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DOI: 10.3791/52771-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study focuses on the synthesis and characterization of lipid-based vaccine nanoparticles designed to elicit antigen-specific CD8+ T cell expansion in vivo. Using a murine model, the effectiveness of these nanoparticles in immunization is evaluated through advanced imaging and flow cytometry techniques.
Descriviamo tecniche basate sull'imaging di animali interi e citometria a flusso per monitorare l'espansione delle cellule T CD8+ antigene-specifiche in risposta all'immunizzazione con nanoparticelle in un modello murino di vaccinazione.
L'obiettivo generale del seguente esperimento è sintetizzare e caratterizzare nanoparticelle di vaccini a base lipidica e valutare la loro capacità di suscitare l'espansione dei linfociti T citotossici antigene-specifici in vivo. Ciò si ottiene ingegnerizzando un agente patogeno che imita le vescicole multilam reticolate tra due strati o i CMV co-caricati con antigene e adiuvante per la vaccinazione di topi naïve. Trasferito adottivamente con luciferasi che esprime l'antigene specifico CD otto cellule T positive.
Nella seconda fase, l'espansione delle otto cellule T positive CD antigene-specifiche viene valutata mediante imaging in vivo dell'intero animale. Le cellule mononucleate del sangue periferico raccolte dagli animali immunizzati con ICMV vengono quindi colorate con tetrameri marcati in fluorescenza e analizzate mediante citometria a flusso per quantificare la frequenza delle otto cellule T positive CD antigene-specifiche endogene all'interno del compartimento sistemico. In definitiva, l'imaging bioluminescente può essere utilizzato per tracciare l'espansione dei linfociti T citotossici antigene-specifici in risposta alla vaccinazione con nanoparticelle.
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