Name: Un All-laser Endothelial Transplant (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Impara la tecnica di trapianto endoteliale completamente laser utilizzando un laser femtosecondo per la preparazione del tessuto donatore. Questo metodo minimamente invasivo riduce il rischio di dislocazione del lembo post-operatorio.

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Gli autori desiderano ringraziare FORTE Progetto, finanziato dalla Regione Toscana (POR CReO FESR 2007-2013, Bando Unico R &amp; S 2012), il 7 ° PQ ECHORD UE ++ Experiment LA-ROSES che parzialmente supportate le attività di ricerca, e il 7 ° PQ BiophotonicPlus Progetto &quot;LITE&quot; concesso dalla Regione Toscana.

Lo studio è stato condotto con l&#39;prospetticamente approvazione del comitato etico dell&#39;ospedale; il consenso informato è stato ottenuto. Lo studio è stato in adesione ai principi della Dichiarazione di Helsinki. 1. donatori Endotelio Preparazione <ol><li> Utilizzare una cornea del donatore, come predisposto dalla banca degli occhi locale a temperatura ambiente. </li><li> In sala operatoria, estrarre la cornea del donatore dal suo contenitore consegna e messo a parte la soluzione per la conservazione dei tessuti e la nutrizione che viene utilizzato per il trasporto della cornea. </li><li> Posizionare il donatore corneo-sclerale bordo su una camera anteriore artificiale, in cui un liquido può fluire e creare una pressione variabile; coprire la cornea con la testa di fissaggio del tessuto. </li><li> Collegare camera anteriore artificiale (AAC) attraverso un connettore a 3 vie per una siringa riempita con la conservazione cornea e nutrizione liquido. </li><li> Utilizzare l&#39;anello di compressione per tenere il fermo saldamente in posizione. </li><li> Utilizzare il syringe collegato alla AAC di mantenere la pressione intracameral: riempire la camera anteriore con la soluzione di conservazione del tessuto fino a raggiungere la pressione ottimale (vedi 1.7). Chiudere il connettore. </li><li> Testare la pressione all&#39;interno della camera anteriore con un dito. Modificare la pressione all&#39;interno fino a raggiungere la pressione interna destra (nell&#39;intervallo 60-70 mmHg). Chiudere il connettore a 3 vie. </li><li> Misurare lo spessore della cornea del donatore con Optical Coherence Thomography (OCT). Mantenere la camera anteriore con quella cornea in posizione fissa davanti ottiche dello strumento e poi prendere una acquisizione completa spessore-OCT. </li></ol> 2. laser a femtosecondi Preparazione di donatori Endotelio <ol><li> Eseguire applanazione della cornea del donatore con il dispositivo laser a femtosecondi. Utilizzare il laser femtosec per tagliare il tessuto del donatore con tre successivi tagli: taglio laterale posteriore, pieno lamellare e anteriore taglio laterale. Impostare i seguenti parametri per le tre tagli.<ol><li> Per il taglio completo lamellare (modello raster, iniziare), impostare la profondità di taglio corrispondente al punto più sottile della cornea del donatore (misurata con il OCT come descritto in 1.8), sempre sottraendo 95 micron. Impostare l&#39;energia dell&#39;impulso nell&#39;intervallo 0,8-0,9 μJ (a seconda della profondità di lavoro). Impostare il diametro a 8,7 mm. Impostare la separazione posto tangenziale al 2 micron. Impostare la separazione posto radiale a 2 micron. </li><li> Per il taglio laterale anteriore, impostare la profondità posteriore 30 micron più profonda della precedente completo taglio lamellare. Impostare l&#39;energia dell&#39;impulso a 2.10 μJ; il diametro a 8,6 mm, la separazione posto a 3 micron, mentre la separazione strato a 3 micron. </li><li> Per il taglio