Name: Tromboembolica cronica Ipertensione polmonare e valutazione dei ventricolare destra Funzione nel Maialino (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-11-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 22 s
Description: Scopri come creare un modello di ipertensione polmonare tromboembolica cronica nei maialini per studiare la disfunzione del ventricolo destro. Questo metodo consente di analizzare i meccanismi patofisiologici e valutare nuove terapie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Gli autori ringraziano la squadra presso il Laboratorio di ricerca chirurgica Marie Lannelongue ospedale, per l&#39;assistenza tecnica e la cura degli animali. Il sistema ad ultrasuoni cardiaco VividE9 (General Electric Medical System) è stato finanziato da una sovvenzione della Cardio-vasculaire-Obésité Domaine D&#39;Intérêt Maggiore (CODDIM cod 100.158, RégionIle-de-France, Francia).

Questo protocollo è stato approvato dal comitato etico locale sulla sperimentazione animale e dal Comitato Istituzionale sul benessere degli animali della nostra istituzione. Tutti gli animali hanno ricevuto assistenza umanitaria in conformità ai &quot;Principi di laboratorio cura degli animali&quot; formulate dalla Società Nazionale per la ricerca medica e la &quot;Guida per la cura e l&#39;uso di animali da laboratorio&quot; elaborata dall&#39;Istituto di Laboratorio risorse animali e pubblicati dal National Institutes of Health (NIH Publication No. 86-23, rivisto 1996). Considerazioni generali: Tutti gli animali devono essere trattati con rispetto, secondo le regole delle 3R (Centro Nazionale per la raffinatezza Sostituzione e riduzione degli animali nella ricerca). Le procedure chirurgiche devono essere eseguite con una rigorosa sterilità e nello stesso modo che per gli esseri umani. Tutti i dispositivi medici devono essere sterili. 1. Anestesia protocollo NOTA: Grande Whitsono stati utilizzati e suinetti di peso 20 Kg (3 settimane di età). Ipertensione polmonare è stata indotta progressivamente. Il primo passo coinvolto un arteria polmonare (PA) legatura sinistro attraverso una toracotomia sinistra. Seguenti operazioni consistevano di eseguire embolizzazioni settimanali PA per 5 settimane. Tutte le procedure sono state eseguite in anestesia generale. <ol><li> Non nutrire gli animali 12 ore prima della procedura. </li><li> Effettuare una premedicazione del maialino, eseguire un&#39;iniezione intramuscolare con 30 mg / kg di ketamina cloridrato e aropine 0,05 mg / kg nei muscoli del collo, 30 minuti prima della procedura. 8 </li><li> Quando il maiale è sedato, inserire un catetere nella vena orecchio. </li><li> Eseguire endovenosa un bolo di fentanil (0,005 mg / kg) e propofol (2mg / kg) prima intubazione. Iniettare per via endovenosa nella vena dell&#39;orecchio cisatracurio (0,3 mg / kg) e intubare il maiale (intubazione non selettivo con una sonda francese 7) 9. </li><li> Posizionare dispositivi di monitoraggio continuo sul maialino: ECG continuo, Espiratorio CO 2 e ossimetria 8,9. Inserire un catetere arterioso campo fluido attraverso l&#39;arteria carotide sotto guida ecografia per monitorare la pressione arteriosa sistemica 8-10. </li><li> Mantenere anestesia generale con isoflurano (2%) in supplemento ossigeno 100%, infusione endovenosa continua di fentanil (0,004 mg / kg) e propofol (3 mg / kg). </li><li> Aggiungere una antibioprophylaxy con un&#39;iniezione di Cefatoxine (1 g) e gentamicina (80 mg). </li><li> Prevenire operatorio intra e dolore post operatorio con l&#39;iniezione di nalbufina (0,01 mg / kg) tid </li><li> Controllare ogni 15 minuti la completezza dell&#39;anestesia: assenza di movimento, la frequenza cardiaca stabile, la pressione sanguigna, l&#39;ossigenazione. </li><li> L&#39;uso del veterinario pomata sugli occhi per prevenire la secchezza mentre sotto anestesia. </li></ol> 2. legatura dell&#39;arteria polmonare sinistra <ol><li> Installare il maialino in posizione