Name: Diretta mouse Trauma / Burn modello di ossificazione eterotopica (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-08-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Scopri un modello di trauma su topo per studiare l'ossificazione eterotopica mediante tenotomia del tendine di Achille e ustione parziale. Questo metodo permette di indagare la formazione ossea ectopica senza fattori esogeni.

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Ringraziamo Amanda Fair, il CMI, Kathy Sweet e l'ORL di UM per l'assistenza con l'imaging e l'analisi μCT. Finanziamento: BL Finanziato da 1K08GM109105-01 e Plastic Surgery Foundation National Endowment Award.

Dichiarazione etica: Tutte le procedure sugli animali sono state eseguite in stretta conformità con le buone pratiche animale come definito nelle linee guida fornite nella Guida per l&#39;uso e la cura di animali da laboratorio: Ottava Edizione del Institute for Research Laboratory Animal (ILAR, 2011) e sono stati approvato dalla cura e l&#39;uso degli animali Comitato Istituzionale dell&#39;Università del Michigan (PRO0001553). 1. mouse Procedure chirurgiche NOTA: Usare 8-10 settimane vecchio C57BL / 6 topi. Altre epoche, sfondi e ceppi di topi possono anche essere utilizzati per testare le condizioni diverse o make-up genetico. Per la parte tenotomia del procedimento, mantenere condizioni di sterilità utilizzando la maschera di protezione, cofano capelli, e camice sterile, guanti e strumenti. Siti chirurgici devono essere sterilmente preparati con iodopovidone e drappeggio sterile. Evitare l&#39;ipotermia utilizzando una piastra elettrica veterinaria e il riscaldamento soluzioni rianimazione a 37 ° C prima di amministrazione. <ol><li> Anestetizzare il mouse utilizzando 2,5% isoflurano per via inalatoria. Utilizzare un cono di lasciare il dorso e arti posteriori facilmente accessibile. Regolare la velocità di somministrazione isoflurano per mantenere la frequenza respiratoria adeguata e la colorazione delle mucose e per garantire l&#39;anestesia controllando il tono muscolare, pizzico piedi, e di riflesso corneale. Applicare blando pomata oftalmica agli occhi del mouse per evitare lesioni agli occhi asciutti durante la procedura. Mantenere un&#39;adeguata temperatura corporea usando una piastra elettrica veterinaria o circolatore acqua calda sotto il campo operatorio. </li><li> Somministrare buprenorfina, 0,1 mg / kg, per via sottocutanea immediatamente prima di un intervento chirurgico per l&#39;analgesia. </li><li> Strettamente radere sito chirurgico sulla zampa posteriore sinistra utilizzando tagliaunghie dal tallone al ginocchio. </li><li> Strettamente radere dorso del mouse, iniziando sopra la colonna vertebrale ed estendendo l&#39;area rasata a sinistra della linea mediana dorsale, aprendo una superficie di almeno 2 cm x 3 cm per accogliere il ustioni. </li><li>Preparare il sito chirurgico, compresa la zampa posteriore al ginocchio con 3 alternati scrub povidone-iodio. </li><li> Eseguire una incisione longitudinale lungo la faccia mediale del tendine d&#39;Achille sinistro. Estendere l&#39;incisione in modo che il tendine di Achille può essere facilmente visualizzato; di circa 0,5 cm. </li><li> Eseguire una tenotomia di Achille con tagliente dissezione del tendine a metà con le forbici tessuti taglienti. Inserire una lama delle forbici del tessuto sul piano tessuto sotto il tendine e sezionare lungo il piano finché la lama è al punto medio del tendine. Chiudere le lame a forbice per tagliare il tendine bruscamente. NOTA: Assicurare l&#39;inclusione di tutti i tendini posteriori tra cui gastrocnemio, soleo, e tendini Plantaris. </li><li> Raggiungere emostasi facendo pressione con garza sterile (ci dovrebbe essere minimo sanguinamento) e chiudere l&#39;incisione cutanea con un punto 5-0 Vicryl. </li><li> Eseguire la dorsale parziale spessore di masterizzazione con un blocco di alluminio del peso di 35 g con measuremen approssimativits 2 centimetri x 2 cm x 3 cm riscaldata a 60 ° C in un bagno d&#39;acqua applicata