Name: In Vivo quantitativa valutazione della struttura del miocardio, la funzione, la perfusione e sostenibilità Utilizzando cardiaca micro-tomografia computerizzata (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-02-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 13 s
Description: Scopri la micro-tomografia computerizzata quantistica per valutare morfologia, funzione e perfusione cardiaca nei modelli murini di ischemia miocardica. Questa tecnica non invasiva consente studi longitudinali rapidi.

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Questo lavoro è stato sostenuto dalla Stichting Lijf en Leven, progetto dilatando contro stenosante malattia arteriosa.

Ed van D., RR, JE dichiarano di non avere interessi finanziari concorrenti. SB è un impiegato pagato di PerkinElmer, che produce gli strumenti di imaging. spese per la pubblicazione di questo articolo il video sono stati pagati da PerkinElmer.

Nel corso degli ultimi anni microCT è diventata la modalità di molte ricerche prese in considerazione per la caratterizzazione della struttura e della funzione cardiaca nei piccoli animali 26-29,30. Tuttavia, la strumentazione utilizzata nella precedente lavoro era o su misura o non più disponibile in commercio. Come tale, questo studio è stato finalizzato a fornire un protocollo semplice e completo per l&#39;utilizzo del sistema di microCT ad alta velocità con intrinseca gating cardio-respiratorio per determinare la funzione globale e regionale cardiaca con perfusione miocardica e la vitalità nei piccoli animali come modelli di cuore umano malattia. Uno dei requisiti più importanti per studiare la struttura e la funzione del cuore è la capacità dello scanner per tenere conto di movimenti cardiaci fisiologici. A tal fine, ECG-basati tecniche di gating prospettici e retrospettivi possono essere utilizzati. Tuttavia, prospettico (passo e ripresa) gating basa su un intervallo predeterminato del ciclo cardiaco, per l&#39;esamepio durante la diastole, quando il movimento del cuore è meno. Con questo approccio una sola immagine per ciclo cardiaco si ottiene solo una fase del ciclo cardiaco può essere ricostruito. Come tale, oltre ad essere molto tempo per generare, ricostruzioni prospetticamente gated producono solo insieme di dati, che è priva di informazioni funzionali. gating Retrospettiva, invece, permette di ricostruire più set di dati in ciascuna porzione del ciclo cardiaco, permettendo così analisi funzionale globale e regionale ventricolare sinistra. Il lavoro attuale impiegato ricostruzioni cardiorespiratori con intrinseca gating retrospettivo. Intrinseca gating retrospettivo utilizza un software basato su immagini di proprietà di ricostruire end-diastolica e sistolica end-fasi cardiaco senza bisogno di respirazione dedicato e dispositivi di monitoraggio cardiaco 29,31,32. Un eccellente accordo di intrinseca gating retrospettiva retrospettiva ed estrinseca ECG-dipendente per studyifunzione cardiaca ng in topi e ratti è stata dimostrata da Dinkel et al. 29. Nel corso di questo presente lavoro, intrinseca gating retrospettivo non solo significativamente ridotto al minimo il tempo necessario per impostare la scansione, ma anche eliminato la dipendenza su hardware di controllo, come ad esempio derivazioni ECG e sensore pneumatico respiratorie, così come le abilità dell&#39;operatore aggiuntivo per impostare correttamente in su. Dopo la ricostruzione, la qualità delle immagini di entrambi i set di dati end-diastolica e sistolica-end è stato trovato soddisfacente per l&#39;analisi cardiaca. Durante l&#39;esame delle immagini, particolare attenzione è stata posta artefatti da movimento che possono verificarsi durante un inadeguato livello di anestesia, striature artefatti che possono accadere a causa di proiezioni mancanti in animali con artefatti alto tasso di respirazione, bassa attenuazione che sono comunemente causate da strutture ossee e in grado di simulare difetti di perfusione, e artefatti ad anello che possono derivare da errori di calibrazione o il fallimento di uno o più rivelatore di elementi. La capacità di microCT di produrre informazioni strutturali e funzionali cardiaca dipende anche dalla disponibilità di opportuno agente di contrasto intravascolare. La maggior parte