20 ottobre 2015
L'obiettivo di questo manoscritto è descrivere i passaggi necessari per eseguire un trapianto di rene in un topo, prestando particolare attenzione ai dettagli dell'anastomosi arteriosa.
L'obiettivo generale di questa procedura è dimostrare una tecnica di anastomosi arteriosa modificata per i trapianti di rene nel topo. Ciò si ottiene sezionando prima attentamente i vasi pertinenti nel donatore. Il secondo passo consiste nel creare un tallone e una cuffia della punta dell'aorta addominale del donatore adiacente all'arteria renale.
Successivamente, questo polsino del tallone e della punta viene utilizzato per formare l'anastomosi arteriosa nel ricevente. In definitiva, questa tecnica dovrebbe portare a casi molto bassi di trombosi arteriosa. Questo video ti mostrerà come creare un tallone arterioso e un polsino per facilitare i trapianti di rene in bocca.
Il vantaggio principale di questa tecnica di metodi di resistenza è che il percorso del flusso sanguigno dall'aorta ricevente all'arteria renale del donatore viene raddrizzato, con conseguente riduzione dell'attivazione piastrinica e della formazione di trombosi Utilizzando una tecnica sterile al microscopio operatorio, prelevare il rene del donatore, eseguire correttamente. Il tempo di raccolta sarà compreso tra 15 e 20 minuti. Rimuovi il pelo e poi trattieni l'animale.
Preparare il sito chirurgico lavando la pelle con iodio povidone, drappeggiare il topo e iniziare l'intervento con un'incisione addominale della linea mediana di due centimetri. Ritrarre l'intestino sul torace e avvolgerlo in una garza umida. Mantieni la garza umida durante tutta la procedura.
Ora, trova i grandi vasi addominali e mobilitali. Eventuali rami lombari devono essere cauterizzati o legati con sutura in nylon 10 zero. Successivamente, senza mezzi termini, sezionare una divisione di due millimetri della vena cava inferiore e l'aorta distale ai vasi renali sinistri.
Quindi legare e dividere eventuali piccoli rami arteriosi e venosi che si attaccano al vaso renale. Continuare la dissezione smussata per separare la vena renale dall'arteria renale, consentendo così la successiva creazione di un cerotto di Carroll all'estremità prossimale della vena renale, questo cerotto verrà utilizzato per la formazione dell'anastomosi venosa. Successivamente, piace e dividi i vasi surrenalici sinistri per accedere all'aorta soprarenale.
Una volta effettuato l'accesso, avvolgere la seta sei zero. Sutura intorno all'aorta sovrarenale per un uso successivo. Ora mobilizzare i vasi renali e l'uretere dalla fascia circostante.
Ruotare il rene verso destra sul lato posteriore, legare e dividere eventuali rami vascolari concentrandosi sull'uretere. Liberare con cura l'uretere dalla fascia circostante. Non disturbare l'ilo renale e preservare i vasi eretici.
Successivamente, dividere l'uretere a livello del dotto deense. Il rene può ora essere recuperato. Innanzitutto, iniettare lentamente 300 unità di eparina nell'IVC distale per eparinizzare il donatore.
In secondo luogo, legare la sutura a sei zeri attorno al sovrarenale aa. Quindi perfondere il rene sinistro dall'aorta addominale, iniettando 0,8 millilitri di soluzione salina di eparina a 100 unità per millilitro. Dopo la perfusione, creare immediatamente il cerotto carillo venoso, evitando così il riflusso nel rene.
Ritrarre la vena renale verso il rene per rivelare l'AA e l'arteria renale. Ora dividi l'aorta adiacente all'arteria renale. Fai un tacco e un polsino.
Quindi, se sono necessari zero minuti di ischemia fredda, trasferire il rene recuperato in un ricevente preparato. In alternativa, trasferire gli organi in una camera di conservazione a quattro gradi Celsius e quindi sopprimere i donatori come indicato nel protocollo di testo. Questa procedura richiederà dai 35 ai 45 minuti come per l'anestesia del donatore.
Il ricevente integra anche il bolo iniziale secondo necessità. Fornire al ricevente una crema oftalmica. Quindi somministrare all'animale un'iniezione di buprenorfina e continuare la sua somministrazione dopo la procedura, dopo aver effettuato l'incisione iniziale e spostato l'intestino come fatto con il donatore, procedere con una nefrectomia destra, legare l'arteria renale e la vena con sei punti zero ligare e dividere l'uretere prossimale al rene con sei punti zero.
Quindi asportare il rene distalmente alla sutura vascolare. Ora sotto i vasi renali, isolare l'AA e l'IVC quindi superiori al sito di anastomosi. Posiziona una cravatta di cotone quattro zero attorno all'aorta e l'IVC fa lo stesso al di sotto del sito.
Tutti i vasi lombari trovati nella regione devono essere cauterizzati o legati con una sutura di nylon 10 zero, non la sutura che è inferiore e quindi non strettamente la sutura che è superiore. Questo manterrà un po' di sangue nell'aorta, facilitando l'autotomia dell'AOR. Eseguire l'atomia con un ago calibro 30, quindi estendere l'incisione fino a una lunghezza di circa due millimetri utilizzando micro forbici sottili.
