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Immunology and Infection
Preparazione di un Sangue cultura pellet per il Rapid batterica identificazione e test di sensibi...
Preparazione di un Sangue cultura pellet per il Rapid batterica identificazione e test di sensibi...
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Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Preparation of a Blood Culture Pellet for Rapid Bacterial Identification and Antibiotic Susceptibility Testing

Preparazione di un Sangue cultura pellet per il Rapid batterica identificazione e test di sensibilità agli antibiotici

Full Text
36,702 Views
11:25 min
October 15, 2014

DOI: 10.3791/51985-v

Antony Croxatto1, Guy Prod'hom1, Christian Durussel1, Gilbert Greub1

1Institute of Microbiology,University Hospital Center and University of Lausanne

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This procedure outlines the preparation of a bacterial pellet from a positive blood culture for various diagnostic applications. The process involves mixing the culture with sterile water, followed by centrifugation and resuspension in ammonium chloride to lyse red blood cells.

Key Study Components

Area of Science

  • Microbiology
  • Clinical diagnostics
  • Infectious diseases

Background

  • Bloodstream infections can be life-threatening and require rapid diagnosis.
  • Traditional methods may delay treatment, impacting patient outcomes.
  • Rapid identification of pathogens is crucial for effective therapy.
  • MALDI-TOF and PCR are advanced techniques for bacterial identification.

Purpose of Study

  • To develop a rapid method for preparing bacterial pellets from positive blood cultures.
  • To facilitate quick identification and susceptibility testing of bacteria.
  • To improve communication of results to clinicians for better patient management.

Methods Used

  • Mixing positive blood culture with sterile water.
  • Centrifugation to separate bacterial cells.
  • Resuspension in ammonium chloride to lyse red blood cells.
  • Final resuspension in water for further testing.

Main Results

  • The bacterial pellet can be used for MALDI-TOF identification.
  • Gram staining and antibiotic susceptibility testing can be performed.
  • PCR-based tests can be conducted using the prepared pellet.
  • Results can be communicated rapidly to clinicians.

Conclusions

  • This method allows for efficient preparation of bacterial samples.
  • Rapid identification and testing can significantly improve patient outcomes.
  • Streamlined processes enhance clinical decision-making in infections.

Frequently Asked Questions

What is the significance of preparing a bacterial pellet?
Preparing a bacterial pellet allows for rapid identification and testing of pathogens in bloodstream infections, which is crucial for timely treatment.
How does MALDI-TOF work in bacterial identification?
MALDI-TOF uses laser technology to analyze the protein profile of bacteria, allowing for quick and accurate identification.
What role does ammonium chloride play in the process?
Ammonium chloride is used to lyse red blood cells, facilitating the isolation of bacterial cells from the blood culture.
Can this method be used for all types of bacteria?
Yes, this method is applicable for various bacterial pathogens found in positive blood cultures.
How quickly can results be communicated to clinicians?
Results can be communicated rapidly, often within hours, improving patient management.

Una rapida preparazione pellet batterico da una emocoltura positiva può essere utilizzato come campione per le applicazioni quali l'identificazione mediante MALDI-TOF, colorazione di Gram, test di sensibilità agli antibiotici e test di PCR-based. I risultati possono essere tempestivamente ai medici di migliorare la prognosi dei pazienti affetti da infezioni del sangue.

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di preparare un pellet batterico da una coltura di sangue positiva che può essere utilizzato come campione per varie applicazioni. Ciò si ottiene mescolando prima un'emocoltura positiva con acqua sterile dopo la centrifugazione. Il pellet viene risospeso in cloruro di ammonio per eliminare i globuli rossi dopo un secondo ciclo di centrifugazione.

Il pellet viene risospeso in acqua. Il passaggio finale consiste nell'utilizzare il pellet ottenuto per l'identificazione batterica mediante ionizzazione a desorbimento laser assistito da matrice, tempo di volo, colorazione di Gram, test di suscettibilità agli antibiotici e/o test basati sulla PCR. In definitiva, i risultati acquisiti possono essere rapidamente comunicati ai medici per migliorare l'esito dei pazienti affetti da infezioni del flusso sanguigno.

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Immunologia Issue 92 emocoltura batteriologia l'identificazione test di sensibilità agli antibiotici MALDI-TOF MS.

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