al dorso rasata del mouse per 17 sec. NOTA: ottenere la profondità ustione appropriata posizionando il blocco superiore del mouse anestetizzato, garantendo che l&#39;intera superficie del blocco è in contatto con il mouse, però evitare di applicare qualsiasi ulteriore pressione al blocco, cioè permettono gravità essere l&#39;unica forza tiene il blocco in posizione. Una maniglia di plastica sottile fissato su un lato del blocco è conveniente per la manipolazione, la stabilizzazione, e recupero dal bagno di acqua calda. Questo creerà un organo di totale superficie di circa il 30% a bruciare in un 8-10 settimane di età C57BL / 6 del mouse. Questo ustione contatto è stata scelta rispetto ad altri metodi (fiamma o scottature masterizzazione) a causa della uniformità della profondità dell&#39;ustione sulla ferita e la riproducibilità tra animali. </li><li> Asciugare il sito ustione con una garza e applicare una medicazione Tegaderm. </li><li> Somministrare fluidi riscaldati rianimazione: Ringer lattato soluzione 1 mliniezione intraperitoneale e 0,5 ml iniezione sottocutanea. Questa amministrazione di una volta di rianimazione è adeguata per il recupero da ustioni e tenotomia. NOTA: Non tornare topi anestetizzati per gabbie abitative con altri topi, casa individualmente in gabbie pulite sotto controllo fino a quando i topi sono completamente recuperati. Recupero tipica avviene entro 1-6 ore. Siti di masterizzazione in genere guariscono entro 2-4 settimane e raramente sono complicate da infezione della ferita se tenuti in ambienti abitativi puliti. </li><li> Somministrare buprenorfina 0,1 mg iniezione sottocutanea / kg ogni 12 ore per 3 giorni dopo la procedura. Monitor crescita HO con scansioni seriali μCT a intervalli appropriati. Crescita ossea ectopica è il primo evidente circa 3 settimane dopo l&#39;intervento per μCT. NOTA: La maggior parte dello sviluppo HO è completata entro 9 settimane post-op. Non abbiamo osservato una differenza di volume HO o posizione con ripetute μCT scansioni bi-settimanale per 15 settimane rispetto a un unico end-point μCT scansione a 15 settimane.Al termine degli esperimenti, tutti i topi eutanasia con CO 2 inalazione secondo le linee guida istituzionali e verificare la morte con dislocazione cervicale dopo 10 min. </li></ol> 2. μCT Acquisizione e analisi <ol><li> Fissare il mouse anestetizzato sul piano dello scanner in posizione prona. Nastro arti posteriori saldamente al letto per evitare di respirare artefatti da movimento. Includere l&#39;aria, l&#39;acqua, e idrossiapatite contenente fantasma sotto il mouse per la calibrazione dell&#39;immagine. </li><li> Aprire il software di analisi Bone e definire una regione di interesse (ROI) che comprende entrambi gli arti posteriori dal anca prossimale alla punta della zampa posteriore distale. Ottenere un&#39;immagine utilizzando i seguenti parametri:. 80 kV, 500 μA e 1.300 esposizione msec, 48 micron dimensioni voxel 14,15 </li><li> Calibrare l&#39;immagine di unità Hounsfield (HU) disegnando un ROI in ciascuna delle tre camere fantasma e inserendo la densità media nei campi appropriatiil software. </li><li> Con lo strumento &quot;grabber&quot; nel software, riorientare l&#39;immagine in modo tibia del arto posteriore sinistro è parallelo lungo l&#39;asse Z per consentire la più chiara vista anatomico per la delineazione di strutture ossee corticali ortotopico e HO. </li><li> Cominciando al ginocchio, scorrere distalmente attraverso le fette di immagine fino a quando si incontra HO. Utilizzando lo strumento spline manuale, fare un ROI attorno all&#39;osso ectopica su ogni 5 ° fetta continuando distale attraverso la zampa o fino HO è stato superato. Utilizzare lo strumento estrapolare per estendere e cucire le ROI in un unico ROI che contiene tutte le HO. </li><li> Fare un ROI 3D e scegliere il menu analisi. Calcolare il volume osseo impostando i valori di soglia inferiore e superiore che meglio mostrano la finestra ossea. Utilizzare gli stessi valori soglia fissati per tutte le scansioni. </li></ol>

