Gel di poliacrilammide per Invadopodi e trazione Forza saggi sulle cellule tumorali

L'obiettivo generale di questa procedura è creare gel di poliacrilammide che possono essere utilizzati sia nei saggi degli invasori, dei podi che in quelli della forza di trazione per studiare le proprietà invasive e contrattili delle cellule tumorali. Ciò si ottiene attivando prima i vetrini coprioggetti da 14 millimetri nel mondo dei piatti di fiori di vetro per garantire che i gel di poliacrilammide siano legati al vetro. Successivamente, le soluzioni di poliacrilammide per entrambi i saggi sono preparate per produrre gel con rigidità o proprietà meccaniche diverse.

Quindi i saggi dei podi invasi vengono preparati con un sottile strato di matrice extracellulare marcata in fluorescenza per rilevare la degradazione. Infine, i saggi vengono seminati con cellule tumorali per l'incubazione notturna, seguita dal fissaggio e dalla colorazione dell'invasore, dalle piastre podiche e dall'imaging delle cellule vive delle piastre della forza di trazione. In definitiva, la microscopia a fluorescenza viene utilizzata per visualizzare la degradazione di invasori, podi e matrici extracellulari.