Signal attenuazione come un modello murino di disturbo ossessivo-compulsivo

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di indurre un comportamento simile compulsivo nei ratti per lo studio del disturbo ossessivo compulsivo. Ciò si ottiene addestrando prima i ratti a raccogliere una ricompensa in cibo, preceduta da uno stimolo composto costituito da una luce e un tono. Il secondo passo consiste nell'addestrare i ratti a premere la leva per ottenere la ricompensa in cibo, che è accompagnata dallo stimolo composto.

Successivamente, le proprietà di segnalazione dello stimolo composto vengono attenuate dall'esposizione ripetuta senza la ricompensa del cibo e la presentazione a leva. Il passaggio finale consiste nel misurare le risposte della leva e della pressione dopo l'attenuazione del segnale. In definitiva, la procedura di attenuazione del segnale porta a un aumento del numero di pressioni della leva, non seguite da un tentativo di raccogliere la ricompensa in cibo.

Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti come i compagni di squadra con il bigliettaio, l'alternanza, eccetera, è che è altamente convalidata, altamente selettiva per i farmaci anticompulsivi, distingue tra comportamenti compulsivi e comportamenti ripetitivi ma non compulsivi, e utilizza misure che sono quantitative, imparziali e non influenzate dalla variabilità inter sperimentatore. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla terapia del disturbo ossessivo compulsivo perché può essere utilizzata per rilevare gli effetti anti e pro compulsivi di nuove manipolazioni farmacologiche e non farmacologiche. Il primo passo è maneggiare i ratti per circa due minuti al giorno per cinque giorni prima dell'inizio dello studio.

Il primo giorno di manipolazione, iniziare un programma di restrizione alimentare di 22 ore. Consentire ai ratti di accedere al cibo per due ore nelle gabbie domestiche, non prima di 30 minuti. Dopo la manipolazione, consentire ai ratti di accedere liberamente all'acqua in ogni momento.

Negli ultimi tre giorni di manipolazione, posizionare da 20 a 30 pellet di cibo su un piccolo vassoio all'interno della gabbia domestica. Assicurati che ogni ratto consumi almeno due pellet. Per questo protocollo sono necessarie stanze adiacenti.

Uno è utilizzato come sala d'attesa per trattenere i ratti prima dell'uso e l'altro ospita le camere dell'opera utilizzate durante i test, trasportare i ratti nella sala d'attesa almeno 15 minuti prima dell'inizio dei test comportamentali Per acclimatarsi il primo giorno di formazione sulla rivista, mettere una quantità sufficiente di pellet di cibo nella rivista in modo che siano visibili al ratto. Un modo per farlo è posizionare i pellet in modo che facciano rimanere leggermente aperto il pannello incernierato. Posiziona i ratti nelle camere operative e cinque minuti dopo verifica che tutti i pellet siano stati raccolti.

Se lo hanno fatto, procedi con il programma di formazione. In caso contrario, concedi altri cinque minuti per iniziare l'allenamento. La luce della casa viene accesa e un singolo pellet di cibo viene lasciato cadere nel magazzino del cibo.

Seguendo una variabile di cinque secondi, ritardare lo stimolo composto costituito dalla luce del caricatore e un tono viene erogato contemporaneamente al pellet di cibo. Lo stimolo composto e la luce della casa si spengono dopo che la testa del topo entra nel magazzino del cibo. O dopo 15 secondi, a seconda dell'evento che si verifica per primo.

Per iniziare, imposta la camera operante in modo che la leva rinforzata sia presente e la luce della casa sia accesa. Durante l'intera sessione di allenamento, metti dei pellet sulla leva prima di posizionare il topo nella camera, lascia che il ratto esplori fino a quando non preme la leva mentre raccoglie i pellet di cibo. Questo innescherà l'erogazione di un singolo pellet di cibo e l'inizio dello stimolo composto.