sdraiata sul lato sinistro, radere la zona operativa e disinfettare la pelle con un alcoholiSoluzione c. Utilizzare un campo sterile locale. </li><li> Aprite la cassa attraverso una piccola toracotomia laterale sinistra (da 5 a 10 cm) nello spazio 4 ° intercostali. Non andare dietro la punta della scapola. Ritrarre con attenzione il polmone verso il diaframma. </li><li> Una volta che la finestra chirurgica ideale trova, ritrarre la sinistra vena azygos e sezionare la principale arteria polmonare sinistra prima di legare con un non riassorbibile 2/0 seta. NOTA: E &#39;molto importante non aprire il pericardio. </li><li> Chiudere lo strato di petto dopo strato con punti di sutura riassorbibili. Utilizzare un tubo toracico per rimuovere il pneumotorace post operatorio. Rimuovere il tubo toracico subito dopo l&#39;estubazione maialino. </li></ol> 3. L&#39;embolizzazione dell&#39;arteria lobo inferiore destro polmonare <ol><li> Dopo anestesia generale, mettere il porcellino in posizione supina. Effettuare un monitoraggio continuo della ossimetria, CO espiratorio 2, elettrocardiogramma, pressione media arteriosa sistemica (Mpa) e pressione arteriosa polmonare media (mPAP) Durante la procedura. </li><li> Inserire tutti i cateteri per via percutanea con guida ecografica. Inserire un catetere arterioso 6 francese nella carotide per il monitoraggio della pressione sanguigna e 8 fodero francese nella vena cava superiore attraverso la vena giugulare (Eseguire la foratura 2 cm sopra soprasternale con una direzione 45 °). </li><li> Sotto guida fluoroscopica, inserire, attraverso il 8 P. fodero, un 5 francese catetere angiografico in arteria polmonare destra. La punta del catetere deve essere in un lobo inferiore polmonare segmentale. </li><li> Preparare il materiale per embolizzazione polmonare: 1 ml di colla tessuti molli contenenti N-butil-2-cianoacrilato è aggiunto 2 ml di un mezzo di contrasto lipidico. ATTENZIONE: Evitare di pelle o gli occhi a contatto con la N-butil-2-cianoacrilato. </li><li> Quando il catetere angiografico è ben posizionata, iniettare 0,2 ml a 0,4 ml della preparazione nell&#39;arteria polmonare. Valutare la tolleranza della embolizzazione misurando laRapporto mPAP / mPA che non dovrebbe superare 0,5. Arrestare embolizzazione se saturazione di ossigeno era &lt;90% e / o MPA scesa sotto 60 mm Hg e / o la portata cardiaca era sotto 2 L / min. </li><li> Rimuovere il catetere angiografico e guaine ed eseguire compressioni digitali del sito di puntura. </li></ol> 4. La valutazione emodinamica <ol><li> Dopo anestesia generale, posizionare il porcellino in posizione supina. Effettuare un monitoraggio continuo della ossimetria, espiratorio CO 2, elettrocardiogramma, pressione arteriosa sistemica (Mpa) e la pressione sanguigna polmonare (mPAP) durante tutta la procedura. </li><li> Ventilare i maialini con il più basso FiO 2 possibile secondo la saturazione di ossigeno (&gt; 95%). </li><li> Inserire tutti catetere per via percutanea sotto guida ecografica. Un catetere arterioso 6 French viene inserito nella carotide ea 8 guaina francese è inserito nella vena cava superiore (Eseguire la foratura 2 cm sopra soprasternale con 45 °direzione angolo). </li><li> Inserire un 7 French Swan-Ganz catetere nel tronco dell&#39;arteria polmonare. Valutare la gittata cardiaca con la tecnica di diluizione termica, con l&#39;iniezione di 10 ml di soluzione salina a 4 ° C. </li><li> Registrare i seguenti parametri: sistolica, diastolica e della pressione arteriosa sistemica e polmonare, frequenza cardiaca, saturazione di ossigeno, pressione atriale destra, la gittata cardiaca. </li></ol> 5. Valutazione ecocardiografica del ventricolo destro <ol><li> Dopo l&#39;anestesia generale, installare il maialino in posizione supina ed eseguire un ecocardiogramma trans toracica secondo le linee guida per lo screening umani RV. Registra video loop durante una pausa di fine espirazione. </li></ol> 6. Pressione Volume Cicli