A lungo termine cateterizzazione della intestinale linfa Tronco e Raccolta della linfa in neonatali Pigs

Presentiamo una procedura chirurgica per cateterizzare il tronco linfatico intestinale nei suini neonati per raccogliere grandi quantità di componenti del metabolismo lipidico dalla linfa efferente.

Il cateterismo linfatico è una tecnica importante utilizzata per studiare i meccanismi coinvolti nel metabolismo dei lipidi e dei farmaci, nelle metastasi del cancro e nella funzione immunitaria e la raccolta di grandi quantità di linfa da vari modelli animali consente ai ricercatori di studiare questi processi. Il video mostra in dettaglio la procedura chirurgica impiegata per cateterizzare il tronco linfatico intestinale nei suini neonati utilizzando un approccio ventrale della linea mediana. Tutte le procedure sono state approvate dal Comitato istituzionale per la cura e l'uso degli animali dell'Università di Alberta.

Per accedere al vaso linfatico è stata aperta la cavità addominale. L'elettrocauterizzazione sull'impostazione del taglio è stata utilizzata per aprire lo strato muscolare. È stato posizionato un divaricatore per tenere aperta la parete addominale per tutta la durata della procedura.

Gli organi addominali chiave sono identificati per aiutare a localizzare il vaso linfatico. Per un migliore accesso ai vasi linfatici, i segmenti dell'intestino tenue e del colon vengono esteriorizzati sul lato sinistro del corpo. Il vaso linfatico viene marcato identificando il fegato e il segmento ventrale destro della vena porta.

Nei suini neonati i vasi linfatici sono delicati e facilmente lacerabili, quindi è necessaria una dissezione meticolosa con tamponi e strumenti contundenti. Ecco il vaso linfatico intestinale. Ora la sutura viene fatta passare sotto il vaso linfatico con una pinza smussata.

Ora ci sono tre suture di seta 2-0 passate sotto il vaso linfatico. La sutura più caudale viene utilizzata per dilatare il vaso e fissare il catetere al vaso. Le suture craniche vengono utilizzate per fissare il catetere all'interno del vaso.

Una piccola incisione nel vaso linfatico consente alle pinze smussate di dilatare il vaso. Il catetere viene inserito nel vaso. Questo deve essere fatto delicatamente per garantire che il vaso linfatico non si strappi.

Il catetere deve essere fatto avanzare oltre la sutura cranica più grande per assicurarsi che sia ben posizionato. Le tre suture di seta 2-0 fissano il catetere nel vaso linfatico. È importante sottolineare che le due suture craniche vengono prima utilizzate per fissare il catetere nel vaso e la sutura più caudale viene quindi utilizzata per legare il catetere, aggiungendo stabilità.

È importante assicurarsi che ci sia un buon flusso linfatico prima di chiudere la cavità addominale. Il catetere è esteriorizzato sul fianco medio sinistro del maiale. Grandi pinze vengono utilizzate per estrarre il catetere dalla cavità addominale alla superficie esterna del fianco del maiale.

Gli strati muscolari sono chiusi con sutura vicryl 2-0 su un ago conico in un semplice schema di sutura interrotto. La pelle viene chiusa con sutura vicryl 2-0 su un ago da taglio in uno schema di sutura sottocuticolare in esecuzione. Con l'incisione di uscita, il catetere passa attraverso la pelle e viene chiuso con una sutura di nylon 2-0 su un ago da taglio in uno schema di sutura a corda di borsa.

Questa chiusura aiuta a prevenire le infezioni ascendenti che si inseguono verso l'interno lungo il catetere. La giacca che contiene i flaconi di raccolta della linfa viene posizionata sul maiale mentre il maiale è ancora sotto anestesia. Il catetere viene inserito nel flacone di raccolta e viene assicurato un buon flusso linfatico prima del risveglio del maiale.

I suini si riprendono bene dalla procedura e viene mantenuto un eccellente flusso linfatico durante l'esperimento. La tabella mostra i componenti della linfa raccolti dal vaso linfatico. Questi componenti includono l'apolipoproteina B48, i trigliceridi e il colesterolo.

La figura del Western Blot mostra la presenza sia di apolipoproteina B48 che di piccole quantità di apolipoproteina B100 derivata dal plasma all'interno del campione linfatico raccolto. Sebbene il cateterismo linfatico nei suini giovani possa essere tecnicamente impegnativo, poiché i vasi linfatici sono delicati e friabili, questo video dimostra che l'utilizzo di una tecnica chirurgica corretta e attenta nei suini giovani può fornire ai ricercatori un modello eccellente per la raccolta della linfa intestinale.