laterale posteriore, individuare la profondità anteriore del lato posteriore tagliato 30 micron anteriormente a pieno taglio lamellare. Impostare la profondità posteriore al 900 micron. Impostare l&#39;energia dell&#39;impulso a 2.10 μJ; il diametro a 8,3 mm, la separazione posto a 2 micron; la separazione dello strato di 2 micron. </li></ol></li&gt; </ol> 3. Destinatario Preparazione Eye <ol><li> Preparare il paziente per un intervento chirurgico. Effettuare uno 4,00 millimetri incisione corneale alle ore 12 con un 4,0 millimetri precalibrati lama. Eseguire una paracentesi limbari con una lama pretarata 1,2 mm, posta a 02:00. Fare un altro paracentesi limbari a ore 6 con un coltello pugnalata di 30 °. </li><li> Inserire un mantenitore camera anteriore nella camera anteriore del paziente, attraverso le 2 paracentesi o&#39;clock. </li><li> Effettuare una diametro 8,2 millimetri descemetorexis circolare con il gancio dedicato. </li><li> Striscia la membrana Descemet ed endotelio dallo stroma posteriore e rimuovere i tessuti con un gancio Descemet. </li></ol> 4. Chromophore Preparazione <ol><li> Mettere 1 mg di indocianina Polvere verde in una provetta da 1,5 ml microcentrifuga. </li><li> Aggiungi 9 mg di acqua sterile (la soluzione di acqua ICG è del 10% w / w). </li><li> Mescolare manualmente la polvere ICG e l&#39;acqua con un agitatore di metallo. </li&gt; </ol> 5. La colorazione di donatori Endotelio <ol><li> Mettere l&#39;endotelio donatore sulla parte più larga di una Busin iniettore, con il lato interno a contatto con la superficie dell&#39;iniettore. </li><li> Macchiare il lato interno di endotelio donatore con la soluzione cromoforo, nella sua parte periferica, utilizzando una spatola. Il tessuto tinto corretto ha un colore verdastro omogenea. Attendere 3 minuti prima di iniziare la fase 5.3. </li><li> Tirare l&#39;endotelio dei donatori sulla parte anteriore del Busin iniettore, laminati. </li></ol> 6. Inserimento della Endotelio Donor <ol><li> Afferrare e inserire l&#39;endotelio donatore piegato utilizzando un atraumatica pinza coassiali per endoteliale lenticule. </li><li> Rimuovere il manutentore camera anteriore. </li><li> Suturare l&#39;incisione corneale e la paracentesi (eseguita al passo 3.1) con un unico stich Nylon 10.0. </li><li> Iniettare una bolla d&#39;aria per aprire il tessuto donatore e premerlo contro la cornea ricevente. La bolla d&#39;aria deve completely riempire lo spazio camera anteriore. </li></ol> 7. saldatura laser <ol><li> Posizionare il lenticule donatore nel centro della cornea ricevente, dall&#39;interno di un gancio o movimentazione dell&#39;aria bolla dall&#39;esterno della cornea con una spatola. </li><li> Utilizzare un diodo laser che emette a 810 nm, dotato di un diametro di 300 micron nucleo della fibra ottica sterile, con 0,22 come apertura numerica (NA). </li><li> Tenere la punta della fibra di fuori del bulbo oculare, e fornire la luce laser verso l&#39;endotelio macchiato, attraverso il tessuto corneale trasparente. La punta della fibra è in configurazione senza contatto. </li><li> Utilizzare le seguenti impostazioni per il laser: modalità di emissione di singolo punto, 70-80 durata dell&#39;impulso msec, 35-40 mJ per impulso. He-Ne puntamento del fascio su. </li><li> Invia spot laser singoli alla periferia macchiato dell&#39;endotelio donatore. Fornire i punti in sequenza: l&#39;aspetto finale è un anello di punti in periferia del lenticule donatore. La distanza tra due AdjaCentro spot cent è il doppio di un diametro dello spot. </li><li> Applicare una lente a contatto sull&#39;occhio del paziente, insieme a 0,3% e 0,1% tobramicina desametasone sospensione oftalmica. </li></ol>