attualmente contrasti MicroCT disponibili in commercio possono essere generalmente suddivisi in particelle macrofagi non metabolizzabile specifico e polidisperso contrasti a base di iodio metabolizzabili 23,33-36. Sebbene agenti particolato offrono una maggiore opacizzazione raggi X a causa del loro alto numero atomico (bario, Z = 56; e oro, Z = 79), non possono essere utilizzati per la valutazione metabolica. Inoltre, questi agenti sono considerati nocivi per l&#39;organismo e rimossi dai macrofagi del fegato (cellule di Kupffer), le cellule scavenging del sistema reticoloendoteliale (RES). A causa della loro natura non metabolizzabile, questi agenti inducono cambiamenti al fegato microcircolazione concomitante con danno epatico 37. Metabolizzabile contrasti a base di iodio, d&#39;altro canto, non sono targeTed per la rimozione specifiche-RES, quindi dovrebbe offrire una migliore profilo di sicurezza ed evitare di tossicità epatica. Oltre alla loro migliore profilo di sicurezza, questi contrasti sono prese dai tessuti metabolicamente attive, quindi può essere utilizzato per valutare la vitalità 22,23. A tal fine, l&#39;agente di contrasto iodato è stato selezionato per il presente studio. Il contrasto è stato somministrato alla dose di 5 o 10 ml per grammo di peso corporeo dell&#39;animale come iniezione endovenosa in bolo singolo. Sebbene entrambe le dosi dato risultati soddisfacenti aumento, un aumento dose-dipendente ventricolare sinistra e livelli miocardici di contrasto è stata osservata quando 10 ml / g di contrasto è stato iniettato. Di interesse, con la dose maggiore, la durata della piscina sangue era prolungato e il picco di assorbimento di contrasto del miocardio è stato ritardato. Un animale (topo 1) è stato seguito per 10 settimane dopo l&#39;intervento chirurgico e durante questo periodo è stato ripreso ogni due settimane. Per esperienza, senza effetti negativi legati al contrasto (totale di 5 inproiezioni) o correlati ad esposizione ai raggi X (totale di 10 scansioni MicroCT) sono stati osservati in questo mouse durante il periodo di monitoraggio. Uno degli effetti avversi più comunemente riportati di esposizione di iodio-lungo termine è di disturbo della ghiandola tiroidea che non è stata osservata macroscopicamente su esami post-mortem. Mannheim et al. Livelli di tiroxina studiata dopo 3 amministrazioni contrasto consecutive e hanno trovato alcuna differenza quando i livelli sono stati confrontati con i controlli 37. Con l&#39;uso degli stessi set di dati MicroCT, segni di fibrosi polmonare indotta da radiazioni sono stati rilevati in questo animale (dati non mostrati), conforme alla sicurezza della procedura. Valutazione della funzione cardiaca ventricolare globale e regionale è considerato il più forte determinante della performance cardiaca e importante in termini di prognosi e scelta di intervento terapeutico 38,39. Gli indici funzionali ventricolare sinistra globale includono lasciati volume telediastolico ventricolare (LVEDV), il volume del ventricolo sinistro telesistolico (LVESV), sinistra gittata sistolica ventricolare (LVSV), frazione di eiezione ventricolare sinistra (FEVS), e della gittata cardiaca (CO). Studi precedenti hanno confermato che MicroCT valutazione quantitativa della funzione cardiaca globale è fattibile in modelli murini di malattie cardiovascolari e che diminuzione marcata funzione cardiaca globale ha luogo subito dopo LAD occlusione dell&#39;arteria. Questi risultati sono in accordo con precedenti relazioni in quella marcata riduzione LVSV, FEVS, e CO si è verificato già il giorno 1 dopo l&#39;occlusione 29,40-43. È degno di nota ricordare che cardiaco prestazioni funzionali dipende dal tipo e grado di anestesia, quindi per misurazioni precise della frequenza cardiaca durante l&#39;acquisizione dell&#39;immagine deve essere il più fisiologico possibile 44. Valutazione quantitativa del ventricolo sinistro massa miocardica (LVMM) è importante per la valutazione di ipertrofia ventricolare sinistra e soprattutto è stato condotto utilizzando MRI 11,43,45,46. LVMM è spesso corretta per il peso corporeo e presentato come ventricolo sinistro indice di massa del miocardio (LVMMI) per consentire la normalizzazione del peso cardiaco tra i topi di età e habitus