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Dispositivi a base di carta per Isolamento e caratterizzazione di extracellulare vescicole
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JoVE Journal Bioengineering
Paper-based Devices for Isolation and Characterization of Extracellular Vesicles

Dispositivi a base di carta per Isolamento e caratterizzazione di extracellulare vescicole

Full Text
11,963 Views
11:53 min
April 3, 2015

DOI: 10.3791/52722-v

Chihchen Chen1, Bo-Ren Lin1, Min-Yen Hsu2, Chao-Min Cheng1

1Institute of Nanoengineering and Microsystems,National Tsing Hua University, 2Taichung Veterans General Hospital

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Dettagli Questo protocollo di un metodo per isolare vescicole extracellulari (EV), piccole particelle membranose rilasciate dalle cellule, da un minimo di 10 campioni di siero microlitri. Questo approccio elude la necessità di ultracentrifugazione, richiede solo pochi minuti di tempo di saggio, e permette l'isolamento di EVs da campioni di volumi limitati.

L'obiettivo generale di questa procedura è isolare le vescicole extracellulari utilizzando una piattaforma cartacea. Ciò si ottiene laminando prima con due fogli di polistirene con cellulosa circolare, ritagli di carta allineati su una serie di fori passanti registrati. Il secondo passo consiste nel coniugare chimicamente le molecole che legherebbero le vescicole extracellulari alla zona di test della carta.

Successivamente, il campione biologico può essere pipettato direttamente sulla zona del test di carta e le vescicole extracellulari vengono isolate dopo la fase di risciacquo. Il passo finale consiste nel caratterizzare le vescicole extracellulari catturate utilizzando la microscopia elettronica, Eliza o l'analisi trascrittomica. In definitiva, è possibile purificare e concentrare sottogruppi di vescicole extracellulari provenienti da campioni di siero di soli 10 microlitri.

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