Il passo successivo consiste nell'eseguire un'endo-anastomosi dal tallone e dalla cuffia del donatore all'aorta del ricevente. Per prima cosa, metti un punto di permanenza nel tallone dell'aorta del donatore con sutura 10 zero. Continua questo attraverso l'estremità inferiore dell'incisione nell'aorta del ricevente e legalo.
In secondo luogo, posizionare una sutura 10 zero nell'estremità superiore dell'incisione aortica e continuare attraverso la punta della cuffia del donatore e legare. In terzo luogo, partendo dall'estremità superiore, eseguire una sutura che cola nella parete laterale dell'aorta e legare contro il punto di permanenza inferiore precedentemente posizionato. Quindi capovolgere il rene e continuare una sutura in esecuzione lungo la parete mediale e legare contro il punto di permanenza superiore.
Completare l'anastomosi venosa perforando l'IVC con l'ago e poi estendendo l'incisione con micro forbici sottili. Utilizzando 10 zero nylon, legare la vena renale del donatore all'angolo inferiore dell'IVC. Posizionare un'altra sutura 10 zero all'estremità superiore dell'IVC e della vena del donatore e fare una sutura in esecuzione lungo entrambi i lati.
Come per l'anastomosi arteriosa, l'avversione dei bordi del tessuto aiuta con la tenuta e la guarigione. Ora, controlla il tuo lavoro. Le pareti opposte non devono essere catturate dai punti o il flusso sanguigno sarà troppo ristretto.
Un altro fattore di vitale importanza garantisce che la tensione della linea di sutura anastomotica sia ottimale, troppo allentata e ci saranno perdite irreversibili, troppo strette e ci sarà una restrizione al flusso. Se sul lato arterioso, ciò si tradurrà in una scarsa profusione dell'innesto. Se sul lato venoso si verificherà un rene congestionato.
Una volta completate le anastomosi, rilasciare il laccio di cotone distale per stabilire il flusso venoso. Quindi allentare gradualmente la fascetta prossimale e lavare per l'emostasi all'anastomosi arteriosa. Quando entrambe le anastomosi sono confermate sicure, ecco la vescica del ricevente con un ago calibro 20 che fa due fori facendo passare la pinza attraverso i fori e tirando l'uretere donatore attraverso la vescica.
Quindi ancorare l'estremità prossimale dell'uretere alla parete della vescica con 2 punti di sutura. Taglia la lunghezza in eccesso dell'uretere sporgente in modo che si ritragga all'interno della vescica. Quindi chiudere l'altro foro nella vescica con 10 punti di sutura zero.
Completare l'intervento sostituendo l'intestino, chiudendo l'addome in due strati con la sutura di seta cinque zero e iniettando un microlitro di soluzione salina nell'addome prima della chiusura. Dopo aver chiuso l'addome, iniettare altri 0,8 millilitri di soluzione fisiologica per via sottocutanea e recuperare l'animale su una coperta calda In un anno di raccolta dati, questa tecnica ha ridotto significativamente l'incidenza di trombosi arteriosa dal 35% allo 0% e questo tasso di trombosi dello 0% è stato mantenuto poiché l'immunoistochimica è stata eseguita su un rene non trapiantato e su un rene trapiantato. Utilizzando la tecnica descritta, una colorazione periodica di spostamento acido ha rivelato cellule tubulari prossimali normali nel controllo e nel donatore.
Le cellule sono cuboidali con un citoplasma chiaro e un nucleo rotondo e leggero al centro della cellula per entrambe le frecce. Segnala le prove di una lieve lesione del bordo del pennello, ma la maggior parte dei bordi del pennello sono regolari e ben conservati. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come eseguire un'anastomosi arteriosa del tallone e della punta che si tradurrà in una riduzione dei casi di trombosi e in un maggior successo dei trapianti di rene.
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In questo articolo viene descritta una tecnica modificata di anastomosi arteriosa per trapianti renali nei topi. Si sottolinea la dissezione accurata dei vasi e la creazione di una cuffia di tallone e punta dall'aorta addominale del donatore.
La trombosi arteriosa rimane un punto critico di fallimento nei modelli preclinici di trapianto, influenzando direttamente l'affidabilità dei dati e i tempi di valutazione dei composti. Questa tecnica affronta una fondamentale sfida meccanicistica di riduzione del rischio, migliorando la costanza della perfusione dell'innesto attraverso l'ottimizzazione emodinamica. Una maggiore prevedibilità del modello supporta decisioni più precoci di tipo go/no-go nello sviluppo di terapie correlate al trapianto.
Il metodo si inserisce nel percorso dalla scoperta alla fase preclinica, in particolare quando la sicurezza renale o l'efficacia rappresentano un endpoint primario, fornendo una piattaforma chirurgica affidabile per l'analisi successiva.