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Whole-mount Imaging di embrione di topo Sensory Axon Proiezioni
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JoVE Journal Neuroscience
Whole-mount Imaging of Mouse Embryo Sensory Axon Projections

Whole-mount Imaging di embrione di topo Sensory Axon Proiezioni

Full Text
10,507 Views
08:37 min
December 9, 2014

DOI: 10.3791/52212-v

Kevin J. O’Donovan1, Catherine O’Keeffe1, Jian Zhong1

1Brain and Mind Research Institute, Burke Medical Research Institute,Weill Medical College of Cornell University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Presentiamo qui un protocollo ottimizzato per genotipizzare, colorare e preparare topi fetali per l'imaging di proiezioni di assoni nocicettori periferici nell'intero animale, come metodo efficace per valutare i fenotipi di crescita degli assoni sensoriali nello sviluppo di topi geneticamente modificati.

L'obiettivo generale del seguente esperimento è quello di valutare efficacemente i fenotipi di crescita degli assoni sensoriali nei topi fetali in via di sviluppo. Ciò si ottiene allevando e genotipizzando correttamente i topi reporter tre a tau laxy in modo tale che i saggi di colorazione a valle possano essere eseguiti come seconda fase. Gli embrioni di topo vengono fissati e colorati per consentire la visualizzazione delle proiezioni sensoriali degli assoni nell'intero animale.

Successivamente, gli embrioni vengono disidratati e purificati per visualizzare completamente le proiezioni assoniche profonde che altrimenti non sarebbero visibili. I risultati dimostrano che questi metodi sono un mezzo efficace per valutare rapidamente i fenotipi di crescita degli assoni nocicettivi embrionali. Utilizzando la traccia un reporter Tau Lae, questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della crescita degli assoni sensoriali, consentendo ai ricercatori di incrociare il loro gene di interesse sulla traccia di uno sfondo Z tlac e di eseguire lo screening di eventuali cambiamenti nei fenotipi di crescita degli assoni sensoriali.

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Neuroscienze Numero 94 transgenico la genotipizzazione tutto il monte sensoriali periferiche proiezioni assone β-galattosidasi gangli spinali TrkA nocicettori compensazione dei tessuti l'imaging.

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