3 aprile 2016
Dimostriamo l'effetto di reticolazione sclerale con riboflavina e raggi UVA su un occhio di allungamento coniglio assiale. allungamento assiale è stata indotta nel 13 giorni di età conigli New Zealand (maschio e femmina) di sutura le palpebre dell'occhio destro (tarsoraffia).
L'obiettivo generale di questa procedura è osservare gli effetti del cross-linking sclerale mediante riboflavina e radiazione ultravioletta-A per indurre miopia assiale in un modello animale di coniglio. Questo metodo può contribuire a rispondere a domande fondamentali nel campo del cross-linking sclerale, ad esempio come indirizzare la radiazione UVA verso specifiche aree della sclera. Il principale vantaggio di questa tecnica è che utilizza radiazione UVA, fibre ottiche e intervento chirurgico per raggiungere le aree sclerali di interesse.
Assisterà alla procedura chirurgica Orly Gal-Or, un medico in formazione presso il Dipartimento di Oftalmologia del Rabin Medical Center. Prima di iniziare la procedura, verificare l'assenza di risposta al riflesso del dolore e utilizzare un bastoncino sterile per applicare una piccola quantità di unguento oftalmico sull'occhio non operato. Successivamente, applicare un'anestesia topica su ciascun occhio.
E posizionando la sonda perpendicolarmente alla cornea centrale, utilizzare uno scanner a ultrasuoni di tipo A per effettuare tre misurazioni della lunghezza assiale degli occhi. Successivamente, sotto un microscopio operatorio oftalmico, utilizzare pinze e forbici chirurgiche oftalmiche per eseguire una peritomia congiuntivale a 360 gradi. Utilizzare un uncino muscolare per individuare i quattro muscoli retti estrinseci.
Quindi, isolare i muscoli con due suture in seta intrecciata senza ago per creare quattro quadranti. Utilizzando un pennarello per la pelle, delimitare una zona di irradiazione sulla sclera equatoriale e una zona di irradiazione sulla sclera posteriore in ciascun quadrante. Successivamente, caricare una siringa da tre a cinque millilitri con soluzione al 0,1 percento di riboflavina 5 fosfato priva di destrano come soluzione fotosensibilizzante e collegare una cannula lacrimale da 26 gauge.
Ora, accendere un dispositivo di irradiazione dotato di una sorgente luminosa UVA da 370 nanometri collegata a una fibra ottica appositamente realizzata con estremità inclinata e impostare il dispositivo su 57 milliwatt per centimetro quadrato. Venti secondi prima di iniziare l'irradiazione, spostare il bulbo oculare tirando i fili di seta in direzione opposta al quadrante da trattare e applicare la soluzione di foto-sensibilizzatore sulla zona da irradiare. Quindi, utilizzare la fibra ottica appositamente realizzata per irradiare la zona selezionata per 200 secondi, applicando la soluzione di foto-sensibilizzatore sulla zona ogni 20 secondi.
Dopo aver irradiato tutti e quattro i quadranti, tagliare i margini della palpebra con delle forbici. Quindi, utilizzare quattro punti di seta intrecciata color avorio per suturare delicatamente le palpebre superiori e inferiori. Applicare una piccola quantità di unguento oftalmico sul margine palpebrale e posizionare il coniglio sotto una lampada a calore.
Quando l'animale si è completamente ripreso, collocarlo in una gabbia pulita con nuova lettiera. Cinquantacinque giorni dopo la reticolazione, utilizzare forbici oftalmiche chirurgiche per rimuovere la tarsorrafia. Successivamente, eseguire tre misurazioni della lunghezza assiale per ogni occhio come appena dimostrato.
Negli animali sottoposti a cross-linking sclerale e tarsorrafia, la lunghezza assiale media è diminuita dopo la sutura delle palpebre, rispetto all'occhio non operato. Negli animali sottoposti soltanto a peritomia e tarsorrafia, tuttavia, la lunghezza assiale media è aumentata nell'occhio sperimentale. In effetti, gli occhi sottoposti a cross-linking sclerale hanno mostrato un incremento minore della lunghezza assiale complessivamente, rispetto agli occhi sottoposti soltanto a peritomia.
Sebbene la differenza tra i gruppi nella lunghezza assiale media degli occhi che non hanno subito interventi chirurgici non fosse statisticamente significativa. Durante il tentativo di questa procedura, è importante ricordare di preparare in anticipo tutta l'attrezzatura necessaria. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della miopia, i quali hanno esplorato gli effetti della riboflavina e delle radiazioni UVA sulla retina, coroide e sclera.
Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione di come visualizzare specifiche aree sclerali di interesse e applicare trattamenti mirati con radiazioni UVA. Non dimenticare che eseguire interventi chirurgici su occhi così piccoli con muscoli retti delicati può essere estremamente complesso e che è necessario accettare la curva di apprendimento richiesta per perfezionare la tecnica. Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla prevenzione delle complicanze miopiche patologiche.
Sebbene questo metodo possa fornire informazioni sulla prevenzione della miopia assiale, può essere applicato anche ad altre condizioni, come aree sclerali sottili.
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Questo studio analizza gli effetti del cross-linking sclerale mediante riboflavina e radiazione UVA per indurre miopia assiale in un modello animale di coniglio. La procedura mira a migliorare la comprensione delle tecniche di cross-linking sclerale e della loro applicazione nella ricerca oculare.
Il cross-linking della sclera mediante riboflavina e radiazione UVA rappresenta un approccio meccanicistico per modulare il rimodellamento della matrice extracellulare nei tessuti oculari, offrendo un modello preclinico per la valutazione di interventi anti-miopia. Questa tecnica consente la validazione di bersagli legati alla biomeccanica sclerale nelle vie di allungamento assiale, supportando la riduzione del rischio delle strategie terapeutiche prima della costosa traduzione clinica. Dimostrando l'inibizione della crescita assiale indotta da occlusione in un modello di coniglio, il metodo fornisce un'elevata predittività per l'interazione con bersagli specifici delle vie coinvolte nella profilassi della miopia.
Il metodo si inserisce nel percorso di scoperta che va dal test dell'ipotesi sul bersaglio all'ottimizzazione del composto promettente, fornendo un sistema rilevante per la malattia in cui valutare agenti modulatori della sclera prima degli studi abilitanti all'IND.