Un protocollo per Mice Housing in un ambiente arricchito

L'obiettivo di questa procedura è fornire i dettagli necessari per l'alloggio e il mantenimento degli animali nell'arricchimento ambientale, che produce robusti effetti metabolici e antitumorali nei topi. Ciò si ottiene allestendo prima l'ambiente di stabulazione arricchito in un grande bidone con oggetti come ruote, fonti di corsa, gabbie, tubi, tronchi e gabbie. Il secondo passo è quello di introdurre gli animali nel nuovo ambiente.

Successivamente, l'ambiente arricchito viene mantenuto modificando la posizione e il tipo di oggetti nel bidone e fornendo regolarmente cibo e acqua freschi. Il passaggio finale consiste nel pulire gli oggetti che sono stati sostituiti nell'ambiente in modo che siano pronti per essere scambiati in futuro. In definitiva, sull'eutanasia e l'analisi dei tessuti animali.

Questa tecnica di arricchimento ambientale mostra una diminuzione dell'adiposità, un aumento della resistenza al dispendio energetico contro l'obesità indotta dalla dieta e un passaggio fenotipico da grasso bianco a grasso bruno attivando l'asse adipocitario neuronale simmetrico ipotalamico. Questo metodo descrive i dettagli relativi alla creazione di un ambiente arricchito per roditori da laboratorio che migliora la resistenza al cancro e alle malattie metaboliche. Per prima cosa, spruzzare e pulire l'interno di un grande contenitore di arricchimento con disinfettanti sporicidina.

Seguendo le istruzioni del produttore, pulire il bidone con etanolo al 30% o carta imbevuta di acqua di rubinetto, asciugamano e asciugatrice con un tovagliolo di carta per eliminare l'odore del disinfettante precedente. Usa igloo di tubi di plastica con ruote di tipo SOR e altri vari giocattoli di plastica simili a hutcher nell'ambiente arricchito. Lavare questi giocattoli come prima, utilizzare ruote da corsa in metallo che sono state lavate come prima.

Se la vernice sulla ruota inizia a sbiadire in modo che la ruota diventi rumorosa quando gli animali ci corrono sopra, applica una piccola quantità di vaselina nel punto in cui la ruota e l'asse si collegano. Utilizzare tronchi di legno nell'ambiente arricchito. Pulisci i tronchi rimuovendo a mano eventuali lettiere o altri detriti

Quindi sterilizzare i tronchi in autoclave su un ciclo a secco o un ciclo tessile, che raggiunge una temperatura di 121 gradi Celsius per 15 minuti. Utilizzare gabbie di alimentazione pulite di dimensioni comprese tra 29 centimetri per 18 centimetri per 12,5 centimetri e 30,5 centimetri per 19 centimetri per 14 centimetri da tenere. Una rastrelliera per l'alimentazione e l'abbeveraggio taglia un foro di almeno cinque centimetri di diametro dal fondo anteriore della gabbia per consentire ai topi di entrare e uscire.

iniziare. Per una lettiera di animali da laboratorio di pannocchie di mais da un quarto di pollice nel contenitore di arricchimento da pulito a grande a una profondità da due a 2,5 centimetri. Quindi, posiziona due o tre dei precedenti tronchi della clave aortica in un angolo del cestino per sequestrare un'area di circa 1.225 centimetri quadrati.

Quindi, nella zona sequestrata dai tronchi, posizionare sopra tre colle con ruote SOR. Assicurarsi che le ruote abbiano spazio per girare liberamente. Ora unisci il tubo di plastica in modo che più bracci si diramino dal pezzo di collegamento centrale.

Posiziona questo tubo al centro del cestino ai due angoli del cestino. Posiziona una gabbia di alimentazione riempita con la stessa lettiera del cestino. Il foro nella parte anteriore di ciascuna gabbia di alimentazione deve essere rivolto verso il centro del contenitore.

Metti un filo di cibo e acqua contenente cibo per topi sopra ogni gabbia di alimentazione. Aggiungere la bottiglia d'acqua. Metti una ruota da 11,5 centimetri, una ruota da 20,5 centimetri e una ruota da 28 centimetri nel cestino.

Quindi posiziona altre quattro o cinque conigliere di plastica come giocattoli o tunnel in tutto il contenitore dell'arricchimento. Coprire il cestino con carta da filtro microisolante e utilizzare le clip per legare per agganciare la carta da filtro al contenitore. Quando si posizionano gli animali nel bidone dell'arricchimento da una gabbia standard, posizionare la gabbia nel bidone su un lato in modo che gli animali possano muoversi liberamente dalla gabbia standard al bidone dell'arricchimento.