<ol><li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li>
<li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li>
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<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-laser%27+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XXII%22%5BJournal%5D)">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li>
<li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery%3A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li>
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<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27anvil%27+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li>
<li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+penetrating+keratoplasty%3A+one+year%E2%80%99s+results+in+patients%2C+using+a+laser-welded+%E2%80%9Canvil%E2%80%9D-profiled+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year’s results in patients, using a laser-welded “anvil”-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li>
</ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti.

Il &quot;tutto laser&quot; trapianto endoteliale è un approccio originale per il trapianto di cornea mini-invasiva. Tutte le procedure descritte nel protocollo sono state eseguite in sala operatoria, osservando la procedura igienica e sterilizzazione che sono pratiche comuni durante interventi chirurgici, come l&#39;uso di sterilizzato guanti, camice, maschera e cappello. La soluzione è stata preparata ICG in sala operatoria, appena prima della sua applicazione nella colorazione endotelio do...

In questo lavoro presentiamo un approccio originale alla cheratoplastica endoteliale, basato sull&#39;uso di un laser a femtosecondi per preparare tessuto donatore e un quasi diodo laser infrarosso per saldare sul letto destinatario. Misurazione intraoperatoria della cornea del donatore è necessario progettare correttamente le dimensioni del tessuto donatore. Cheratoplastica endoteliale è stato proposto negli ultimi anni per sostituire cheratoplastica perforante nel trattamento endoteliale 1,2 malattia. Il vantaggio principale di questa tecnica è un veloce recupero visivo, rispetto al cheratoplastica perforante, anestesia ridotta durante l&#39;intervento chirurgico, un ridotto rischio di rigetto del trapianto e la preservazione dell&#39;integrità dell&#39;occhio. Il fattore di rischio principale è postoperatorio lenticule donatore lussazione. La tecnica standard viene eseguita inserendo l&#39;endotelio donatore nella sua posizione finale in cui viene mantenuta mediante iniezione di una bolla d&#39;aria: suture vengono utilizzati a causa del Chara meccanica, biofisica e dimensionalicteristics dell&#39;endotelio. Inoltre, il recupero acuità visiva può essere limitato soprattutto a causa di una mancata corrispondenza tra tessuti donatore e ricevente a causa di un tessuto spesso trapiantato. Qui vi presentiamo una procedura nello svolgimento cheratoplastica endoteliale in grado di superare questi problemi principali. L&#39;endotelio donatore può essere assicurata nella sua posizione finale mediante l&#39;uso della tecnica di saldatura laser. Questo è un processo fototermico controllata e localizzata: può essere indotta all&#39;interfaccia donatore / ricevente. E &#39;stata studiata negli ultimi dieci anni e proposto in cheratoplastica perforante e nel trapianto di endotelio 3-5. Il vicino luce infrarossa (lunghezza d&#39;onda: 810 nm) emessa da un laser a bassa potenza diodo è consegnato verso il tessuto biologico al sito della ferita. La cornea è naturalmente trasparente a questa lunghezza d&#39;onda: per rendere questo tessuto di assorbire la luce laser, è necessario macchiare con un cromoforo. Il colorante è proposto un saturate sterilesoluzione acquosa d di indocianina verde (ICG). Abbiamo dimostrato che quando il tessuto corneale è correttamente macchiata di questa preparazione ICG, mostra un picco di assorbimento a 810 nm 6. Inoltre, ICG è ampiamente usato in diagnostica clinica e la sua sicurezza è stata già dimostrata in soggetti umani. La cornea colorato assorbe l&#39;energia luminosa laser a diodi e l&#39;effetto risultante principale è un aumento di temperatura controllata al sito di saldatura. Nessun effetti termici sono indotte nei tessuti non marcate. Il miglioramento della temperatura induce denaturazione termica reversibile nel collagene stromale, con una closuring immediata delle pareti della ferita sul raffreddamento. Questo effetto di saldatura laser è stato in primo luogo dimostrato nella chirurgia della cataratta 7,8 e cheratoplastica penetrante 9,10. Un approccio ottimizzato che presentiamo in questo articolo è stato studiato per l&#39;applicazione in cheratoplastica endoteliale. Nella chirurgia proposto, spot laser singoli (decine durata di msec) are consegnato al tessuto, con conseguente effetto fototermico localizzata nella dimensione spot (alcune centinaia di micron di diametro): l&#39;effetto indotto è una saldatura laser disco, costituito da una fotocoagulazione del collagene confinato all&#39;interfaccia donatore / host. Il risultato della denaturazione collagene nel sito saldato è una forte adesione tra i tessuti donatore e ospite, fornendo così un effetto di sutura che è impossibile ottenere con tecniche standard (punti). Il tessuto riacquista il suo aspetto naturale in un breve follow-up (1 mese) e l&#39;adesione tra i tessuti del donatore / ospite è migliorata dalla saldatura previsto nella fase iniziale della fase di guarigione. Per evitare l&#39;altro rischio principale della cheratoplastica endoteliale, cioè il trapianto di un tessuto donatore spessa, intrachirurgica coerenza ottica tomografia (OCT) è utilizzato: un dispositivo commerciale misura lo spessore della cornea del donatore, in modo che un profilo corretto del taglio può essere progettato con illaser femtosec. La proposta di &quot;tutto laser&quot; trapianto endoteliale sembra quindi migliorare i risultati clinici di questo tipo di chirurgia mini-invasiva.

<table><tbody><tr><td>Indocianina Green</td><td>Pulsion Medical Systems, Germania</td><td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td><td>Prodotto alternativo: IC-GREEN, Akorn&nbsp; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td></tr><tr><td>Laser a femtosecondi&nbsp;</td><td>Abbott Medical Optics,&nbsp; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, USA</td><td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td><td></td></tr><tr><td>Tomografia a coerenza ottica (OCT)</td><td>Carl-Zeiss Meditec, Dublino, California- Stati Uniti (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td><td>Visante</td><td></td></tr><tr><td>Diode Laser</td><td>E.l.En. Gruppo s.pa., Calenzano-FI, Italia (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td><td>Mod. WELD 800</td><td></td></tr><tr><td>Camera Anteriore Artificiale</td><td>CORONET, prodotti per innesti corneali. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, Regno Unito</td><td>Camera anteriore artificiale (A.A.C.) con teste di ritenzione dei tessuti grandi e piccole. Codice 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial_ anterior_chamber.html)</td><td></td></tr><tr><td>Soluzione per la conservazione e la nutrizione dei tessuti&nbsp; &nbsp;</td><td>ale. CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicolà - PD &nbsp; ITALIA</td><td>Carry-C medium per deturgescenza corneale e trasporto a temperatura ambiente - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&deg;-c-eb/carry-c-eb)</td><td></td></tr></tbody></table>

