Protocolli per Robust erbicidi Test della resistenza in diversi Weed Specie

L'obiettivo generale di questa procedura è testare e confermare la resistenza agli erbicidi in un'ampia gamma di specie di erbe infestanti ed erbicidi, nonché dedurre i livelli di resistenza agli erbicidi. Ciò si ottiene rompendo prima la dormienza dei semi raccolti da piante che erano sopravvissute a un trattamento erbicida per ottenere la germinazione simultanea e l'emergenza delle piantine. È necessario un periodo di vernalizzazione dei semi che va da pochi giorni a più di una settimana.

Il secondo passo consiste nel versare un mezzo a coclea con nitrato di potassio in piatti di plastica. I semi di Vern vengono quindi posti sulla coclea solidificata e le piastre vengono trasferite in una camera di germinazione con le condizioni ottimali per ogni specie di infestante. Successivamente, da 15 a 20 piantine vengono trapiantate in vassoi di plastica riempiti con un terriccio standard.

A ciascun vassoio viene assegnato un codice a barre, con tutte le informazioni per la sua identificazione univoca, e i vassoi vengono collocati in una serra riscaldata fino a quando le piantine raggiungono lo stadio di due o tre foglie. Il passaggio finale è il trattamento erbicida utilizzando uno spruzzatore da banco di precisione, tutti gli erbicidi vengono applicati come formulazioni commerciali con tensioattivi raccomandati a due dosi raccomandate sul campo e tre volte che tre o quattro settimane dopo il trattamento, viene eseguita la valutazione finale. Un lettore di codici a barre viene utilizzato per registrare il numero di piante sopravvissute e la biomassa stimata visiva per unità sperimentale.

I dati vengono quindi scaricati in un computer e analizzati per determinare lo stato di resistenza agli erbicidi. Il vantaggio principale di questo metodo rispetto ai test di screening diagnostico in vivo o in vitro è legato alla sua robustezza e flessibilità. In altre parole, il metodo è affidabile e può essere facilmente adattato a un'ampia gamma di specie attraverso piccoli adattamenti.

Questo metodo aiuta a rispondere a domande chiave relative allo studio e alla gestione delle popolazioni di erbe infestanti resistenti agli erbicidi nei campi CRO, come il modello e il livello di resistenza. Consente inoltre di pianificare correttamente ulteriori fasi sperimentali, come gli esperimenti di risposta. Generalmente i ricercatori che si avvicinano per la prima volta ai test di resistenza agli erbicidi avranno difficoltà a causa dei numerosi passaggi e aspetti che devono essere considerati e adattati alle specifiche condizioni sperimentali.

Inizia raccogliendo un campione di semi da una specie alla volta e assegnando un codice univoco. Pulite i semi eliminando la pula e svuotando i semi. Compila un form per ogni campione indicando il codice univoco assegnato.

Nome della specie, data di raccolta, coordinate GPS, comune, nome dell'agricoltore, dimensioni del campo, livello di infestazione, erbicidi per colture utilizzati durante la stagione e registrazioni storiche del campo. Conserva i semi in sacchetti di carta non sigillati etichettati con il codice univoco assegnato. Lasciare evaporare l'umidità, ma non esporre i semi a temperature elevate o a sbalzi di temperatura estremi.

Per evitare l'induzione della dormienza secondaria. Conserva i semi puliti a quattro gradi Celsius in una stanza buia per consentire la vernalizzazione. Metti dell'acqua deionizzata in piatti di plastica.

Tagliate due dischi e una striscia di carta da filtro, che attraverso i capillari formeranno un ponte tra l'acqua e i due dischi. Immergere la carta da filtro in acqua e metterla nei piatti di plastica. Quindi posizionare i semi essiccati all'aria sulla carta.

Trasferire i piatti di plastica a quattro gradi Celsius per il periodo di tempo richiesto, a seconda della specie. Successivamente, preparare una soluzione di coclea allo 0,6% contenente nitrato di potassio allo 0,1% utilizzando acqua deionizzata, sciogliere la coclea in un forno a microonde e versare la soluzione della coclea in piatti di plastica. Una volta che il substrato si è raffreddato, posizionare i semi di Vern da far germogliare sulla coclea solidificata.

Metti i piatti di plastica in un armadio di germinazione La durata della vernalizzazione, così come le condizioni di luce e temperatura variano a seconda della specie di erbaccia. Il trapianto invece della cucitura diretta consente di ottenere un popolamento uniforme di piante allo stesso stadio di crescita, che è un presupposto importante per ottimizzare le prestazioni del trattamento erbicida Trapiantare da 15 a 20 piantine in vassoi di plastica riempiti con un terriccio standard di 60% terriccio limoso, terriccio, 15% sabbia, 15% perlite agricola, e 10% torba. Identificare ogni vassoio con un codice a barre, comprese tutte le informazioni per il codice di identificazione univoco della popolazione erbicida da testare, il numero di replica e il numero progressivo del vassoio.