di valutazione con il metodo conduttanza <ol><li> Dopo anestesia generale, installare il porcellino in posizione supina. Effettuare un monitoraggio continuo della ossimetria, espiratorio CO 2, elettrocardiogramma, pressione arteriosa sistemica (Mpa) epressione polmonare arteriosa (mPAP) durante tutta la procedura. </li><li> Inserire un catetere arterioso 6 francese destra o sinistra carotide e un catetere angiografico nel ventricolo sinistro. Inserire una guaina 9 francese nella vena cava superiore, 8 francese destra o sinistra vena femorale e un catetere arterioso PiCCO destra o sinistra femorale. Inserire tutti i cateteri per via percutanea sotto guida ecografica. </li><li> Eseguire la calibrazione della pressione e il volume della sonda conduttanza secondo le raccomandazioni del costruttore. Misurare la resistività del sangue (Rho) campionando 5 ml di sangue arterioso. Harvest 5 ml di sangue arterioso, de-air siringa e riempire la sonda per la misura della resistività del sangue. 10-13. </li><li> Inserire il catetere conduttanza nel ventricolo destro attraverso la guaina 9 Fr nella cava Veina superiore. Posizionare correttamente l&#39;estremità del catetere con guida fluoroscopica. Posizionare l&#39;estremità del catetere nel vertice del rigHT ventricolo e inserire tutti lungo possibile nel ventricolo. </li><li> Controllare la qualità delle anse. (Figura 6) </li><li> Inserire un ballon spendibile nella cava Veina inferiore attraverso la vena femorale. Posizionare l&#39;estremità appena sotto il atriale destra. Utilizzare guida fluoroscopica. </li><li> Loop Record pressione-volume del ventricolo destro allo stato basale e durante l&#39;occlusione della vena cava inferiore, come precedentemente descritto 10-12. (Figura 7) </li></ol> 7. endomiocardica biopsie del ventricolo destro <ol><li> Dopo anestesia generale, posizionare il porcellino in posizione supina. Effettuare un monitoraggio continuo della ossimetria, espiratorio CO 2, elettrocardiogramma, pressione arteriosa sistemica (Mpa) e la pressione sanguigna polmonare (mPAP) durante tutta la procedura. </li><li> Inserire percutanea una guaina francese 10 nella vena cava superiore. Inserire un 7 francese Swan-Ganz (SG) sonda e una lunga 7.5 francese guaina del catetere nella giusta atrium. Quando la punta della sonda SG è ben posizionato nel ventricolo destro (RV), gonfiare il palloncino della sonda SG, spingere il catetere lungo guaina nella RV contro il palloncino. Sgonfiare il palloncino e rimuovere la sonda SG lasciando il catetere lungo guaina nella RV. La buona posizione della punta del lungo-guaina è controllato da fluoroscopia e l&#39;ecocardiografia. </li><li> Inserire il biotome nel lungo-guaina e di eseguire biopsie endomiocardiche sotto ecografica, fluoroscopia e controllo ECG. </li></ol> 8. generali post-operatorio Considerazioni cura <ol><li> Dopo l&#39;intervento chirurgico, il maialino estubare solo dopo il recupero della funzione respiratoria spontanea. </li><li> Per i farmaci post operatorio, eseguire un&#39;iniezione intramuscolare di Cefatoxine (1 g) Die per 5 giorni e fornire l&#39;analgesia appropieted (buprenorfina, iniezione intramusculary 0,01 mg / kg di offerta per 10 giorni. </li><li> Non lasciare un animale che ha subito un intervento chirurgico per la compagnia di altri animali fino al completo recovered. </li></ol> 9. Metodo Eutanasia <ol><li> Eutanasia gli animali nelle situazioni seguite; Fine della sperimentazione, perdita di peso, 15% o più in una settimana, unibability per nutrire adeguatamente se stessi, anoressia, infezione non curabile, dolore o altro didease, malattia troppo severa: cianosi, dispnea grave </li><li> Durante anestesia generale con sevoluorane 8%, una dose elevata di propofol (0,5 mg / kg) associato con una dose letale di cloruro di potassio (0,2 g / kg). Quando il cuore è fermo in diastole, Harveste cuore e blocco di polmone, al fine di fare uno studio istologico e molecolare. </li></ol>