<ol><li>Leblanc, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BMP-9-induced+muscle+heterotopic+ossification+requires+changes+to+the+skeletal+muscle+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">BMP-9-induced muscle heterotopic ossification requires changes to the skeletal muscle microenvironment.</a> J Bone Miner Res. 26 (6), 1166-1177 (2011).</li>
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</ol>

Gli autori non hanno nulla da rivelare

L'ossificazione eterotopica rappresenta una grave compromissione funzionale affrontata dai pazienti che subiscono traumi, ustioni e procedure muscoloscheletriche invasive. La popolazione più a rischio è costituita dai soldati nei conflitti moderni con gravi lesioni da esplosione dovute a meccanismi come gli ordigni esplosivi improvvisati (IED). 18 L'armatura migliorata e le unità mediche posizionate in avanti consentono una migliore sopravvivenza alle lesioni gravi degli arti. Dopo la stabilizzazione inizia...

L'ossificazione eterotopica (HO) è la formazione di osso ectopico in cui le cellule osteopotenti sono indotte in modo aberrante a formare osso endocondrale al di fuori dello scheletro. Mentre i dettagli del percorso di formazione dell'HO sono ancora in gran parte sconosciuti, un paradigma accettato include tre fattori chiave: un incidente infiammatorio scatenante, una nicchia permissiva e cellule staminali mesenchimali in grado di formare l'osso. 1-3 HO è una comorbilità comune che complica oltre il 60% delle ustioni maggiori, il 65% delle lesioni da combattimento e il 10% dei casi di chirurgia ortopedica invasiva. 4,5 Tuttavia, è spesso difficile prevedere dove si formerà l'HO perché può verificarsi in siti di lesione locale o in luoghi distanti che potrebbero altrimenti rimanere illesi. Questa variabilità nella localizzazione rende difficile intervenire a scopo profilattico per prevenire la formazione di osso reattivo in modo localmente mirato. Esistono anche forme congenite di HO come la fibrodisplasia ossificante progressiva (FOP) in cui i pazienti sono inclini allo sviluppo di HO robusta in risposta a traumi minori o insulti infiammatori. Potenti modelli animali che utilizzano topi transgenici hanno riprodotto questo fenotipo e hanno fornito informazioni sui percorsi molecolari che possono anche essere importanti nell'HO indotta da traumi.6-9 La ricerca traslazionale sulla patogenesi dell'HO non congenita ha utilizzato un'ampia varietà di costrutti che vanno dalla sola lesione all'impianto di materiali e/o cellule osteo-induttive esogene. 10-13
Nel nostro lavoro precedente abbiamo convalidato un modello semplice e affidabile di formazione di HO nei topi che non richiede la somministrazione di alcun materiale esogeno. 14-17 Questo modello ha creato due condizioni chiave per avviare l'HO: trauma locale e infiammazione globale. Ciò è stato ottenuto attraverso l'uso di una tenotomia di Achille (trauma locale) combinata con una lesione da ustione a distanza (infiammazione globale). I topi hanno ricevuto entrambi i trattamenti contemporaneamente e si è scoperto che sviluppavano una robusta quantità di HO che poteva essere analizzata con mezzi istologici, radiologici e molecolari. È interessante notare che le ustioni concomitanti hanno aumentato significativamente la quantità di HO che si è formata e hanno accelerato il suo decorso temporale. L'HO 14-16 si è sviluppata in siti prevedibili intorno al calcagno, all'articolazione della caviglia e alla tibia/perone dell'arto che ha ricevuto la tenotomia. L'affidabilità dello sviluppo di HO in una posizione nota ha permesso un esame mirato delle caratteristiche molecolari e istologiche nelle prime fasi dell'ossificazione ectopica. Ad oggi, il 100% dei topi (oltre 50 animali) con tenotomia e ustioni concomitanti ha sviluppato HO. Inoltre, sono state condotte immagini longitudinali 2D e 3D e analisi spettroscopiche per esaminare il modello di crescita e la composizione biochimica di HO.15,16

