L'uso del campo aperto Maze misurare Locomotore e ansia-come comportamento nei topi

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di introdurre il labirinto in campo aperto come una piattaforma facile da usare per visualizzare il comportamento locomotorio generale e per misurare in modo specifico i comportamenti emotivi legati all'ansia. In modello eroso. Ciò si ottiene impostando prima la piattaforma del labirinto e il sistema di tracciamento della telecamera per misurare i comportamenti di interesse.

Il secondo passo consiste nell'introdurre il soggetto del mouse nel labirinto in modo tale da ridurre al minimo il rumore di fondo ricevuto dalla telecamera. Successivamente, al mouse è consentito il movimento libero e ininterrotto in tutto il labirinto en chiusura, che viene catturato dalla telecamera utilizzando un software di tracciamento video. Il passaggio finale consiste nell'analizzare i dati ottenuti dal software di monitoraggio per determinare eventuali differenze nei parametri utilizzati per misurare i comportamenti legati all'ansia.

In definitiva, il labirinto in campo aperto può essere utilizzato per misurare l'attività locomotoria e i comportamenti correlati all'ansia per ottenere informazioni sui modelli di comportamento emotivo nei modelli di roditori. Uno dei vantaggi di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti per misurare l'ansia in un modello di roditore come il labirinto elevato plus, è il numero di parametri etologici e convenzionali che possono essere misurati durante una singola sessione di test. Per preparare l'esperimento, procurati un labirinto a campo aperto o OFM.

Questo può consistere in un labirinto a camera singola o multipla. Ogni camera dovrebbe misurare circa 50 centimetri di lunghezza, 50 centimetri di larghezza e 38 centimetri di altezza, e dovrebbe essere realizzata con pavimenti in plastica ad alta densità e non porosi del labirinto dovrebbe essere strutturato per la trazione durante la deambulazione e il labirinto Le pareti dovrebbero essere lisce per inibire l'arrampicata, lasciare i quadranti del labirinto completamente vuoti. Ai fini di questo test, verrà utilizzato un singolo quadrante di un labirinto vuoto a quattro quadranti.

Per dimostrare l'OFM prima dell'uso, pulire la camera con etanolo al 95% per rimuovere eventuali indizi olfattivi lasciati dal precedente topo soggetto. Lasciare evaporare completamente l'etanolo per 5-10 minuti prima di testare i topi. Installa il test in una stanza normalmente illuminata con livelli di luce, circa 500-1000 lux o condizioni di illuminazione normali dell'ufficio, e sospendi una videocamera sopra il labirinto fissandola al soffitto per consentire all'obiettivo della telecamera di vedere l'intera area del labirinto.

Procurati abbastanza spazio nella stanza in modo da non essere osservabile dai soggetti del test nel labirinto. In caso contrario, potresti influenzare il comportamento dei topi. Aprire il software di tracciamento video e selezionare la scheda di acquisizione dati.

Poi l'inseguimento del singolo soggetto. Scegli l'opzione di sfondo statico situata nella parte inferiore dello schermo. Quindi, scatta una foto facendo clic sul pulsante della foto situato nella parte inferiore dello schermo.

Seleziona il pulsante di prova situato nella parte inferiore dello schermo per confermare che l'immagine di sfondo scattata sopra sia stata completamente rimossa dal software di tracciamento. Se l'immagine di sfondo viene completamente rimossa dall'immagine di tracciamento, verrà visualizzato un campo bianco pieno. Le ombre nere appariranno in questo campo se le condizioni di illuminazione cambiano o se il labirinto viene spostato accidentalmente, indicando che le due immagini non coincidono perfettamente.

Rimediare a questo errore ripetendo il passaggio di calibrazione. Dopo aver confermato le impostazioni in background, configura le opzioni di temporizzazione facendo clic sulla scheda di configurazione. Una volta nell'intestazione del cronometraggio, utilizzare la finestra appena aperta per inserire i parametri sperimentali.

Scegli il periodo di tracciamento di 10 minuti nell'opzione del tempo programmato e imposta il periodo di latenza su cinque secondi. Inserire un tempo di acquisizione di 10 minuti per la durata del test. Impostare il controllo di arresto su quando il tempo programmato è scaduto, il che spegnerà automaticamente la fotocamera e la funzione di tracciamento del software.

Una volta impostati tutti gli orari, selezionare il pulsante di chiusura. Impostare il controllo di arresto su quando il tempo programmato è scaduto, il che spegnerà automaticamente la fotocamera e la funzione di tracciamento del software. Una volta impostati tutti i tempi, selezionare un pulsante di chiusura per iniziare il test in campo aperto.

Posiziona le gabbie domestiche con i topi dalla loro stanza di alloggio nella sala di prova. Lasciare che i topi si acclimatino alla sala operatoria per un minimo di 30 minuti prima di iniziare il test. Quindi, rimuovi un singolo topo dalla gabbia domestica afferrandogli delicatamente la coda.

E posiziona il mouse al centro dell'OFM mentre attivi contemporaneamente il software intelligente. Registra immediatamente il mouse mentre si muove nel labirinto. Consenti al mouse di muoversi liberamente e ininterrottamente in tutto il labirinto per un singolo periodo di 10 minuti.

Al termine del periodo di prova, rimuovere delicatamente il topo dal labirinto e rimetterlo nella sua gabbia di casa. Conta visivamente i pellet di boi fecali presenti nel labirinto e registra manualmente i numeri per ulteriori analisi. Quindi rimuovere tutti i pellet fecali e asciugare tutte le macchie di minzione.

Spruzzare il pavimento e le pareti del quadrante del labirinto con etanolo al 95% e pulire con un tovagliolo di carta pulito. Lasciare asciugare completamente la soluzione di etanolo prima di testare altri topi. Ripetere la procedura con il mouse successivo.

Il primo e probabilmente il più importante parametro specifico da misurare nel labirinto in campo aperto è la distanza totale ambulatoriale, il tipo selvatico o il normale C 57 black six. I topi mostrano una capacità ambulatoriale simile a un knockout specifico, C. sette neri sei topi, quando la distanza totale percorsa è simile tra i ceppi. Un'ulteriore analisi dei comportamenti emotivi è semplificata perché l'attività locomotoria è rimossa dall'equazione poiché la distanza ambulatoriale totale tra i due ceppi di topo con tasse di Figma simili o la tendenza di un soggetto a rimanere vicino alle pareti è stata analizzata nel tipo selvatico rispetto ai topi knockout.

La fichi mota aumenta nei topi knockout nella zona esterna, il che rappresenta un aumento dei livelli di ansia. I topi knockout hanno mostrato un aumento della bolli fecale rispetto ai topi wild type. L'aumento del numero di BOI può essere indicativo di un aumento dell'ansia e dell'emotività dell'animale in questione.

Quando si esegue questa procedura, è molto importante che la persona che somministra il test rimanga il più ferma e silenziosa possibile, poiché qualsiasi rumore o movimento non necessario può influenzare il comportamento del soggetto sottoposto al test.