<ol><li>Simonneau, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Updated+clinical+classification+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Updated clinical classification of pulmonary hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 54, Suppl 1. S43-S54 (2009).</li>
<li>Dartevelle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. 23 (4), 637-648 (2004).</li>
<li>Hoeper, M. M., Mayer, E., Simonneau, G., Rubin, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Circulation. 113 (16), 2011-2020 (2006).</li>
<li>Galie, N., Kim, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+microvascular+disease+in+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Am+Thorac+Soc%22%5BJournal%5D)">Pulmonary microvascular disease in chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> Proc Am Thorac Soc. 3 (7), 571-576 (2006).</li>
<li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+in+patients+with+idiopathic%2C+familial%2C+and+anorexigen-associated+pulmonary+arterial+hypertension+in+the+modern+management+era%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Survival in patients with idiopathic, familial, and anorexigen-associated pulmonary arterial hypertension in the modern management era.</a> Circulation. 122 (2), 156-163 (2010).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+models+of+right+heart+failure%3A+a+window+for+translational+research+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Experimental models of right heart failure: a window for translational research in pulmonary hypertension.</a> Semin Respir Crit Care Med. 34 (5), 689-699 (2013).</li>
<li>Mercier, O., Fadel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%3A+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Chronic thromboembolic pulmonary hypertension: animal models.</a> Eur Respir J. 41 (5), 1200-1206 (2013).</li>
<li>Kaiser, G. M., Heuer, M. M., Fruhauf, N. R., Kuhne, C. A., Broelsch, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+handling+and+anesthesia+for+experimental+surgery+in+pigs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs.</a> J Surg Res. 130 (1), 73-79 (2006).</li>
<li>Flegal, M. C., Kuhlman, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anesthesia+monitoring+equipment+for+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Anim+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Anesthesia monitoring equipment for laboratory animals.</a> Lab Anim (NY). 33 (7), 31-36 (2004).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+reserve+in+a+piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Respir+J%22%5BJournal%5D)">Right ventricular reserve in a piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Eur Respir J. , (2014).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+plasticity+in+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Right ventricular plasticity in a porcine model of chronic pressure overload.</a> J Heart Lung Transplant. 33 (2), 194-202 (2014).</li>
<li>Guihaire, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+indices+of+right+ventricular+function+are+markers+of+ventricular-arterial+coupling+rather+than+ventricular+contractility%3A+insights+from+a+porcine+model+of+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Non-invasive indices of right ventricular function are markers of ventricular-arterial coupling rather than ventricular contractility: insights from a porcine model of chronic pressure overload.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 14 (12), 1140-1149 (2013).</li>
<li>Kass, D. A., Yamazaki, T., Burkhoff, D., Maughan, W. L., Sagawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+left+ventricular+end-systolic+pressure-volume+relationships+by+the+conductance+%28volume%29+catheter+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Determination of left ventricular end-systolic pressure-volume relationships by the conductance (volume) catheter technique.</a> Circulation. 73 (3), 586-595 (1986).</li>
<li>Mercier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Piglet+model+of+chronic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Piglet model of chronic pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 3 (4), 908-915 (2013).</li>
<li>Brooks, H., Kirk, E. S., Vokonas, P. S., Urschel, C. W., Sonnenblick, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+of+the+right+ventricle+under+stress%3A+relation+to+right+coronary+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Performance of the right ventricle under stress: relation to right coronary flow.</a> J Clin Invest. 50 (10), 2176-2183 (1971).</li>
<li>Boulate, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+microvascular+lesions+regress+in+reperfused+chronic+thromboembolic+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22J+Heart+Lung+Transplant%22%5BJournal%5D)">Pulmonary microvascular lesions regress in reperfused chronic thromboembolic pulmonary hypertension.</a> J Heart Lung Transplant. , (2014).</li>
</ol>

