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Acqua in emulsioni olio: un nuovo sistema di montaggio idrosolubili proteine ​​clorofilla vincola...
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JoVE Journal Chemistry
Water in Oil Emulsions: A New System for Assembling Water-soluble Chlorophyll-binding Proteins with Hydrophobic Pigments

Acqua in emulsioni olio: un nuovo sistema di montaggio idrosolubili proteine ​​clorofilla vincolante con pigmenti idrofobi

Full Text
15,332 Views
11:26 min
March 21, 2016

DOI: 10.3791/53410-v

Dominika Bednarczyk1, Dror Noy2

1Department of Biological Chemistry,Weizmann Institute of Science, 2Migal-Galilee Research Institute

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Questo manoscritto descrive un metodo semplice e ad alta produttività per assemblare proteine ​​solubili in acqua con pigmenti idrofobiche che è basato su emulsioni acqua-in-olio. Dimostriamo l'efficacia del metodo per l'assemblaggio di clorofille nativi con quattro varianti di ricombinante solubile in acqua-clorofilla proteine ​​leganti (WSCPs) di piante Brassica espressi in E. coli.

L'obiettivo generale di questa tecnica è quello di consentire l'incorporazione di clorofille insolubili in acqua nei siti di legame delle proteine idrosolubili. Questo metodo consente l'assemblaggio di clorofille con proteine ricombinanti, il che consente studi rigorosi sulle interazioni clorofilla-proteina e apre nuove possibilità per la costruzione di nuovi complessi clorofilla-proteina. Il vantaggio principale di questa tecnica è che non richiede l'etichettatura o l'immobilizzazione delle proteine.

Pertanto, è adatto per i saggi di screening. A dimostrare la procedura sarà Dominica Bednarczyk, post-doc nel mio gruppo di ricerca. Durante la preparazione delle seguenti soluzioni stock, eseguire tutte le fasi di preparazione della clorofilla sotto una cappa chimica, sotto la luce verde o al buio per ridurre al minimo i danni fotografici.

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Chimica Issue 109 clorofilla solubile in acqua binding protein (WSCP) acqua-in-olio emulsione clorofilla il pigmento di assemblaggio di proteine UV-Visibile assorbanza dicroismo circolare (CD)

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