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DOI: 10.3791/51757-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Qui descriviamo la nostra strategia per ottenere registrazioni stabili e ben isolate di singole unità da interneuroni inibitori identificati nella corteccia del topo anestetizzata. I neuroni che esprimono ChR2 sono identificati dalla loro risposta alla luce blu. Il metodo utilizza apparecchiature di registrazione extracellulare standard e rappresenta un'alternativa economica all'imaging del calcio o al patching guidato visivamente.
L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di ottenere registrazioni di singole unità extracellulari di alta qualità da interneuroni corticali in topi che esprimono la radice del canale due. Ciò si ottiene facendo avanzare un elettrodo di registrazione ad alta impedenza attraverso il tessuto per identificare gli interneuroni dalle risposte di picco agli impulsi di luce blu. Il segnale elettrico viene monitorato per rilevare eventuali variazioni che indicano la velocità di avanzamento appropriata e la probabilità di ottenere una registrazione stabile e ben isolata.
Se non è possibile ottenere un buon isolamento di una singola unità o, al contrario, si incontrano raramente neuroni sensibili alla luce, sostituire l'elettrodo di registrazione. I risultati mostrano l'affidabilità della luce che evoca risposte da neuroni identificati otticamente e il tipico rapporto segnale/rumore ottenuto con questa strategia. L'approccio della fotostimolazione è un modo accessibile ed economico per indirizzare tipi di cellule geneticamente identificati utilizzando un amplificatore extracellulare standard e la luce blu.
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