diverso. Stima accurata di questi parametri è importante, come i topi con infarto miocardico sviluppano significativa ipertrofia ventricolare sinistra 47. La valutazione della geometria LVMM, LVMMI, e LV è importante anche per la diagnostica di ipertrofia cardiaca e displasia 11. Come tale, la determinazione di questi parametri sarà inoltre vantaggioso differenziare condizioni quali l&#39;ipertrofia concentrica, ipertrofia eccentrica o concentrica rimodellamento. Nel presente lavoro, sia LVMM e valori LVMMI sono stati determinati nei topi sottoposti a LAD legatura dell&#39;arteria e nell&#39;animale sham-operated. Successivamente, la dimensione di infarto miocardico è stato identificato e utilizzato per calcolare la percentuale delle dimensioni dell&#39;infarto. Anche se durante l&#39;intervento chirurgico per la legatura dell&#39;arteria coronaria LAD era applicato allo stesso livello, l&#39;occlusione generato infarti con una certa variabilità: 13,3%, 15,8% e 22,4% (Tabella 1). Una possibile spiegazione di questa variabilità può derivare da differenze in anatomia coronarica e il loro apporto di sangue territoriale tra gli animali, e in accordo con precedenti relazioni 48. Il modo più comune di valutazione dimensioni dell&#39;infarto in un modello murino di infarto miocardico è da ex vivo colorazione trifeniltetrazolo cloruro (TTC), la tecnica che non consentirebbe il controllo longitudinale della malattia nello stesso animale. Nel contesto di lavoro precedente Ashton et al. 22 e del presente, è da notare che microCT in combinazione con agenti di contrasto iodati può fornire un metodo alternativo e non distruttivo per determinare le dimensioni dell&#39;infarto longitudinalmente. Un ulteriore vantaggio della tecnica microCT risiede nella determinazione molto accurata di ischemia regionale. Like nell&#39;uomo coronaria sinistra delle spaccature topo in un&#39;arteria discendente (LAD) e un ramo settale (LCX). Tuttavia, nei topi, l&#39;anatomia dei rami laterali del LAD e LCX differisce considerevolmente tra gli animali 48. Grandi rami del LCX volte strettamente paralleli LAD e poiché le arterie coronarie dei topi sono intra-miocardica e quindi non visibile, bretelle laterali del LCX sono a volte accidentalmente ma inevitabilmente incluse nel occlusione coronarica durante la procedura di mouse-infarto. Come tale, la mappa polare circumferentional ottenuto dopo microCT può essere utilizzato per determinare esattamente quali arterie coronarie sono occluse, poiché perfusione e contrasto uptake in settori 2, 3, 8 e 9 sono interessate dalla LCX mentre i settori 7, 10, 11, 12 , 13, 15, 16 e 17 sono forniti dal LAD. Di conseguenza, la mappa polare è di grande beneficio per l&#39;accurata determinazione delle arterie occluse e favorisce pertanto importante nella corretta interpretazione degli effetti della myocainfarto rdial della funzione cardiaca e la progressione della malattia. Il modello di infarto infarto del mouse utilizzato altamente imita la situazione clinica umana, dove vasi coronarici diventano improvvisamente occluse a seguito di una rottura della placca acuta ed è come tale di grande beneficio per studiare lo sviluppo della malattia di cuore infartuato 49. Mentre nei paesi occidentali sviluppati trattamento di pazienti affetti da infarto miocardico è volta a ripristinare rapidamente il ricircolo del vaso coronarico, in molte occasioni, in particolare nei paesi economicamente meno sviluppati, dove l&#39;incidenza di infarto del miocardio è in rapida crescita, l&#39;occlusione non può essere annulated in tempo di 1,50. Ciò induce a grandi infarti ventricolare che più spesso porterà a insufficienza cardiaca cronica e sono un enorme onere per la salute pubblica. Di conseguenza, i metodi diagnostici non invasivi longitudinali che utilizzano un modello di infarto del miocardio con una OCC permanente dell&#39;arteria coronarialusion e un grande infarto ventricolare sono di grande importanza per lo sviluppo di nuove strategie di trattamento contro questa malattia. Miocardica imaging di perfusione CT è una tecnica in rapida evoluzione, che permette la valutazione quantitativa delle alterazioni regionali flusso coronarico e la loro rilevanza per la funzione cardiaca e la vitalità. Più recenti studi