Nessun conflitto di interessi di rivelare.

Come nella pratica clinica umana, il rispetto delle regole di asepsi è obbligatoria durante tutte le procedure chirurgiche. Nella CTEPH modello porcellino originale descritto da O. Mercier et al., Sinistra legatura dell&#39;arteria polmonare è stata eseguita dopo l&#39;apertura del pericardio, attraverso una sternotomia mediana 14. Poiché il pericardio è stato lasciato aperto, l&#39;interazione tra il ventricolo destro e pericardio stata compromessa e insufficienza cardiaca destra è stata ritardata. ...

Tromboembolica cronica Ipertensione polmonare (CTEPH) è un sottotipo di ipertensione polmonare (PH) a causa della cronica vascolare polmonare letto ostruzione da coaguli persistenti e organizzati legati ad uno o più acute embolie polmonari 1-3. Una combinazione di malattia microvascolare ostruttiva e non ostruttiva porta ad un ulteriore aumento della resistenza vascolare polmonare 4. Il ventricolo destro deve prima adattarsi con ipertrofia compensata per mantenere la gittata cardiaca. Senza trattamento, il ventricolo destro si dilata e non riesce nel corso del tempo. In epoca moderna, PH rimane una malattia progressiva e spesso fatale, nonostante l&#39;uso di moderne terapie mirate 5. Molti studi hanno dimostrato che ventricolo destro (RV) adattamento al sovraccarico di pressione è il determinante principale della sopravvivenza in pazienti PH. Per questa ragione, la comprensione dei meccanismi alla base della transizione da adattativa per disadattivi rimodellamento RV è una chiave di volta per il trattamento e svipment di nuove terapie. Perché PH è rara e il campionamento del tessuto è quasi impraticabile in questi pazienti fragili, sono necessari studi sperimentali. Inoltre, studi preclinici sono obbligatori per accertare che un farmaco con beneficio nel sistema vascolare polmonare non causa perdita di valore RV. Per molti anni, diversi modelli sperimentali di PH e insufficienza RV sono stati sviluppati con vantaggi e limitazioni 6,7. Nei modelli murini farmacologici (monocrotalina, SU5416, ipossia), PH e il fallimento RV verificano secondaria ad una massiccia infiammazione, ischemia o fattore di stress tossico che potrebbe indurre alcuni &quot;lati effetti&quot; e pregiudizi in analisi pathway molecolare. Inoltre, sempre biopsie RV endomiocardiche in un modello murino dovrebbero essere molto impegnativo, senza sacrificare l&#39;animale. Modelli chirurgici in animali più grandi sono più fisiologico, ma non incidono sul sistema vascolare polmonare (polmonare banding, shunt sistemico-polmonare) o inducono PH acuta e RVF (embolia polmonare acuta). Lo scopo di questo articolo è quello di descrivere un modello originale di CTEPH in maialino che è più rappresentativo del CTEPH fisiopatologia. Questo grande modello animale permette di ripetere le misurazioni non invasive e invasive di solito eseguiti nella pratica clinica (cateterizzazione cardiaca destra) di seguire le modifiche emodinamica polmonare e funzione ventricolare.

tromboembolica cronica ipertensione polmonare e valutazione dei ventricolare destra funzione nel maialino

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

Un modello originale di maialino tromboembolica cronica Ipertensione polmonare (CTEPH) associato (RV) disfunzione cronica del ventricolo destro è descritta. Ipertensione polmonare (PH) è stata indotta in 3 settimane di età maialini da un&#39;ostruzione progressiva del letto vascolare polmonare. Una legatura dell&#39;arteria polmonare sinistra (PA) è stato eseguito prima attraverso un mini-toracotomia. In secondo luogo, embolizzazioni settimanali del lobo polmonare in basso a destra sono stati fatti sotto guida fluoroscopica con n-butil-2-cianoacrilato per 5 settimane. Media pressione polmonare arteriosa (mPAP) misurata dal cateterismo cardiaco ritght, aumentata progressivamente, così come la pressione atriale destra e polmonari vascolari Resistenze (PVR) dopo 5 settimane rispetto agli animali sham. Ventricolo destro (RV) rimodellamento strutturale e funzionale sono stati valutati mediante ecocardiografia transtoracica (diametri RV, lo spessore della parete RV, funzione sistolica RV). RV elastance e accoppiamento RV-polmonare sono stati valutati da Loop pressione-volume(PVL) analisi con il metodo conduttanza. Sono stati inoltre eseguiti studio istologico del polmone e il ventricolo destro. Le analisi molecolari su RV tessuti freschi potrebbero essere effettuate attraverso ripetute biopsie endomiocardiche transcutanea. Malattia polmonare microvascolare nei territori ostruiti e senza ostacoli è stato studiato da biopsie polmonari mediante analisi molecolare e patologia. Inoltre, l&#39;affidabilità e la riproducibilità è stato associato con una gamma di PH gravità negli animali. La maggior parte degli aspetti della malattia CTEPH umano sono state riprodotte in questo modello, che consente nuove prospettive per la comprensione dei meccanismi alla base (mitocondri, infiammazione) e nuovi approcci terapeutici (mirati, terapie cellulari o geni) del ventricolo destro sovraccaricato, ma anche microvascolare polmonare malattia.

Fattibilità Questo modello maialino di ipertensione polmonare cronica post-embolico è stato istituito nel nostro laboratorio nel 2009-2010. Dal 2011, abbiamo usato 70 suinetti e abbiamo eseguito 63 modelli completati. Nella nostra esperienza, la realizzazione di questo modello richiede una curva di apprendimento. Per quanto riguarda la mortalità, abbiamo osservato 5 morti non programmati (7,1%), soprattutto nella prima parte della nostra esperienza....