<table><tbody><tr><td>C57BL/6 topi</td><td>Jackson Laboratory</td><td>664</td><td>8-10 settimane di età</td></tr><tr><td>Isoflurano Fluriso</td><td>VET one, Boise, ID</td><td>V1 501017</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina &ndash; Buprenex</td><td>Reckitt Benckiser Healthcare</td><td>NDC 12496-0757-1</td><td>0,3 mg/ml soluzione</td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Owens e Minor, Mechanicsville, VA</td><td>2047PVP202</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Suture Vicryl</td><td>Ethicon, Summerville, NJ</td><td>J493</td><td></td></tr><tr><td>Tegaderm Film, 6 cm x 7 cm</td><td>3M</td><td>1624W</td><td>Tagliato a metà per coprire adeguatamente il sito dell'ustione</td></tr><tr><td>&micro; TC - GE eXplore Locus SP</td><td>GE Healthcare Imaging preclinico, Londra, ON, Canada</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Applicazione Microview 2.2 Advanced Bone</td><td>Analysis GE Healthcare Imaging preclinico, Londra, ON, Canada</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

diretta mouse trauma / burn modello di ossificazione eterotopica

Direct Mouse Trauma/Burn Model of Heterotopic Ossification

L'ossificazione eterotopica (HO) è la formazione di osso al di fuori dello scheletro che si forma a seguito di traumi maggiori, ustioni e procedure chirurgiche ortopediche. La maggior parte dei modelli animali utilizzati per studiare l'HO si basa sull'applicazione di sostanze esogene, come la proteina morfogenetica ossea (BMP), i costrutti cellulari esogeni o le mutazioni genetiche nella segnalazione BMP. Sebbene questi modelli siano utili, non riproducono accuratamente gli stati infiammatori che causano la maggior parte dei casi di HO. Qui descriviamo un modello di ustione/tenotomia nei topi che produce in modo affidabile HO focalizzato. Questo protocollo prevede la creazione di un'ustione da contatto a spessore parziale del 30% della superficie corporea totale sulla pelle dorsale e la divisione del tendine d'Achille nel suo punto medio. Affidarsi esclusivamente alla lesione traumatica per indurre l'HO in una posizione prevedibile consente lo studio nel corso del tempo della formazione ossea eterotopica endocondrale solo dai processi fisiologici intrinseci e dall'ambiente. Questo metodo potrebbe rivelarsi determinante per comprendere le vie infiammatorie e osteogeniche coinvolte nell'HO indotta da traumi. Inoltre, poiché l'HO si sviluppa in una posizione e in un andamento temporale prevedibili in questo modello, consente alla ricerca di migliorare le strategie di imaging precoce e le modalità di trattamento per prevenire la formazione di HO.

In questo studio, il protocollo è descritto per il modello precedentemente pubblicata murino di trauma / bruciare indotto HO. 14-17 Questo comporta la creazione di una concomitante lesione muscolo-scheletrico localizzata con un tenotomia Achille e insulto infiammatorio globale, con un spessore parziale ustioni. Ciò provoca la formazione di osso affidabile reattivo al sito tenotomia che può essere seguito con l&#39;imaging seriale. Ad oggi, tutti i topi (più di 50) che hanno sostenuto sia Achille tenotomia e m...

Un modello di ossificazione eterotopica di tenotomia e ustione di Achille consente lo studio affidabile della formazione ossea ectopica indotta da traumi senza l'applicazione di fattori esogeni.

Diretta mouse Trauma / Burn modello di ossificazione eterotopica

Heterotopic ossification (HO) is the formation of bone outside of the skeleton which forms following major trauma, burn injuries, and orthopaedic surgical ...