Non permettere che i materiali di nidificazione vengano trasferiti nel contenitore di arricchimento. Da 10 a 20 animali con la stessa età, sesso e ceppo genetico possono essere ospitati contemporaneamente nell'ambiente arricchito. Assicurarsi che gli animali siano osservati quotidianamente per segni di malattia o angoscia.

Se necessario, maneggiare delicatamente gli animali per ispezionare ulteriormente le loro condizioni due volte a settimana. Controlla i livelli di cibo e acqua, assicurandoti che il cibo e l'acqua durino per i prossimi due giorni. Inoltre, raddrizza le ruote da corsa e i giocattoli di arricchimento in modo che siano distribuiti e possano essere facilmente utilizzati.

Sostituisci tutti gli oggetti di arricchimento sporchi una volta alla settimana, idealmente quando i topi vengono rimossi dall'ambiente. A scopo sperimentale, rimuovere le gabbie di alimentazione e le griglie metalliche e sostituirle con gabbie e griglie pulite riempite con cibo fresco. Sostituire le bottiglie d'acqua con bottiglie d'acqua pulite.

Ridisporre in modo cruciale gli elementi dell'arricchimento in modo da mantenere gli aspetti chiave dell'impostazione, ma gli elementi dell'arricchimento vengono posizionati in modo diverso. Posto. Controllare il resto del contenitore di arricchimento grande e pulirlo se necessario. Raccogliendo la lettiera sporca e spargendo nuova lettiera pulita una volta ogni due settimane.

Quando si esegue l'allevamento settimanale, lavare i giocattoli a mano o inviandoli attraverso il lavaggio della gabbia. Ogni mese, pulisci la maggior parte della lettiera rimuovendo i giocattoli di arricchimento e le gabbie di alimentazione e raccogliendo la lettiera. Sostituire con lettiera fresca assicurandosi che ci siano due centimetri di lettiera in tutte le aree della gabbia una volta ogni tre mesi o come richiesto dal protocollo degli animali, rimuovere tutte le lettiere e i giocattoli e disinfettare il contenitore dell'arricchimento lavando come prima del controllo domestico Animali del gruppo sullo stesso ciclo di 12 ore di luce e buio.

Come topi nell'ambiente arricchito in gabbie micro isolate, fornire la stessa lettiera di pannocchie di mais nella gabbia di controllo come nell'ambiente arricchito e aggiungere un nido di quattro centimetri per quattro centimetri illuminato con un nido maister maker che ospitava da tre a cinque topi dello stesso sesso in una normale gabbia per topi. Non fornire alcun tubo per giocattoli o gabbia nella gabbia. Includi una griglia nella gabbia per contenere il cibo e una bottiglia d'acqua se la gabbia non è collegata a un sistema di irrigazione automatico.

Monitora quotidianamente la salute degli animali, assicurandoti che gli animali abbiano cibo e acqua in abbondanza. Sostituire o pulire le gabbie, i cavi di alimentazione, il cibo e l'acqua. Una volta alla settimana, pulire le gabbie e le griglie come prima.

Topi maschi di tre settimane sono stati alloggiati in un ambiente arricchito o in gabbie di controllo per cinque settimane prima dell'inoculazione sottocutanea del tumore con 10-5 cellule per animale. I risultati mostrano che il peso del tumore del melanoma B 16 è di 17 giorni dopo l'inoculazione. Ogni gruppo era composto da 10 animali.

L'asterisco rappresenta un valore P inferiore a 0,05 calcolato dal test T degli studenti qui. Topi di tre settimane sono stati sottoposti ad arricchimento ambientale per sei giorni. Sei giorni in un ambiente arricchito, diminuzione retroperitoneale, tessuto adiposo bianco, peso del cuscinetto adiposo.

Questo grafico mostra che sei giorni in un ambiente arricchito, diminuzione del tessuto adiposo bruno, del tessuto adiposo bianco epidermico e del tessuto adiposo bianco retroperitoneale, del peso del cuscinetto adiposo rispetto al peso corporeo. I prossimi due grafici condividono i risultati di topi ospitati in un ambiente arricchito per quattro settimane, come si vede qui, quattro settimane di arricchimento ambientale, diminuzione del peso dei cuscinetti adiposi in tutti i tipi di grasso, ad eccezione del tessuto adiposo bruno. Quattro settimane di arricchimento ambientale, diminuzione del peso del cuscinetto adiposo rispetto al peso corporeo per tutti i tipi di grasso tranne il tessuto adiposo bruno.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come impostare e mantenere un ambiente arricchito che induce effetti anti-cancro e anti-obesità e topi.