su animali di piccole dimensioni hanno ridotto il divario tra microCT e SPECT, la modalità di scelta per la perfusione e la vitalità di valutazione 22. Con l&#39;obiettivo di valutare il grado di compromissione del flusso sanguigno regionale causata dalla LAD coronarica occlusione, i dati MicroCT sono stati valutati anche per le informazioni perfusione miocardica. L&#39;arteria LAD ligati è nota per fornire apporto di sangue al muro libera, parte del setto, e la regione apicale del ventricolo sinistro. difetti di perfusione miocardica (aree hypoenhanced) di mouse 1 sono mostrati in un sistema di polari ed evidente di coordinate a metà anteriore, metà inferolaterale, metà antero-laterale, apicaleanteriore e laterali segmenti apicali, i risultati sono coerenti con la stessa distribuzione coronarico (Figura 3). Nessuna differenza tra i difetti di perfusione derivati ​​da immagini end-diastolica e sistolica-end è stato trovato in homosegments. I miocardica di perfusione polari mappa schermi telediastolica e di fine-sistolico dell&#39;animale sham-operati sono mostrati in figura 4. Lievi differenze nel flusso sanguigno miocardico tra i segmenti della animale controllo sono insignificanti in entrambe le rappresentazioni telediastolico e telesistolico . È interessante notare che le aree di hypoenhancement può essere visto visivamente sulle immagini a sezione short-assiali (figura 1) e può essere facilmente quantificati come mostrato nella figura 3. Questo non era possibile nello studio di Befeda et al. E potrebbe essere spiegato con una maggiore rumore dello strumento utilizzato microCT 22. Per discernere visivamente, le differenze di segnale devono essere almeno tre a cinque volte maggiorerispetto al rumore (deviazione standard) nell&#39;immagine 51. A basso rumore del microCT utilizzato in questo studio è permesso il rilevamento di una piccola differenza di segnale tra miocardio alterata e normalmente perfuso (127HU ± 23HU vs. 217HU ± 29HU), che permetta di valutare il successo di difetti del modello perfusione miocardica. Uno dei vantaggi principali di usando agenti di contrasto iodati è la capacità di valutare la vitalità miocardica e metabolismo seguito del miglioramento del miocardio correlati contrasto. A nostra conoscenza, la capacità del contrasto per migliorare il miocardio è stato descritto da Detombe et al. 23 e il suo primo utilizzo per l&#39;imaging L&#39;infarto miocardico è stata riportata da Ashton et al. 22. Sebbene il gruppo indicato che miocardio perfuso in topi con infarto miocardico mostrato miglioramento simile ai controlli, e che il miocardio infartuato mostrato alcun miglioramento, valutazione quantitativa del segmentale miocardica enhancement non è stata riportata. Per studiare ulteriormente se enhancement miocardico può essere valutato quantitativamente, tutti i topi sono stati reimaged utilizzando lo stesso protocollo di imaging 3 - 4 ore dopo la somministrazione di contrasto, quando il miglioramento miocardica rispetto alla cavità è massima. Difetti assorbimento contrasto del miocardio sono stati osservati visivamente sulle immagini a sezione a breve assiale fine diastole e di fine-sistolico di un cuore mouse con infarto miocardico (Figura 5), ma non nel animali sham-operated (Figura 6). Uptake miocardico è stato valutato quantitativamente in ciascun segmento miocardica entrambi ricostruzioni telediastolico e telesistolico e presentati in un sistema di coordinate polari (Figura 7 e 8). I valori homosegmental telediastolico e telesistolico ottenuti dalla stessa animale non erano diverse. Tuttavia, le trame polari circolari hanno mostrato anomalie specifici segmenti (Figure 7) con modelli analoghe a quelli sulla mappa perfusione miocardica (Figura 2). Nessun difetto di captazione di contrasto sono stati visti nelle piazzole polari circonferenza del mouse sham-operated (Figura 8). I dati di assorbimento del miocardio erano di qualità sufficiente per effettuare analisi funzionale globale e valutazione quantitativa della massa miocardica LV e dimensioni dell&#39;infarto (non mostrati). Sebbene non pertinenti al modello attualmente utilizzato con LAD permanente dell&#39;arteria coronaria occlusione, riteniamo che contrasto estrazione miocardica può essere correlata non solo ad