L'obiettivo generale di questa procedura è indurre la formazione di osso ectopico a seguito di un infortunio traumatico, senza l'applicazione di materiali esogeni. Questo risultato si ottiene innanzitutto creando un infortunio muscolo-scheletrico localizzato. In questo caso, una tenotomia dell'Achille.Nel secondo passaggio, viene indotta una condizione infiammatoria sistemica. In questo caso, viene mostrata una bruciatura da contatto di spessore parziale su un'area superficiale del 30%. Successivamente, nell'area della tenotomia, viene consentito lo sviluppo di ossificazione eterotopica, o HO, nel periodo compreso tra le cinque e le nove settimane successive.Infine, la quantità e la localizzazione dell'osso ectopico possono essere valutate mediante imaging tomografico micro-CT. Il principale vantaggio di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti è che essa presenta un riscontro clinico in questo modello. I topi sviluppano un precursore cartilagineo seguito da formazione ossea eterotopica senza alcuna citochina aggiuntiva e senza ulteriori mutazioni nei topi.Pertanto, riteniamo che ciò permetterà un miglior test di terapie e altre modalità di imaging, poiché questa metodica riproduce in modo fedele il tipo di osso che osserviamo nei pazienti con ossificazione eterotopica. Le implicazioni di questa tecnica riguardano sia la terapia sia la diagnosi dell'HO, in quanto consentono lo studio di potenziali trattamenti per lo sviluppo di osso ectopico prima che avvenga l'ossificazione. Abbiamo avuto per la prima volta l'idea di questo metodo quando abbiamo osservato l'HO in pazienti con gravi ustioni, che si sviluppava in diverse sedi distanti dal sito dell'ustione, e in altri pazienti in corrispondenza di traumi muscoloscheletrici.Dopo aver somministrato l'anestesia, verificare l'assenza di risposta al pizzicamento e somministrare un analgesico. Applicare un unguento sugli occhi di un topo adulto C57BL/6 di otto-dieci settimane. Successivamente, posizionare l'animale su un tappetino riscaldante e utilizzare un rasoio elettrico per rasare accuratamente la zampa posteriore dal tallone al ginocchio.Quindi, partendo dalla spina e proseguendo a sinistra della linea mediana dorsale, rimuovere un'area di almeno due per tre centimetri per poter applicare la lesione da ustione. Una volta rimossi tutti i peli, utilizzare tre passaggi alternati di soluzione di povidone-iodio per pulire l'area chirurgica e la zampa posteriore, quindi indossare l'adeguata attrezzatura di protezione individuale, compresa una maschera facciale, una cuffia per capelli e un camice sterile e guanti sterili.Quindi, utilizzando strumenti sterili, effettuare un'incisione longitudinale lunga 0,5 centimetri lungo l'aspetto mediale del tendine d'Achille sinistro. Quando il tendine è visibile, inserire una lama di un paio di forbici chirurgiche affilate nel piano tissutale al di sotto del tendine e dissezionare lungo il piano fino a raggiungere il punto medio del tendine. Chiudere quindi bruscamente le lame delle forbici per recidere il tendine ed applicare pressione con una garza sterile per ottenere l'emostasi.Dopo aver chiuso l'incisione cutanea con un punto di sutura in Vicryl 5-0, riscaldare un blocco di alluminio di 35 grammi e di dimensioni due per due per tre centimetri a 60 gradi Celsius in un bagno termico. Una volta riscaldato il blocco, appoggiarlo sulla superficie del topo per 17 secondi, avendo cura che l'intera superficie sia a contatto con l'animale. Quindi asciugare la bruciatura dorsale di spessore parziale con una garza e applicare una medicazione