L'ipertensione polmonare tromboembolica cronica (CTEPH) e la disfunzione ventricolare destra (RV) sono state indotte nei suinetti dall'ostruzione progressiva delle arterie polmonari. Le conseguenze sono state notevolmente simili a quelle osservate nei pazienti con CTEPH. Questo modello animale sarebbe uno strumento molto utile per la fisiopatologia e gli esperimenti terapeutici su CTEPH e RV failure.

Tromboembolica cronica Ipertensione polmonare e valutazione dei ventricolare destra Funzione nel Maialino

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

L'obiettivo generale di questa procedura è creare un modello affidabile e riproducibile di ipertensione polmonare tromboembolica cronica nel suinoletto per studiare i meccanismi della disfunzione ventricolare destra cronica. Questo viene ottenuto innanzitutto eseguendo la legatura dell'arteria polmonare principale sinistra in un suinoletto di tre settimane di età. Nel secondo passaggio, la resistenza vascolare polmonare media viene aumentata mediante un'occlusione progressiva del letto vascolare polmonare.Successivamente, la funzione del ventricolo destro viene valutata mediante ecocardiografia, e l'accoppiamento stretto tra ventricolo destro e arteria polmonare viene misurato tramite la valutazione del loop pressione-volume del ventricolo destro. Nell'ultima fase, il tessuto fresco del ventricolo destro viene prelevato mediante biopsie endomiocardiche. Infine, il rimodellamento polmonare e del ventricolo destro a riposo può essere valutato mediante analisi istologica. Questo modello può rispondere a domande fondamentali riguardo ai meccanismi alla base delle disfunzioni del ventricolo destro, come ad esempio quali fattori svolgono un ruolo nei disturbi metabolici o miocellulari dei cardiomiociti.Prima di iniziare la procedura, posizionare un dispositivo di monitoraggio continuo su un suino anestetizzato di tre settimane. Inserire un catetere nella vena auricolare del suino e somministrare anestetici. Quindi, sotto guida iconografica, inserire un catetere per il monitoraggio della pressione arteriosa attraverso l'arteria carotidea per monitorare la pressione arteriosa sistemica.Successivamente, posizionare il suino in decubito laterale sinistro, depilare l'area operatoria e disinfettare la cute con una soluzione alcolica. Quindi, per legare l'arteria polmonare sinistra, aprire il torace mediante una toracotomia laterale sinistra di cinque-dieci centimetri nello spazio intercostale quarto, avendo cura di non andare al di là della punta della scapola e ritraendo attentamente il polmone in direzione del diaframma. Una volta individata la finestra chirurgica ideale, ritrarre la vena azygos sinistra, quindi dissezionare l'arteria polmonare sinistra principale e procedere alla legatura con seta non riassorbibile 2.0.Avendo cura di non aprire il pericardio sotto guida fluoroscopica. Inserire un catetere angiografico da cinque French attraverso la guida da otto French fino all'arteria polmonare destra, finché la punta del catetere non si trovi in un'arteria polmonare segmentale del lobo inferiore. Quando i cateteri sono in posizione, iniettare da 0,2 a 0,4 millilitri di materiale per embolizzazione frescamente preparato nell'arteria polmonare.Quindi valutare la tolleranza all'embolizzazione misurando il rapporto tra la pressione media nell'arteria polmonare e la pressione media sistemica. Non ripetere l'embolizzazione se la saturazione di ossigeno è inferiore al 90%, la pressione sanguigna sistemica media scende sotto i 60 millimetri di mercurio e/o la gittata cardiaca è inferiore a due litri al minuto.La pressione polmonare media deve aumentare di 10 millimetri di mercurio. Per eseguire una valutazione emodinamica, posizionare il suinoletto in posizione supina, applicare il monitoraggio continuo come mostrato in precedenza e cateterizzare il suinoletto sotto anestesia generale. Inserire un catetere da 10 French per via percutanea nella vena cava superiore e posizionare un catetere Swan-Ganz da sette French nel tronco dell'arteria polmonare.Quindi iniettare 10 millilitri di soluzione salina a quattro gradi Celsius attraverso il catetere di Swan-Ganz per valutare la portata cardiaca. Valutare il ventricolo destro mediante ecocardiografia. Posizionare il suinoletto in posizione supina.Quindi eseguire un'ecocardiografia transtoracica secondo le linee guida umane per lo screening del ventricolo destro. Registrare i loop video durante una pausa