Lo stimolo composto viene disattivato dopo che la testa del ratto entra nel caricatore del cibo per una prova completata o dopo 15 secondi per un programma di prova non completato, la sessione per interrompere l'esecuzione dopo che il ratto ha raggiunto 30 prove completate. Se un animale ha difficoltà ad acquisire la pressione a leva, utilizzare la sagomatura durante la sagomatura. Tenere aperta la porta della camera esterna insonorizzata e osservare il topo nella camera operativa.

Quando il ratto si avvicina alla leva, utilizzare il software per attivare l'erogazione di un pellet di cibo e l'inizio dello stimolo composto. All'inizio. Rinforzare il ratto quando si trova nelle vicinanze della leva, ma iniziare gradualmente a rinforzarlo solo quando entra in contatto fisico effettivo con la leva.

E infine, rinforzare solo i tentativi di premerlo. Programmare la camera in modo che l'inizio di ogni prova sia segnalato dall'inizio della luce domestica. E cinque secondi dopo, l'introduzione di entrambe le leve.

Posizionare i ratti nelle camere operative e quindi attivare il programma di addestramento il primo giorno di addestramento. Definire lo stimolo composto da disattivare dopo 15 secondi. Per facilitare l'acquisizione della leva, premere la risposta nei due giorni successivi.

Definisci lo stimolo composto in modo che duri solo 10 secondi. Per garantire che l'ingresso nella rivista segua da vicino la leva, le risposte della stampa. Segui ogni prova con un 32° programma di intervalli tra le prove.

La sessione di allenamento con la leva press per smettere di correre dopo che un topo ha premuto la leva rinforzata e raccolto il pellet di cibo 40 volte. Dopo l'addestramento, assegna casualmente i ratti a diversi gruppi sperimentali, assicurandoti che non ci siano differenze statisticamente significative tra i gruppi. La procedura per l'attenuazione del segnale è identica all'addestramento con il caricatore, tranne per il fatto che l'erogatore di pellet è vuoto e i pellet di cibo non vengono erogati con l'inizio dello stimolo composto.

Entro la fine dell'allenamento. Assicurati che i ratti non abbiano tentato di raccogliere una pallina di cibo inserendo la testa nel caricatore del cibo dopo l'inizio dello stimolo composto più di 14 volte. Per iniziare la normale fase di estinzione, portare i ratti in sala d'attesa per un periodo di tempo equivalente alla durata media della fase di attenuazione del segnale.

Eseguire la procedura di test in modo identico all'allenamento con la pressa a leva, tranne per lasciare l'erogatore di pellet vuoto in queste condizioni, premendo la leva rinforzata si ottiene la presentazione dello stimolo composto, ma non viene erogato cibo. Dopo aver posizionato il ratto nella camera, registrare il numero di pressioni eccessive della leva che non sono state seguite dall'ingresso del caricatore, così come quelle che sono state in aggiunta, registrare il numero di pressioni della leva sulla leva non rinforzata e il numero di colpi del naso. Questa figura mostra una risposta dose-risposta rappresentativa dopo l'attenuazione del segnale.

Sia il numero di pressioni eccessive a leva seguite dall'ingresso del caricatore che il numero di pressioni a leva non completate sono stati ridotti a dosi più elevate del farmaco. Questa figura confronta gli effetti dell'attenuazione del segnale e dell'estinzione regolare su ratti esposti a soluzione salina e farmaci. Il farmaco ha ridotto il numero di pressioni eccessive della leva seguite dall'inserimento del caricatore in entrambe le procedure.

Inoltre, ha diminuito il numero di pressioni della leva non completate nell'attenuazione del segnale, ma non nella normale procedura di estinzione. A seguito di questa procedura, possono essere eseguite altre metodiche come l'analisi istologica e biochimica per rispondere a ulteriori domande riguardanti le alterazioni neuro anatomiche e il coinvolgimento di vari sistemi di neurotrasmettitori nella pressatura a leva. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come indurre un comportamento compulsivo insegnando ai rossi a premere con la leva in presenza di uno stimolo composto, come attenuare successivamente questo stimolo.

E infine, come valutare gli effetti di questa attenuazione sul comportamento della leva press.