Posiziona i vassoi in una serra riscaldata e innaffia le piante secondo necessità per mantenere il substrato alla capacità del campo o quasi. La temperatura di crescita varia a seconda della specie infestante per gli erbicidi post-emergenza. Gli impianti di irrorazione, quando raggiungono lo stadio di due o tre foglie, preparano la soluzione tensioattiva in massa secondo le istruzioni dell'etichetta, la concentrazione finale è solitamente espressa come percentuale del volume finale o il volume deve essere distribuito per unità di superficie?

Calcolare la quantità di prodotto commerciale da sciogliere nella soluzione tensioattiva. Utilizzando questa equazione, la dose di erbicida viene calcolata moltiplicando la dose di campo raccomandata per la dose massima testata e il volume finale della soluzione diviso per il volume erogato dall'irroratrice da banco. Preparare la soluzione erbicida più concentrata Innanzitutto, diluire la soluzione erbicida tre volte per preparare la soluzione meno concentrata.

Questa procedura riduce la possibilità di commettere errori durante la pesatura o il pipettaggio degli erbicidi. Soluzione erbicida. La concentrazione è espressa in volume da distribuire per unità di superficie.

Iniziare la sequenza di trattamento con una dose di erbicida più bassa. In questo modo, non è necessario lavare la cabina di spruzzatura tra due trattamenti con lo stesso erbicida. Distribuire la soluzione di erbicida utilizzando un'irroratrice da banco di precisione, erogando 300 litri per ettaro ad una pressione di 215 kilopascal e una velocità di 0,75 metri al secondo con una barra dotata di tre ugelli idraulici a ventaglio piatto.

Lavare la cabina di spruzzatura due volte quando si cambia l'erbicida, usando l'1% di candeggina e poi risciacquare. Effettuare la valutazione tre o quattro settimane dopo il trattamento a seconda del record di erbicidi testati, del numero di piante che sopravvivono al trattamento e della biomassa stimata visiva o VEB utilizzando un lettore di codici a barre, che identifica automaticamente ogni vassoio. Le piante sono valutate come morte se non mostrano una crescita attiva indipendentemente dal colore o da altro aspetto.

Il VEB è ottenuto attraverso un confronto visivo della biomassa vegetale tra un controllo trattato e uno non trattato della stessa popolazione. Ad ogni vassoio trattato viene assegnato un punteggio che va da 10 per le piante non colpite dal diserbante a zero quando le piante sono chiaramente morte. Valutare l'efficacia generale del trattamento includendo una popolazione suscettibile in tutti gli esperimenti, come una popolazione raccolta in un sito che non è mai stata trattata o raramente trattata con erbicidi.

Esprimere la sopravvivenza delle piante come percentuale del numero di piante trattate contate appena prima del trattamento con erbicida e calcolare l'errore standard. Il valore di permeazione attribuisce le popolazioni a quattro categorie in base ai risultati ottenuti dai trattamenti con due dosi di erbicida sensibili quando meno del 5% delle piante sopravvive alla dose di erbicida. Una x leggermente resistente quando i sopravvissuti variavano dal 5% al 20% alla dose di erbicida.

Una x resistente quando più del 20% delle piante sopravvive alla dose di erbicida. Una x e altamente resistente quando i sopravvissuti sono più del 20% alla dose di erbicida una x e più del 10% alla dose di erbicida. Vengono mostrati tre risultati rappresentativi di un trattamento erbicida con panolam su quattro popolazioni di iopa.

Il controllo della suscettibilità è stato completamente controllato, mentre la popolazione 1410 è stata classificata come leggermente resistente perché meno del 20% delle piante è sopravvissuto. La popolazione 1411 è stata controllata alla dose tre x, ma la sopravvivenza delle piante alla dose uno x è risultata superiore al 20% e quindi è stata attribuita al nostro status. Infine, la popolazione 1412 non è stata controllata né alla dose di campo raccomandata una x né tre volte tanto, quindi è stata assegnata alla categoria altamente resistente.

Un secondo esempio sulla stima visiva della biomassa in impianti pop o rehas trattati con trien Ron metile è mostrato qui. Al controllo non trattato viene assegnato un punteggio di 10, mentre le vaschette con impianti completamente controllati hanno un VEB pari a zero. Ai vassoi viene assegnato un punteggio intermedio di cinque.

Avendo una biomassa vegetale totale, che è la metà delle vaschette delle piante non trattate con piante aventi una biomassa paragonabile al controllo non trattato dove le piante non sono state interessate da trattamenti erbicidi e quindi risultate altamente resistenti, hanno un VEB di 10. Mentre si tenta questa procedura, è importante ricordare che la qualità dei semi di erbe infestanti, che avrebbero dovuto essere raccolti a maturità e poi ripristinati, ha un forte impatto sul successo degli esperimenti che seguono questa procedura. Altri metodi, come quelli di risposta, possono essere eseguiti per rispondere con precisione a ulteriori domande relative al livello di resistenza.

Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come affrontare i test di resistenza agli erbicidi e di come adattare i diversi passaggi alle diverse specie di erbe infestanti. In particolare, la frenatura dell'CY del seme e la germinazione del seme. Non dimenticare che lavorare con erbicidi o acidi concentrati può essere estremamente pericoloso in precauzioni come indossare maschere, guanti e altri dispositivi di protezione individuale durante l'esecuzione di questa procedura.