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DOI: 10.3791/52971-v
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This study presents a method for microfluidic deposition of genipin and fibronectin on PDMS substrates, enhancing the viability of vascular smooth muscle cell-dense tissues. The approach integrates vascular muscular thin film technology to assess vascular contractility over relevant disease time courses.
Presentiamo un metodo per la deposizione microfluidica di genipina e fibronectina modellate su substrati PDMS, consentendo una maggiore vitalità di tessuti densi di cellule muscolari lisce vascolari. Questo metodo di fabbricazione dei tessuti è combinato con la precedente tecnologia a film sottile muscolare vascolare per misurare la contrattilità vascolare nel corso del tempo rilevante per la malattia.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di sviluppare un modello in vitro della funzione contrattile della muscolatura liscia che possa essere utilizzato per studiare i meccanismi delle disfunzioni vascolari, come i vasospasmi cerebrali, su scale temporali rilevanti per la malattia. Ciò si ottiene con film sottili muscolari vascolari a lungo termine preparando prima i substrati elastomerici mediante rivestimento in serie con una striscia di piam seguito da PDMS. Il secondo passo consiste nell'utilizzare un dispositivo di deposizione microfluidica per depositare in serie la genina e la fibronectina sulla superficie.
Al fine di fornire indicazioni per l'auto-organizzazione dei tessuti su film sottili vascolari e muscolari, il passaggio finale consiste nell'eseguire un test di contrattilità imprecando contro film sottili vascolari e muscolari che inducono contrazione e contrazione rilassante durante l'imaging del campione. In definitiva, questo approccio produce tessuti che mantengono la fedeltà strutturale e la contrattilità funzionale per un massimo di due settimane in coltura. Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ai metodi esistenti come i film sottili muscolari stampati a micro contatto, è che l'integrità del tessuto e la contrattilità funzionale vengono mantenute per settimane, mentre i tessuti costruiti con i metodi precedenti iniziano a degradarsi dopo tre o quattro giorni.
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