alterazioni nel flusso ematico miocardico regionale, ma anche lo stato dei cardiomiociti (es cicatrici, storditi e miocardio ibernato) . Per verificare questa ipotesi, il lavoro futuro impiegherà il modello con ischemia miocardica temporanea e riperfusione. contrazione attiva dei risultati del miocardio in movimento della parete miocardica e ispessimento che servono come importanti marcatori di sistolica funzione e vitalità miocardica. Valutazione del movimento regionale parete, ispessimento, e frazione di eiezione aiuta a discernere passiva movimento della parete sistolica da contrazione del miocardio attiva. Al fine di consentire la quantificazione standardizzata e della gravità della lesione, movimento della parete, ispessimento della parete e frazione di eiezione regionali sono comunemente mappati in mappe polari. Anomalie di movimento della parete ventricolare regionale sono importanti marcatori di ischemia miocardica che sono più comunemente valutati da RM 52. I punteggi di movimento muro LV, ispessimento e la frazione di eiezione regionale per ogni segmento di un mouse con e senza infarto miocardico sono presentati in Figura 9 e Figura 10. Come ci si aspettava, il LAD coronarica legatura dell&#39;arteria ha provocato notevole diminuzione di LV indici funzionali regionali ( Figura 9), mentre nessun effetto è stato osservato nel topo sham (Figura 10). Questi risultati sono in accordo conprecedentemente riportati i dati. In conclusione, questo lavoro ha dimostrato il primo successo nell&#39;uso di un sistema microCT ad alta velocità per la determinazione completa dei parametri funzionali globali e regionali del miocardio insieme con la valutazione della perfusione miocardica e la vitalità nel sano e in un modello murino di infarto miocardico. Questo lavoro può essere ulteriormente esteso verso caratterizzazione di altri modelli di malattie cardiovascolari, che consente una valutazione precisa e non distruttiva di alterazioni funzionali e fisiopatologiche cardiaci, e per la valutazione di strategie preventive e terapeutiche.

Cardiopatia ischemica (IHD) continua ad essere la principale causa di morbilità e mortalità per gli uomini e le donne in tutto il mondo 1. A causa della complessità e interrelazioni esistenti tra gli organi e sistemi a livello organismal, l&#39;uso di tutto l&#39;animale come un modello di IHD rimane rilevante non solo per la migliore comprensione della malattia fisiopatologia, ma anche permettere la valutazione delle strategie preventive e terapeutiche . Modelli di mouse, in particolare, hanno contribuito alla nostra conoscenza di sviluppo cardiaco, patogenesi di infarto del miocardio, l&#39;ipertrofia del miocardio, la miocardite, e le lesioni aneurismatiche 2-7. I parametri che determinano funzione cardiaca e che sono utili in termini di prognosi e scelta dell&#39;intervento terapeutico sono massa cardiaca e la geometria, funzione globale e regionale, la distribuzione spaziale del flusso miocardico e vitalità miocardica. Tuttavia, la maggior parte di traditional metodi di sperimentazione utilizzati in modelli murini di malattie cardiache coinvolgono misurazioni invasive che richiedono ore per il completamento, quindi l&#39;animale non può essere utilizzato per misure di ripetizione, o il metodo richiederanno animale sacrificare 8-12. Ad esempio, per misurare la perfusione miocardica regionale, microsfere marcate radioattivamente o fluorescente vengono utilizzati laddove conteggio radioattivi o segnali fluorescenti vengono rilevati su un cuore sezionato fisicamente o in situ 13,14. Analogamente, la valutazione delle dimensioni dell&#39;infarto in modelli animali di infarto miocardico è più comunemente eseguita da cloruro trifeniltetrazolio (TTC) colorazione, e al fine di determinare l&#39;andamento temporale dell&#39;evoluzione dell&#39;infarto e l&#39;effetto di interventi terapeutici, questa tecnica richiede che gli animali devono essere sacrificato per il cuore esame istopatologico in vari momenti 15. Come tale, non distruttivi e umane tecniche che permetterebbero quantitativE e analisi longitudinale della morfologia cardiaca, la funzione, il metabolismo e la vitalità sono di fondamentale importanza. In questo contesto, l&#39;imaging preclinico è di grande