end-espiratoria per la valutazione del loop pressione-volume sotto anestesia generale con monitoraggio continuo. Inserire un catetere arterioso da otto French nell'arteria carotide destra o sinistra e un catetere angiografico nel ventricolo sinistro.Quindi inserire un introduttore da 12 French nella vena cava inferiore e uno da otto French nell'arteria femorale destra o sinistra, e un catetere arterioso pico nell'arteria femorale destra o sinistra. Successivamente, eseguire la calibrazione di pressione e volume della sonda di conducibilità secondo le raccomandazioni del produttore. Per misurare la resistività del sangue, prelevare cinque millilitri di sangue arterioso, sfiatare la siringa e riempire la sonda.Quindi inserire il catetere di conduzione nel ventricolo destro attraverso la guaina da nove French nella vena cava superiore. Utilizzando la guida fluoroscopica, introdurre la punta del catetere nell'apice del ventricolo destro e inserire la maggior quantità possibile di catetere nel resto del ventricolo. Dopo aver verificato che i segmenti di volume della sonda siano in fase diastolica e sistolica grazie alla buona forma del tracciato, inserire un palloncino monouso nella vena cava inferiore attraverso la vena femorale, posizionandone l'estremità appena al di sotto dell'atrio destro.Quindi registrare i tracciati pressione-volume del ventricolo destro in condizioni basali e durante l'occlusione della vena cava inferiore per eseguire una biopsia endomiocardica del ventricolo destro in modo percutaneo. Inserire una guaina da 10 French nella vena cava superiore e una sonda Swan-Ganz da sette French, insieme a una guaina catetere lunga da 7,5 French, nell'atrio destro. Quando la punta della sonda Swan-Ganz è posizionata correttamente all'interno del ventricolo destro, gonfiare il palloncino della sonda e spingere la guaina catetere lunga all'interno del ventricolo destro contro il palloncino.Quindi sgonfiare il palloncino e rimuovere la sonda, lasciando in sede il catetere guida lungo. Infine, inserire un biot nel catetere guida lungo ed eseguire biopsie endomiocardiche sotto controllo ecografico, fluoroscopico ed ECG, come dimostrato in questa vista intraoperatoria, è stato osservato un aumento della vascolarizzazione sistemica del polmone e dell'ipertrofia della circolazione bronchiale nelle regioni del polmone sinistro ostruito, del lobo inferiore destro e della pleura mediastinica, con arterie bronchiali di piccole dimensioni sottomucose ampie e numerose. Sono state inoltre osservate arterie bronchiali di piccole dimensioni nel polmone sinistro ostruito e nel lobo inferiore destro.È stata riscontrata anche un'iperplasia della tonaca media associata a un aumento dell'angiogenesi in queste aree dopo la vasculopatia polmonare ostruttiva, riscontrata nelle zone ostruite del polmone sinistro e del lobo inferiore destro, mentre nelle aree non ostruttive del lobo superiore destro è stata osservata una vasculopatia da shunt. Poiché queste immagini illustrano un'ostruzione cronica del lobo dell'arteria polmonare inferiore destro causata da un trombo non risolto di butile cianoacrilato e fibrina, che era ancora evidente a sei settimane di distanza. Le aree del ventricolo e dell'atrio destro, i diametri del ventricolo destro e lo spessore della parete del ventricolo destro sono aumentati dopo ripetute embolizzazioni.È stato osservato intraoperatoriamente un significativo ingrandimento del ventricolo destro associato a ipertrofia ventricolare destra. Questo aumento dell'ipertrofia ventricolare destra si è correlato con un incremento della pressione arteriosa polmonare media. Un'ulteriore analisi del rapporto pressione-volume ha rivelato un'alterata funzione del ventricolo destro con un conseguente decremento del coupling ventricolo-arterioso dopo il suo sviluppo.Questo modello apre la strada ai ricercatori nel campo dei disturbi neurologici di tipo T per esplorare i disturbi metabolici e mitocondriali, e consente anche numerose ricerche terapeutiche cliniche.

chronic-thromboembolic-pulmonary-hypertension-assessment-right

Research

Ricerca

JoVE Journal

Medicine

Medicina

Questo articolo fornisce un protocollo per la valutazione ecocardiografica delle dimensioni del ventricolo destro e l'ipertensione polmonare nei topi. Le applicazioni includono la determinazione del fenotipo e la valutazione seriale transgenici e modelli murini tossina-indotta di cardiomiopatia e la malattia vascolare polmonare.

