Sintesi e purificazione di Iodoaziridines Coinvolgere quantitativa Selezione del Ottimale fase stazionaria per cromatografia

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di preparare e purificare un iodio terminale. Ciò si ottiene generando prima di ito metillitio mediante deprotonazione di dito metano a bassa temperatura e reagendo con un sistema immunitario. Il secondo passo consiste nel riscaldare rapidamente la miscela di reazione per favorire la ciclizzazione dell'intermedio di ioduro al prodotto iodico uridina desiderato.

Successivamente, viene valutata la stabilità del prodotto a base di ioto uridina alle varie fasi stazionarie utilizzate per la cromatografia per determinare la più appropriata per la purificazione. Il passaggio finale consiste nel purificare lo iodio e nell'eseguire l'analisi NMR del protone. In definitiva, questo screening delle fasi stazionarie per cromatografia viene utilizzato per dimostrare che l'Illumina di base modificato all'attività quattro è il più appropriato per la purificazione dell'odina IDO.

Abbiamo avuto l'idea di questo metodo per la prima volta quando abbiamo scoperto che i nuovi prodotti a base di iodio IDO erano instabili alla cromatografia su gel di silice e avevamo bisogno di una purificazione alternativa. Da qui, abbiamo progettato una procedura per valutare la stabilità dell'IO odina per organizzare le fasi stazionarie per la cromatografia, che può essere applicata anche ad altri composti potenzialmente sensibili. A dimostrare questa procedura sarà Tom e Dom, entrambi studenti di dottorato nel mio gruppo di ricerca.

Prima fiamma a secco, un pallone a fondo tondo da 100 millilitri contenente un'ancoretta e dotato di un setto sotto un getto di argonne. Dopo aver lasciato raffreddare il pallone a temperatura ambiente, aggiungere 5,7 millilitri di tetraedro anidro e 2,7 millilitri di etere etilico anidro tramite siringa e 315 microlitri di esail dilano appena distillato tramite una micro siringa. Posizionare il pallone in un pallone di dimensioni adeguate che ne permetta una buona immersione.

Dopo aver iniziato l'agitazione, aggiungere ghiaccio secco e acetone all'esecutore per raffreddare la soluzione a meno 78 gradi Celsius. Quindi coprire l'esecutore con un foglio di alluminio per ridurre al minimo l'esposizione del recipiente di reazione. Alla luce successiva aggiungere 0,6 millilitri di 2,5 molari e butile litio in esani goccia a goccia tramite siringa nell'arco di due o tre minuti.

Dopo aver lasciato mescolare il composto a meno 78 gradi Celsius per 30 minuti. Per formare la soluzione di litio esail etildiano, aggiungere un millilitro di terah idro ferran anidro a un pallone a fondo tondo da 10 millilitri essiccato alla fiamma tramite siringa. Quindi aggiungere 135 microlitri di metano ITOM tramite una micro siringa e agitare delicatamente il pallone per assicurarsi che la soluzione sia ben miscelata.

Quindi, aggiungere la soluzione di metano ITOM goccia a goccia per due minuti alla soluzione di litio esail dilano di litio a meno 78 gradi Celsius, lasciando agitare la soluzione per 20 minuti. Pesare 135 milligrammi di amina in un altro pallone a fondo tondo da 10 millilitri essiccato alla fiamma e scioglierlo in due millilitri di tetra hydro ferran anidro. Dopo i 20 minuti di deprotonazione, aggiungere la soluzione immunitaria goccia per goccia alla soluzione di di ito metil litio per cinque minuti a meno 78 gradi Celsius.

Subito dopo aver completato l'edizione dropwise, sollevare il recipiente di reazione dal bagno di ghiaccio secco. Recuperare il pallone con un foglio di alluminio e trasferirlo in un bagno di acqua ghiacciata a zero gradi Celsius. Mescolare la soluzione per 15 minuti a zero gradi Celsius.

Successivamente, spegnere la reazione aggiungendo 30 millilitri di soluzione acquosa di bicarbonato di sodio saturo. Trasferire il composto in un imbuto separatore e aggiungere 30 millilitri di clorometano. Agitare il composto, sfiatare l'imbuto e rimuovere lo strato organico inferiore.

Dopo aver ripetuto l'estrazione due volte, aggiungere solfato di sodio agli strati organici combinati per rimuovere l'acqua presente nella soluzione. Quindi filtrare il solfato di sodio sotto filtrazione sotto vuoto utilizzando un imbuto di vetro con tappo di cotone, raccogliendo il filtrato in un pallone a fondo tondo da 250 millilitri, rimuovere il solvente a pressione ridotta su un evaporatore rotante. Per fornire un campione impuro del prodotto ITO uridina desiderato.

Aggiungere 1 3 5 TRIMETH ossibenzene come standard interno al mangime grezzo e sciogliere il campione di mangime grezzo in clorometano. Assicurandosi che questo sia completamente sciolto. Prelevare un'aliquota da questa miscela, quindi rimuovere il solvente a pressione ridotta.