importanza. Tra le modalità di imaging attualmente disponibili risonanza magnetica (MRI) e l&#39;ecocardiografia sono il più comunemente usato 16,17,18. Tuttavia, e nonostante il fatto che la RM è considerata la modalità di riferimento sia il lavoro clinico e preclinico, l&#39;alto costo di acquisire e mantenere sistemi MRI piccolo animale dedicati, nonché la complessità di questa tecnologia per utenti non avanzati di operare , fare la risonanza magnetica proibitivo per l&#39;uso di routine. Per quanto riguarda l&#39;ecocardiografia, esistono notevoli svantaggi per il modo in cui viene misurata la funzione cardiaca. I dati prodotti dalla maggior parte degli esami ecocardiografici sono bidimensionali, e al fine di ricavare volumi, ipotesi geometriche devono essere fatte 19. Inoltre, la scarsa ripr intra e inter-osservatoreoducibility è un&#39;altra limitazione significativa di questa tecnica. L&#39;imaging radioisotopi con singola tomografia ad emissione di fotoni (SPECT) e la tomografia ad emissione di positroni (PET) sono prevalentemente utilizzati per la valutazione della perfusione miocardica e metabolismo 17,20,21. Tuttavia, la risoluzione spaziale limitata di queste modalità di imaging rende imaging cardiaco nei topi di sfida. D&#39;altra parte, con l&#39;avvento della tecnologia rilevatore a pannello piatto che permette una migliore sensibilità a raggi X e tempi di lettura più veloce, lo stato attuale della tecnica sistemi MicroCT possono fornire cardio-respiratorio gated tridimensionale (3D) e quattro dimensioni ( 4D) immagini di qualità MRI-grade. Sono praticamente dei costi di manutenzione e facile da utilizzare da utenti non esperti. Così, tali strumenti MicroCT possono essere adatto per l&#39;esame di routine di piccoli animali come modelli di malattie umane. Soprattutto, con lo sviluppo di un nuovo agente di contrasto iodurato preclinica, svalutazione funzionale e metabolico imultaneous del cuore è diventato possibile 22-24. Questo agente di contrasto contiene un&#39;alta concentrazione di iodio (160 mg / ml), producendo sangue forte-pool contrasto dopo la somministrazione endovenosa consentendo imaging in vivo dei vasi e le camere cardiache. Entro un&#39;ora dopo la somministrazione, un continuo aumento di contrasto del miocardio associato al suo assorbimento metabolico può osservare, così lo stesso agente di contrasto può essere utilizzato per la valutazione di infarto stordimento e redditività. L&#39;obiettivo della tecnica descritta in questo manoscritto è quello di consentire ai ricercatori di utilizzare il sistema microCT ad alta velocità con intrinseca gating cardio-respiratorio, in collaborazione con il sangue-piscina agenti di contrasto iodati, per determinare la funzione globale e regionale del miocardio con perfusione miocardica e redditività in topi sani e in un modello murino di ischemia cardiaca indotta dall&#39;occlusione permanentedella discendente anteriore dell&#39;arteria coronaria (LAD). Utilizzando questa tecnica modello animale e di imaging, rapida valutazione dei più importanti parametri cardiaci può essere eseguita ripetutamente con una singola modalità di imaging e senza la necessità di procedure invasive o dover sacrificare gli animali. La tecnica può essere eseguita per valutare le strategie preventive e terapeutiche.

<table><tbody><tr><td>Sistema di imaging Quantum FX MicroCT</td><td>PerkinElmer, Hopkinton, MA, USA</td><td></td><td>Sistema di micro tomografia computerizzata</td></tr><tr><td>XGI-8 Sistema di anestesia</td><td>PerkinElmer, Hopkinton, MA, USA</td><td>Cat. N. 118918</td><td>Sistema di anestesia gassosa</td></tr><tr><td>Analyze 12.0 Software</td><td>Analyze Direct, Overland Park, KS, USA</td><td></td><td>Software di visualizzazione e analisi per l'imaging</td></tr><tr><td>eXIA160 MicroCT Contrasto</td><td>Binitio Biomedical, Ottawa, ON, CANADA</td><td>Cat. No. eXIA160-01; eXIA160-02; eXIA160-03; eXIA160-04; eXIA160-05</td><td>Radiocontrasto a base di iodio per imaging MicroCT</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Pharmachemie BV, Haarlem, Paesi Bassi</td><td>Cat. No. 45.112.110</td><td>anestesia per inalazione</td></tr><tr><td>1/2CC U-100 28G1/2 Siringa da insulina</td><td>Becton Dickinson and Company, USA</td><td>Cat. N. 329461</td><td>Siringhe per insulina con interno sterile</td></tr><tr><td>Microscopio Leica tipo M80</td><td>Leica Microsystems BV, Eindhoven, Paesi Bassi</td><td></td><td>Stereomicroscopio zoom</td></tr></tbody></table>