La valutazione ecocardiografica del cuore destro in topi

Ventricolo destro (RV) La disfunzione è fondamentale per la patogenesi della malattia cardiovascolare, ma le metodologie non sono disponibili per la sua valutazione. I recenti progressi nella ecografica forniscono un'opzione non invadente e preciso per lo studio RV longitudinale. Qui, abbiamo dettaglio un metodo step-by-step ecocardiografico utilizzando un modello murino di sovraccarico di pressione RV.

Valutazione del ventricolo destro Struttura e funzione in modello murino di polmonare Arteria Costrizione da ecocardiografia transtoracica

L'ipertensione polmonare è associata a una significativa riduzione della pulsatilità, della contrattilità e dell'elasticità dell'arteria polmonare, contribuendo ad un aumento della pressione dell'arteria polmonare e della resistenza polmonare. Utilizzando un modello di suinetto ipossico, questo studio ha dimostrato che il miglioramento della plasticità dell'arteria polmonare utilizzando un catetere pulsatile di nuova concezione migliora l'ipertensione polmonare ipossica.

Aumentare polmonare Arteria flusso pulsatile Migliora ipossica Ipertensione polmonare nei suinetti

Vi presentiamo un protocollo di creazione di giusta disfunzione ventricolare in un modello di maiale inducendo ARDS. Dimostriamo che il monitoraggio invasivo della gittata cardiaca ventricolare tramite flusso sonde intorno l'aorta e l'arteria polmonare, nonché misurazioni della pressione arteriosa nell'aorta e arteria polmonare destra e sinistra.

Monitoraggio emodinamico invasivo dell'emodinamica dell'arteria aortica e polmonare in un modello animale grande di ARDS

Presentiamo un protocollo per indurre e fenotipizzare un'insufficienza cardiaca destra acuta in un modello animale di grandi dimensioni con ipertensione polmonare cronica. Questo modello può essere utilizzato per testare interventi terapeutici, per sviluppare metriche cardiache giuste o per migliorare la comprensione della fisiopatologia acuta dell'insufficienza cardiaca destra.

Induzione e fenotipizzazione dell'insufficienza cardiaca destra acuta in un modello animale di ipertensione polmonare tromboembolica cronica

Qui presentiamo un approccio toracico chiuso alle registrazioni bi-ventricolari di pressione-volume basate sull'ammissione in suini con disfunzione ventricolare destra acuta.

Registrazioni biventricolari a ciclo pressione-volume a torace chiuso con cateteri di ammissione in un modello suino

Questo manoscritto descrive la tecnica chirurgica e l'approccio sperimentale per sviluppare un grave sovraccarico di pressione ventricolare destra per modellare i loro fenotipi adattivi e disadattivi.

Un grande modello animale per l'ipertensione polmonare e l'insufficienza ventricolare destra: legatura dell'arteria polmonare sinistra e bendaggio progressivo dell'arteria polmonare principale nelle pecore

Il presente protocollo descrive la caratterizzazione ecocardiografica della morfologia e della funzione ventricolare destra in un modello di ratto di ipertensione arteriosa polmonare.

Valutazione ecocardiografica completa della funzione del ventricolo destro in un modello di ratto di ipertensione arteriosa polmonare

La presentazione di metodi dettagliati per la valutazione della funzione del ventricolo destro migliorerà la qualità e l'affidabilità della ricerca sull'ipertensione polmonare, offrendo un solido quadro per studi futuri e migliorando la riproducibilità tra diversi laboratori.

Valutazione della funzione ventricolare destra in modelli sperimentali di ipertensione arteriosa polmonare

Il grado di disfunzione vascolare e contribuendo meccanismi fisiologici può essere valutata in pazienti con malattia renale cronica, misurando brachiale dilatazione dell'arteria flusso-mediata, velocità di propagazione dell'onda aortica e vascolare espressione della proteina delle cellule endoteliali.

Valutazione della funzione vascolare nei pazienti con malattia renale cronica

Scopri come creare un modello di ipertensione polmonare tromboembolica cronica nei maialini per studiare la disfunzione del ventricolo destro. Questo metodo consente di analizzare i meccanismi patofisiologici e valutare nuove terapie.

Tromboembolica cronica Ipertensione polmonare e valutazione dei ventricolare destra Funzione nel Maialino

Esplora altri video