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DOI: 10.3791/52489-v
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Cheratociti zebrafish migrano in lastre alveolari da espianti e forniscono un modello in vitro per lo studio dei meccanismi di migrazione cellulare collettiva nel contesto di epiteliale guarigione della ferita. Questi protocolli dettaglio un modo efficace per stabilire le culture espianto primarie per l'uso in test di migrazione cellulare collettiva.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di stabilire colture explan di cheratociti di zebrafish da utilizzare negli studi di migrazione cellulare collettiva e di guarigione delle ferite epiteliali. Ciò si ottiene rimuovendo prima le squame con tessuto epiteliale attaccato dal pesce zebra adulto anestetizzato. Le squame con il tessuto attaccato vengono poste in un piatto di coltura per consentire alle cellule di aderire.
Quindi viene aggiunto il terreno di coltura insieme a tutti i trattamenti indicati dal disegno sperimentale. Infine, le cellule vengono incubate e osservate al microscopio video per il periodo di tempo desiderato. In definitiva, è possibile utilizzare una varietà di saggi per dimostrare i cambiamenti nella migrazione o nella morfologia cellulare, nonché l'espressione di proteine o altri marcatori nel tempo.
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