in vivo quantitativa valutazione della struttura del miocardio, la funzione, la perfusione e sostenibilità utilizzando cardiaca micro-tomografia computerizzata

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

L'uso della Micro-Tomografia Computerizzata (MicroCT) per studi in vivo di piccoli animali come modelli di malattie umane è aumentato enormemente a causa del fatto che la MicroCT fornisce dati anatomici tridimensionali (3D) quantitativi ad alta risoluzione in modo non distruttivo e longitudinale. Ancora più importante, con lo sviluppo di un nuovo mezzo di contrasto iodato preclinico chiamato eXIA160, è diventata possibile la valutazione funzionale e metabolica del cuore. Tuttavia, prima dell'avvento degli scanner MicroCT commerciali dotati di tecnologia di rilevamento a schermo piatto a raggi X e di un gating cardiorespiratorio facile da usare, gli studi preclinici sulle malattie cardiovascolari (CVD) nei piccoli animali richiedevano un tecnologo MicroCT con competenze avanzate e quindi erano poco pratici per un'implementazione diffusa. L'obiettivo di questo lavoro è fornire una guida pratica all'uso del sistema MicroCT Quantum FX ad alta velocità per la determinazione completa della funzione miocardica globale e regionale insieme alla valutazione della perfusione miocardica, del metabolismo e della vitalità in topi sani e in un modello murino di ischemia cardiaca indotta dall'occlusione permanente dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra (LAD).

MicroCT Acquisition, Immagine Ricostruzione, e valutazione della qualità immagine. Quattro topi C57BL / 6, tre con l&#39;occlusione LAD permanente e uno sham-operated, con successo recuperato dalla chirurgia e completato il protocollo di imaging, che consisteva in un unico mezzo di contrasto somministrazione endovenosa in bolo e due acquisizioni MicroCT cardio-respiratorio 4.5-min. La frequenza cardiaca media nel corso degli studi MicroCT era di 385 ± 18 battiti al minuto. End-diastolica e ricostruzione di immagini telesistolica usati proprietaria intrinseca gating basato su immagini, in cui ha dedicato apparecchi respiratori e il monitoraggio cardiaco, come derivazioni ECG e sensore pneumatico respiratorie non erano necessari. Dopo la ricostruzione, la qualità delle immagini di entrambi i set di dati end-diastolica e sistolica-end è stata in anteprima utilizzando software di visualizzazione 2D. La qualità delle immagini è stato trovato soddisfacente e non c&#39;era bisognodi effettuare acquisizioni di immagini aggiuntive. Così, tutti i dati riportati sono stati ottenuti da due scansioni per il mouse; la prima scansione presa 10 minuti dopo l&#39;iniezione durante la fase piscina sangue del contrasto, e la seconda scansione acquisito 3-4 ore dopo l&#39;iniezione durante la fase di assorbimento metabolico del contrasto. Rappresentativa sangue-pool breve assiali telediastolico e telesistolico sezioni trasversali di un cuore mouse con infarto miocardico (Figura 1) e di un cuore mouse senza infarto miocardico (Figura 2) ha dimostrato eccellenti delineazione cavità ventricolare sinistra con rumore di fondo , consentendo la valutazione anatomica e funzionale accurata. Aree di rarefazione contrasto corrispondenti ad infarto miocardico erano ben delimitate sulle immagini short-assiali del cuore del mouse sottoposto alla LAD legatura coronarica (figura 1), ma non nel animali sham-operate (Figura 2). quantitativa Valutazione della funzione ventricolare sinistra. segmentazioni 3D basato su soglie sono stati eseguiti su entrambi i volumi di fine-diastolica e sistolica di fine per determinare il volume ventricolare sinistro telediastolico (LVEDV) e del ventricolo sinistro volume telesistolico (LVESV) in ogni animale. Sinistra gittata sistolica ventricolare (LVSV), frazione di eiezione ventricolare sinistra (FEVS), e della gittata cardiaca (CO) sono stati calcolati da LVEDV e LVESV secondo le formule descritte nella sezione 5. I risultati di volume e di misurazioni funzionali globali sono riassunte nella Tabella 1 . Tre ore dopo la