si dispensa soluzione salina sul osso, creare un difetto segmentale di cinque millimetri mediante movimenti reciproci avanti e indietro. Rimuovere quindi la guida del segaccio dopo aver realizzato il difetto o l'osteotomia. Applicare un trattamento, come la proteina morfogenetica ossea umana ricombinante due, su una spugna di collagene assorbibile.Quindi utilizzare il filo di sutura Hybo Vicryl 0 per chiudere lo strato muscolare e la fascia lata e il filo di sutura Ethicon Monocryl 3-0 per chiudere la cute al fine di modificare la rigidità del fissatore esterno in vivo. Dopo aver sedato il ratto e somministrato l'analgesia secondo il protocollo descritto nel testo, inserire la punta della chiave quadra da 0,50 millimetri nel vite di bloccaggio fissata al lato del fissatore assemblato. E ruotarla con attenzione in senso antiorario fino a quando il perno non sarà uscito per metà.Ripetere la procedura per il secondo perno sullo stesso lato della piastra del fissatore esterno. Quando entrambi i perni sullo stesso lato sono usciti per metà, utilizzare pinze o una molletta ed esercitare un movimento delicato per rimuovere l'elemento di connessione sul lato opposto. Se non dovesse staccarsi facilmente, ruotare ulteriormente le viti di qualche giro ciascuna.Dopo aver rimosso l'elemento di connessione, inserire al suo posto l'elemento di connessione con la rigidità desiderata dall'altro lato. Utilizzando la chiave a tubo quadrata, ruotare finché la vite di bloccaggio non è uscita a metà sull'altro lato. Ripetere l'operazione per la seconda vite.Rimuovere il secondo elemento di collegamento e sostituirlo con un elemento di collegamento della stessa rigidità di quello sostituito sul lato opposto. Quindi avvitare la vite autobloccante fino a quando sporge di una distanza simile su ciascun lato. Ripetere l'operazione per la seconda vite.L'esame radiologico ha confermato che i fissatori di tutte le rigidità hanno mantenuto una distanza di un millimetro o di cinque millimetri dal difetto orale per l'intero periodo di otto settimane dell'esperimento, come dimostrato qui. Ciò è stato particolarmente importante per i difetti di dimensione critica di cinque millimetri, nei quali non si verifica una guarigione spontanea. Nessuna infezione, comprese le infezioni da pin, è stata osservata e non si è verificato allentamento dei pin se sono state seguite le istruzioni per l'applicazione.Se il peso del ratto al momento dell'intervento chirurgico superava i 250 grammi e veniva utilizzata una piastra di dimensioni più piccole, il carico sui perni di montaggio aumentava fino a livelli critici, provocando il distacco di uno o due perni a distanza di una-due settimane dall'intervento, solitamente sul lato distale del femore. Come mostrato qui, gli animali di maggiori dimensioni presentano anche un tessuto muscolare più spesso, che genera tensione sulla pelle intorno all'impianto dopo la chiusura. Ciò provoca prurito e ha portato alcuni ratti a mordere il fissatore, confermando l'importanza di scegliere un animale del peso appropriato rispetto al fissatore esterno selezionato.Seguendo questa procedura, altri metodi, come osteotomie di dimensioni diverse comprese tra 0,3 e tre millimetri nel topo e fino a sei millimetri nel ratto, possono essere eseguiti per rispondere ad ulteriori quesiti, ad esempio studiando nuove terapie farmacologiche per migliorare la guarigione ossea.

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Vi presentiamo un modello di osteogenesi di distrazione tibial del topo sviluppato utilizzando un distrattore su misura. L'uso di un mouse come un obiettivo di analisi è vantaggioso per far progredire la ricerca.

Un modello di osteogenesi di distrazione del topo

Modelli di mammiferi in vivo di difetti ossei critici dimensioni sono essenziali per i ricercatori che studiano i meccanismi di guarigione e terapie ortopediche. Qui, presentiamo un protocollo per la creazione di difetti riproducibile, segmentale, femorale in ratti stabilizzati con fissatore esterno.

Un modello affidabile e riproducibile critiche medie femorale difetto segmentale in ratti stabilizzato con un Fixator esterno personalizzato

Qui, presentiamo un protocollo per descrivere una tecnica minimamente invasiva per l'immobilizzazione dell'articolazione del ginocchio in un modello di ratto. Questo protocollo riproducibile, basato sul modus di separazione muscolo-gap e sull'abilità mini-incisione, è adatto per studiare il meccanismo molecolare sottostante della contrattura articolare acquisita.

Una tecnica di fissazione interna mini-invasiva per studiare la contrattura di flessione del ginocchio indotta dall'immobilizzazione nei ratti

Qui, presentiamo un protocollo per fratturare iatrogenicamente l'asta del femore dei ratti albini Wistar e seguire lo sviluppo del callo. Questo modello di osteotomia del femore può aiutare i ricercatori a valutare il processo di guarigione delle fratture e a studiare come un farmaco potrebbe influenzare la guarigione delle fratture.

Protocollo per lo sviluppo di un modello di osteotomia femorale in ratti albini Wistar

Questa procedura dimostra il trasporto trasversale della corteccia tibiale nei ratti, permettendo la visualizzazione e l'analisi della rivascolarizzazione durante l'ischemia dell'arto.

Un modello ratto di trasporto trasversale della corteccia tibiale per il trattamento dell'ischemia dell'arto inferiore

Questo studio ha stabilito un modello di difetto semisegmentale femorale nel ratto per valutare le prestazioni meccaniche e osteogeniche dei materiali sostitutivi ossei in condizioni portanti, senza l'uso di fissazioni interne o esterne.

Modello di difetto osseo diafisario semi-segmentale nei ratti per la valutazione delle prestazioni di sostituto osseo nelle regioni portanti

Lo studio combina in modo innovativo suture e aghi di titanio per una fissazione interna stabile in un modello di frattura radiale del ratto. La guarigione della frattura è stata valutata tramite micro-tomografia computerizzata (micro-CT) e i neuroni ganglionali della radice dorsale primaria (DRG) sono stati isolati e coltivati per ulteriori indagini.

Sviluppo di un nuovo modello di fissazione interna per le fratture radiali dei ratti: valutazione della guarigione delle fratture e isolamento dei ganglioni della radice dorsale

Impara l'osteotomia del femore di ratto con fissatore esterno a rigidità regolabile per modelli di difetto osseo segmentale. Questo metodo standardizzato consente di studiare la rigenerazione ossea e l'influenza dell'ambiente meccanico sulla guarigione in vivo.

Rigidità regolabile, fissatore esterno per le Rat Femore osteotomia e segmentale Bone Difetto Models

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