un &quot;all-laser&quot; endothelial transplant

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

La cheratoplastica endoteliale assistita "all laser" è una procedura che viene eseguita con un laser a femtosecondi utilizzato per tagliare il tessuto donatore a una profondità prevista e un laser a diodi nel vicino infrarosso per saldare il tessuto corneale. La tecnica proposta permette di raggiungere i tre obiettivi principali della cheratoplastica endoteliale: un controllo preciso dello spessore del tessuto donatore; il suo facile inserimento nel letto ricevente e un ridotto rischio di lussazione del lenticolo del donatore. Lo spessore della cornea del donatore viene misurato in sala operatoria con la tomografia a coerenza ottica (OCT), al fine di progettare correttamente le dimensioni del tessuto del donatore. Un laser a femtosecondi viene utilizzato per tagliare la cornea del donatore. L'occhio ricevente viene preparato mediante strippaggio manuale della membrana desemetica. L'endotelio del donatore viene inserito in un iniettore di Busin, il lato interno periferico viene colorato con un cromoforo appropriato (una soluzione acquosa di verde indociania) e quindi viene tirato nella camera anteriore. Il tessuto trapiantato viene posizionato nella posizione finale e corretta e quindi viene indotta la saldatura laser a diodi dall'esterno del bulbo oculare. La procedura è stata eseguita su più di 15 pazienti evidenziando un miglioramento delle prestazioni chirurgiche, con un buon recupero dell'acuità visiva e una riduzione dell'evento di lussazione del lenticolo del donatore.

Il &quot;tutto laser&quot; intervento chirurgico viene proposto di effettuare il trapianto di cornea mini-invasiva. La procedura è facile da eseguire (vedi Figura 1): rispetto ad un trapianto endoteliale normale solo le fasi di misurare lo spessore corneale, la colorazione del tessuto donatore e fornire la luce laser vengono aggiunti. I vantaggi ottenuti compensano ampiamente un aumentato tempo chirurgico di pochi minuti. L&#39;uso di intraoperatoria Office per misurare lo spessore cornea del donatore e...

Nel trapianto endoteliale viene proposta una procedura completamente laser. La tecnica chirurgica si basa sull'utilizzo di un laser a femtosecondi per preparare il tessuto donatore. La tecnica di saldatura laser viene quindi utilizzata per fissare l'endotelio del donatore nella posizione corretta.

Un &quot;All-laser&quot; Endothelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

L'obiettivo generale di questa procedura è quello di eseguire un intervento chirurgico minimamente invasivo completamente laser per il trapianto di sottili intese corneali. Ciò si ottiene misurando prima la cornea del donatore e tagliandola con un secondo laser Femto. Successivamente, vengono praticate incisioni nel letto corneale del ricevente e la membrana del desme e l'endotelio vengono rimossi in preparazione per il tessuto donatore.Quindi il lembo donatore viene colorato e inserito nella sua posizione finale. Infine, l'acue prestato dal donatore viene saldato al laser alla cornea ricevente. In definitiva, l'adesione dell'endotelio del donatore può essere osservata un giorno dopo l'intervento chirurgico.Il principale miglioramento di questa tecnica rispetto al metodo esistente come standard è che con l'uso del laser il rischio di lussazione del lembo è ridotto dopo l'intervento chirurgico. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla chirurgia del trapianto di cornea perché l'applicazione della procedura di saldatura laser è stata studiata anche in neurochirurgia e otorinolaringoiatria. In generale, le persone nuove a questo metodo non avranno difficoltà perché è molto f

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Determinare l'attecchimento delle cellule del donatore rappresenta una sfida in modelli di trapianto di midollo osseo di topo che non hanno ben definiti marcatori fenotipici. Abbiamo descritto una metodologia per quantificare maschio attecchimento delle cellule del donatore nel topo femmina riceventi di trapianto. Questo metodo può essere utilizzato in tutti i ceppi di topo per lo studio delle funzioni HSC.

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Impara la tecnica di trapianto endoteliale completamente laser utilizzando un laser femtosecondo per la preparazione del tessuto donatore. Questo metodo minimamente invasivo riduce il rischio di dislocazione del lembo post-operatorio.

Un "All-laser" Endothelial Transplant

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