in tegaderm; rianimare l'animale somministrando soluzione di Ringer lattato riscaldata mediante iniezione intraperitoneale e sottocutanea.Quindi posizionare il topo in una gabbia individuale per il monitoraggio fino a quando non si sarà completamente ripreso. Per monitorare l'ossificazione eterotopica delle lesioni mediante analisi micro-CT nei punti temporali appropriati dopo una bruciatura dorsale di spessore parziale, fissare il topo anestetizzato sul lettino dello scanner in posizione prona. Fissare saldamente l'arto posteriore al lettino per evitare artefatti dovuti al movimento respiratorio ed includere sotto il topo il fantoccio contenente aria, acqua e idrossiapatite per la calibrazione dell'immagine.Successivamente, aprire il software di analisi ossea e definire una regione di interesse che comprenda entrambi gli arti posteriori dalla giunzione dell'anca in senso prossimale fino alla punta della zampa posteriore in senso distale. Ottenere un'immagine utilizzando i parametri indicati. Quindi tracciare una regione di interesse in ciascuna delle tre camere del fantoccio e inserire la densità media nei campi appropriati del software per calibrare l'immagine in unità di campo Hounsfield.Per ottenere la visione anatomica più chiara, utilizzare lo strumento di selezione nel software per riorientare l'immagine in modo che la tibia dell'arto posteriore sinistro sia parallela all'asse Z. Quindi, partendo dal ginocchio, scorrere in senso distale attraverso le sezioni dell'immagine. Quando si incontra l'osso eterotopico (HO), utilizzare lo strumento spline manuale per creare un'area di interesse intorno all'osso ectopico su una sezione ogni tre o cinque, proseguendo in senso distale verso la zampa, fino a quando l'HO non è stato superato.Quindi, utilizzare lo strumento di estrapolazione per estendere e unire le regioni di interesse in un'unica regione di interesse che comprenda tutti gli HO. Infine, creare una regione di interesse tridimensionale e aprire il menu di analisi, impostando i valori di soglia inferiore e superiore che meglio evidenziano la finestra ossea per calcolare il volume osseo al momento. Tutti i topi che hanno subito sia una tenotomia dell'Achille che una lesione da ustione, come appena dimostrato, hanno sviluppato una quantità misurabile di HO a livello del sito di tenotomia, permettendo di quantificare la formazione di osso ectopico.Il protocollo di micro-TC con immagini calibrate viene utilizzato in ogni punto temporale desiderato. L'aggiunta della lesione da ustione in combinazione con la tenotomia dell'Achille si è rivelata fondamentale nell'indurre un marcato osso eterotopico; infatti, quando entrambe le lesioni si verificano contemporaneamente, si osserva un aumento significativo della quantità di osso eterotopico formatosi a livello del sito di tenotomia rispetto alla sola tenotomia dell'Achille. Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere eseguita in 10 minuti o meno per animale, se effettuata correttamente.Nel tentativo di eseguire questa procedura, è importante ricordare che tutti i tendini posteriori devono essere recisi completamente. Dopo questa procedura, possiamo utilizzare metodiche di imaging come la spettroscopia RO, la bioluminescenza o la tomografia computerizzata per valutare la quantità di osso formatasi e l'effetto di determinati farmaci. Potremmo inoltre ricorrere all'istologia, all'immunostorichimica e all'immunofluorescenza per analizzare i meccanismi di segnalazione effettivi alla base dello sviluppo dell'ossificazione eterotopica e del modo in cui i nostri farmaci agiscono.