Al termine, analizzare il campione mediante spettroscopia NMR protonica. Dopo l'analisi NMR, aprire lo spettro NMR del protone registrato utilizzando un software di elaborazione NMR standard come mast nova. Fare clic con il pulsante destro del mouse sullo spettro e scegliere integrazione.

Quindi scegli manuale per fornire lo strumento di integrazione. Fare clic e trascinare per coprire l'ampiezza dei picchi a 6,08 PP m e 4,87 PP M per integrare rispettivamente i segnali dello standard interno e del segnale CHI aine. Fare clic con il pulsante destro del mouse sull'integrale per il picco a 6,08 PP m, selezionare modifica integrale e modificare il valore normalizzato a 3,0.

Quindi, utilizzare il valore integrale aggiornato per il segnale CHI dello iodio per determinare la resa dello iodio I OTO. Una volta completata l'analisi NMR, mescolare 25 grammi delle seguenti fasi stazionarie con 50 millilitri di esano di acetato di etile al 5% in sei flaconi conici separati da 250 millilitri contenenti ancorette in palloni conici. Preparare una soluzione da 50 millilitri, un esagono di acetato di etile al 5% da utilizzare come controllo.

Quindi mescolare i fanghi su una piastra di agitazione magnetica. Aggiungere due aliquote di millilitri della soluzione standard interna I OTO Azarin a ciascuna delle matracce coniche a temperatura ambiente. Quindi mescolare le miscele di liquame per 30 minuti.

Dopo 30 minuti, filtrare ciascuna delle miscele di liquame sotto vuoto utilizzando un imbuto centrato, raccogliendo ciascun filtrato in un pallone a fondo tondo da 250 millilitri. Lavare due volte il residuo nell'imbuto centrato con 30 millilitri di clorometano. Rimuovere il solvente dai campioni risultanti utilizzando un evaporatore rotante.

Successivamente, analizzare i campioni mediante spettroscopia NMR protonica per calcolare la quantità di iota odina recuperata in ciascun caso. Come descritto in precedenza, registrare le rese nel quaderno di laboratorio. Confrontare le rese di I OTO Aine ottenute da ciascuna fase stazionaria testata con quelle ottenute in precedenza per determinare il campione che dà la resa più elevata.

Successivamente, ripetere la sintesi precedentemente descritta per generare la miscela di iodio IO grezzo per generare l'attività di base di Illumina. Quattro, aggiungere 100 grammi di attività Illumina di base, uno a un pallone a fondo tondo da 500 millilitri, quindi aggiungere 10 millilitri di acqua al pallone. Dopo aver montato il pallone con un tappo di vetro, agitarlo energicamente fino a quando non sono visibili grumi, indicando una diffusione uniforme dell'acqua in tutta l'Illumina.

Una volta che Illumina si è raffreddato a temperatura ambiente, purificare lo iodio IO grezzo mediante cromatografia su colonna utilizzando l'attività quattro di base di Illumina. Come fase stazionaria, eluire con la gradazione dell'esano al 5% di taxano di acetato YL. Unire il prodotto contenente frazioni in un matraccio a fondo tondo e rimuovere il solvente utilizzando un evaporatore rotante per ottenere lo iodiodio puro.

Prima della purificazione, una resa del 59% di Ioto a iodio è stata calcolata mediante NMR protonica. Tuttavia, questo iodio è stato difficile da purificare e ha subito una decomposizione significativa mediante purificazione con silice su Illumina di base. La quarta attività ha permesso al prodotto di ottenere un rendimento del 48%.

L'analisi NMR dei protoni ha fornito una serie di rendimenti per le fasi stazionarie rispetto all'attività di base standard interna di Illumina, quattro hanno offerto la resa più alta del 53%, che è la più vicina alla resa NMR. Pertanto, per la fine è stata scelta l'attività di base di Illumina quattro. Toal iota era la purificazione redenta IR.

È possibile accedere a un'ampia selezione di aines ITO ad alta resa. Sia l'alcol che le ammine aromatiche e toali sono compatibili con la reazione, tra cui la torretta e l'orto istericamente esigenti. Ad esempio, si propone che la reazione avvenga per deprotonazione, seguita dall'edizione nucleofila.

Per dare all'amminogemma di ioduro un riscaldamento successivo induce una ciclizzazione stereoselettiva altamente DIA che favorisce lo iodio cis. A causa delle sottili interazioni steriche nello stato di transizione della ciclizzazione durante l'ottimizzazione della reazione, il controllo della temperatura e la tempistica erano essenziali per il risultato della reazione. Estinguere la reazione senza riscaldamento ha permesso l'estremità toal IO iodio e l'amge di ioduro.

Tuttavia, i prodotti subiscono una degradazione nelle condizioni di reazione, che viene evitata riscaldando la reazione e riducendo i tempi di reazione. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come sintetizzare il prodotto IO iridio e valutarne la stabilità in un'ampia gamma di fasi stazionarie per la purificazione mediante cromatografia. Non dimenticare che lavorare con il litio mbu può essere estremamente pericoloso e precauzioni come lavorare in un'atmosfera di noci e spegnere in sicurezza l'accesso.

Il reagente deve essere sempre assunto durante l'esecuzione di questa procedura.