Un modello Novel di Mild Traumatic Brain Injury per ratti giovani

L'obiettivo generale di questa procedura è generare una lieve lesione cerebrale traumatica nei ratti giovani. Ciò si ottiene preparando prima la piattaforma di induzione delle lesioni. Successivamente, un ratto anestetizzato viene posizionato a faccia in giù sulla carta stagnola segnata.

Una volta in posizione, viene lasciato cadere un peso per generare un colpo di striscio alla testa. L'animale viene quindi posto in posizione supina e viene registrato il tempo necessario per scrivere se stesso. Il giorno seguente le prestazioni vengono misurate nel walking beam test.

Quindi il principale vantaggio di questa tecnica rispetto ad altre è che gli animali vengono anestetizzati solo brevemente. Si tratta di un trauma cranico chiuso, che ci consente di ripetere più volte la lesione nello stesso animale, e c'è una componente rotazionale nella lesione che è più rilevante dal punto di vista clinico. Le implicazioni di questa tecnica si estendono verso la terapia della commozione cerebrale pediatrica e della lesione cerebrale traumatica lieve perché il modello induce una sintomatologia clinicamente rilevante in modo eterogeneo, dimostrando la procedura saranno Irene Ma, un tecnico del nostro laboratorio e harlene haha.

In studente universitario nel nostro laboratorio. Per allestire l'apparato per lesioni cerebrali traumatiche lievi, costruisci un palco a forma di U in plastica trasparente. Posiziona una spugna nella parte inferiore del palco per raccogliere l'animale dopo che è caduto.

Quindi, incidi un pezzo di carta stagnola con una lama di rasoio affilata. Assicurarsi che la carta stagnola incisa sostenga il peso corporeo del ratto, ma non interferisca con l'accelerazione dopo l'impatto. Fissare la carta stagnola incisa sulla parte superiore del tavolino in modo che sia tau e posizionarla nella posizione corretta sotto il tubo guida.

Posizionare il tubo guida in modo che si trovi a 3,5 centimetri sopra la carta stagnola. Quindi, attacca la lenza alla parte superiore di un peso. Posiziona il peso all'interno del tubo guida e fissa la linea in modo che il peso penda a 2,5 centimetri sopra la lamina.

Questa altezza impedisce al ratto di ricevere più colpi in modo sicuro. Fissare la lenza al clamp supporto. Tirare il peso verso l'alto attraverso il tubo guida in plastica con la lenza e tenerlo in posizione con un perno a brugola posizionato ad un'altezza di 0,5 metri.

Per iniziare, confermare la profondità della sedazione in un ratto anestetizzato e posizionare rapidamente il torace del ratto sulla pellicola con la testa direttamente nel percorso del peso in caduta. Quando sei pronto per iniziare, tira il perno della chiave a brugola per consentire al peso di cadere verticalmente attraverso il tubo guida in plastica. Una volta colpito, il ratto subirà rapidamente una rotazione di 180 gradi e atterrerà in posizione supina.

Rimuovere immediatamente il ratto dalla spugna di raccolta e applicare la lidocaina topica sulla testa del ratto con un applicatore con punta di cotone. Quindi, metti il ratto in posizione supina in una gabbia pulita e riscaldata. Osserva l'animale fino a quando non si sveglia dall'anestetico e passa dalla posizione supina a quella prona.

Registra questo come il momento di scrivere il valore per il finto gruppo di controllo infortunato. Anestetizzare l'animale e posizionarlo sul palco come dimostrato in precedenza. Quindi, rimuovi il ratto dalla carta stagnola senza tirare il perno della chiave a brugola e applica la lidocaina topica sulla testa.

Metti il ratto in posizione supina in una gabbia pulita e riscaldata e registra il tempo per scrivere il valore. Infine, riporta il ratto nella sua gabbia di casa dopo che ha recuperato il comportamento normale e ripeti con il prossimo animale di controllo. 24 ore dopo l'induzione della lesione cerebrale, riportare gli animali nella sala operatoria.

Trasferisci i ratti in una gabbia di contenimento pulita e posiziona la gabbia domestica del topo. All'estremità più stretta di una faccia della trave rastremata, la parte aperta della gabbia verso l'estremità larga della trave. La trave affusolata ha una piattaforma centrale con piccole sporgenze che garantiscono la sicurezza.

Posiziona una videocamera all'estremità larga del fascio e regola la messa a fuoco fino a quando l'intera lunghezza è visibile. Quando è pronto, posiziona il ratto all'estremità larga della trave affusolata e incoraggialo a camminare attraverso la trave verso la sua gabbia di casa. Una volta che il ratto attraversa la trave ed entra nella gabbia di casa, lascialo riposare per almeno 60 secondi.

Per rafforzare la posizione target, questa è la prova numero uno e non è inclusa nell'analisi. Quindi, accendi la videocamera e consenti al topo di completare l'attività di camminata del raggio per ulteriori volte, mantenendo i 62 ° periodi di rinforzo nella gabbia domestica. Una volta che il topo ha completato tutte le prove, rimettilo nella gabbia di casa e testa l'animale successivo.

Se l'animale cade dalla trave durante il test, raccoglierlo immediatamente e riposizionarlo sulla trave nel punto da cui è caduto. Per assegnare un punteggio ai dati. Dopo il test, registrare il numero di scivolamenti del piede della zampa posteriore e il tempo totale per attraversare la trave per ogni singola prova.

Utilizzare questi dati per calcolare i valori medi per ogni animale e gruppo di test. Questo grafico confronta le differenze medie nel tempo di scrittura dei punteggi tra i ratti giovani che hanno subito una singola lesione cerebrale rispetto ai controlli fittizi. I ratti feriti hanno mostrato un aumento significativo della durata del tempo necessario per scrivere se stessi dalla posizione supina.

Qui, viene mostrato il numero medio di scivolamenti del piede della zampa posteriore durante l'attività di camminata su trave per i ratti giovani che hanno subito una singola lesione. Rispetto ai ratti finti feriti, gli animali feriti hanno mostrato significativamente più scivolamenti delle zampe attraverso la trave rispetto ai controlli che seguivano questa procedura. Altri interventi non invasivi, come la terapia del gioco, possono quindi essere esplorati per determinare se tali interventi sono effettivamente in grado di migliorare alcuni dei deficit sociali che i bambini sperimentano in seguito. Commozione cerebrale.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come indurre e rilevare in sicurezza una lieve lesione cerebrale traumatica nei giovani roditori. Questo può essere ripetuto in più punti temporali.