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JoVE Journal

Medicine

Medicina

Fonte: Wang, Y., et al. In vivo Indagine della terapia antimicrobica con luce blu per infezioni da ustioni da Acinetobacter baumannii multi-resistente a farmaci utilizzando immagini a bioluminescenza. J. Vis. Esp. (2017)Questo video mostra come stabilire un'infezione da ustioni in un modello murino applicando un blocco di ottone riscaldato seguito da un inoculo batterico patogeno. I batteri colonizzano la matrice extracellulare esposta e formano un biofilm, permettendo studi in vivo sulle...

Stabilire un modello murino delle infezioni da ustioni con batteri patogeni

Vi presentiamo un modello di osteogenesi di distrazione tibial del topo sviluppato utilizzando un distrattore su misura. L'uso di un mouse come un obiettivo di analisi è vantaggioso per far progredire la ricerca.

Un modello di osteogenesi di distrazione del topo

Qui, presentiamo un protocollo di amputazione della falange terminale dei topi adulti per studiare la formazione di blastema mammifero e l'ossificazione intramembranosa, analizzata dall'immunohistochimica fluorescente e dalla tomografia microcalcolata in vivo sequenziale.

Amputazione e rigenerazione delle cifre del mouse adulto: un modello semplice per indagare sulla formazione del Blastema mammario e sull'ossificazione intramembranosa

Lo scopo di questo studio era quello di sviluppare un modello murino di guarigione delle ferite da ustione. Un'ustione termica è stata indotta sulla pelle dorsale dei topi utilizzando un modello di ottone preriscaldato. Il tessuto bruciato è stato disretto e sovrapposto con un innesto cutaneo raccolto dalla coda di un topo donatore geneticamente simile.

Un modello Murine di una ferita da ustione ricostruita con un innesto di pelle allogenica

Un modello che imiti lo scenario clinico delle ustioni e delle infezioni è necessario per promuovere la ricerca sulle ustioni. Il presente protocollo dimostra un modello semplice e riproducibile di infezione da ustione da ratto paragonabile a quello dell'uomo. Ciò facilita lo studio delle ustioni e delle infezioni successive all'ustione per lo sviluppo di nuovi trattamenti antibiotici topici.

Modello di ratto burn per studiare l'ustione termica cutanea a tutto spessore e l'infezione

Questo protocollo si concentra sulla neovascolarizzazione corneale indotta da ustioni alcaline nei topi. Il metodo genera un modello di malattia corneale riproducibile e controllabile per studiare l'angiogenesi patologica e i meccanismi molecolari associati e per testare nuovi agenti farmacologici per prevenire la neovascolarizzazione corneale.

Un modello murino per la neovascolarizzazione corneale mediante ustione alcalina

Questo protocollo spiegherà come stabilire un modello murino di cicatrici ipertrofiche che aumenta la segnalazione di meccanotrasduzione per simulare cicatrici simili a quelle umane. Questo metodo prevede l'aumento della tensione meccanica attraverso un'incisione di guarigione in un topo e l'utilizzo di un dispositivo specializzato per creare un tessuto cicatriziale riproducibile ed eccessivo per analisi istologiche e bioinformatiche dettagliate.

Un modello murino di cicatrici ipertrofiche simili a quelle umane guidate dalla meccanotrasduzione

Viene presentato un protocollo semplificato per stabilire un modello di guarigione delle ferite da ustione nei topi utilizzando un dispositivo di riscaldamento digitale. I siti sperimentali a scacchiera creati sulla pelle facilitano ulteriori analisi funzionali per il test di guarigione delle ferite.

Modello di guarigione delle ferite da ustione simile a una scacchiera di topi basato su un dispositivo di riscaldamento digitale

Presentiamo un modello murino riproducibile di allotrapianto composito vascolarizzato eterotopo da arto posteriore a collo. Questo protocollo supermicrochirurgico, che prevede anastomosi vasali da 0,3-0,5 mm, integra la guida del filamento di nylon e la cuffia venosa. Fornisce una piattaforma affidabile per studi traslazionali su tolleranza, lesioni ischemiche-reperfusione e meccanismi immunologici nell'allotrapiante composito vascolarizato.

Trapianto eterotopico da arto posteriore a collo nel topo: un modello supermicrochirurgico di allotrapianto composito vascolarizzato

È stata dimostrata una tecnica per la procedura microchirurgica per il trapianto eterotopico di cuori nei topi, compresi i metodi semplificati per il prelievo del donatore e l'anastomosi del vaso ricevente.

Un metodo modificato per eterotopica mouse Cuore Trapianto

Scopri un modello di trauma su topo per studiare l'ossificazione eterotopica mediante tenotomia del tendine di Achille e ustione parziale. Questo metodo permette di indagare la formazione ossea ectopica senza fattori esogeni.

Diretta mouse Trauma / Burn modello di ossificazione eterotopica

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