legatura, il normalizzata per il peso corporeo dell&#39;animale significa LVEDV non era differente tra il gruppo infarto del miocardio e l&#39;animale sham-operated (2,8 ± 0,23 vs. 2,3). Tuttavia, il peso del corpo normalizzato media LVESV era più alta nel gruppo di infarto miocardico (2.1 ± 0.31 vs. 0.92). Corrispondentely, la media LVEF e gittata cardiaca (CO) in topi con occlusione LAD coronarica erano inferiori rispetto al mouse sham-operated (23,1% ± 7,1% contro il 60,5% e 0,26 ml ± 0,08 ml vs. 0,55 ml rispettivamente ). Valutazione quantitativa di LV Myocardial Infarction Messa e dimensioni. Entrambi massa ventricolare sinistra miocardio (LVMM) e l&#39;indice di massa del miocardio ventricolare sinistra (LVMMI) sono stati determinati sulla base di epicardico e segmentazioni tra cui endocardici muscoli papillari e trabecole. Entrambe le ricostruzioni telediastolico e telesistolico sono stati elaborati ed i valori per entrambi i gruppi di infarto del miocardio e l&#39;animale sham-operati sono riassunti nella tabella 1. Volumi infarto del miocardio sono stati determinati sulla base di rarefazione contrasto con soglia a base di volumetria 3D. Come mostrato nella Tabella 1, tre ore dopo LAD coronary arteria legatura zone a rischio (AAR) in topo 1, 2, e 3 erano 22,4%, 13,3% e 15,8% del LVMM rispettivamente. Perfusione miocardica Imaging (MPI). Rappresentante end-sistolica circonferenza viene creato il diagramma polare (Bulls Eye diagrammi polari) di perfusione miocardica in un mouse con infarto del miocardio (Mouse 1) e un mouse senza infarto miocardico (Mouse 4) telediastolica e sono illustrati nelle figure 3 e 4. Le immagini usate per produrre le trame sono state acquisite 10 minuti dopo la somministrazione di contrasto e 3 ore dopo la legatura LAD. I valori homosegmental telediastolico e telesistolico ottenuti dalla stessa animale non erano diverse. Tuttavia, è stato osservato hypoenhancement a metà anteriore, metà inferolaterale, metà antero-laterale, anteriore apicale, e segmenti laterali apicali di un mouse con infarto afarction, menomazioni che dimostrano di flusso coronarico causate da occlusione dell&#39;arteria LAD (Figura 3). Nessun tale insufficienza potrebbe essere osservato nel cuore dell&#39;animale sham-operated (Figura 4). Miocardica Viabilità e il metabolismo. Rappresentante end-sistolica circonferenza viene creato il diagramma polare (Bulls Eye diagrammi polari) di infarto assorbimento metabolico in un mouse con infarto del miocardio (Mouse 1) e un mouse senza infarto miocardico (Mouse 4) telediastolica e sono mostrati nelle figure 7 e 8. Le immagini usate per produrre le trame sono state acquisite 3-4 ore dopo la somministrazione di contrasto e 5-6 ore dopo la legatura LAD. Dissimile captazione contrasto infarto potrebbe essere anche visivamente osservato in sezioni brevi-assiale di un cuore del mouse che ha subito LAD coronarica (occlusione dell&#39;arteria <strong&gt; Figura 5), ma non nel topo sham (Figura 6). I valori di omo-segmentale end-diastolica e sistolica-end ottenuti dalla stessa animale non erano diverse. I diagrammi polari circolari hanno mostrato anomalie specifici segmenti (figura 7) con il modello simile a quello mostrato nelle mappe di perfusione miocardica (Figura 2). Nessun difetto di captazione di contrasto sono stati visti nelle piazzole polari circonferenza del mouse sham-operated (Figura 8). Valutazione quantitativa di LV funzione regionale. La qualità delle immagini è stato soddisfacente per effettuare la valutazione visiva del movimento del ventricolo sinistro e l&#39;ispessimento da ricostruzioni di fine-diastolica e sistolica-end in tutti i topi creata l&#39;immagine. I punteggi di movimento muro LV, ispessimento e la frazione di eiezione regionale per ogni segmento di un mouse con e senza il mio<html> infarto ocardial sono riportati nella Figura 9 e Figura 10. Come ci si aspettava, la LAD coronaria legatura dell&#39;arteria comportato notevole diminuzione di LV indici funzionali regionali (Figura 9), mentre nessun effetto è stato osservato nel topo sham (Figura 10). <img alt="Figura 1" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig1.jpg" /> Figura 1. Rappresentante sangue-piscina a breve assiale fine diastole (A) e di fine-sistolico (B) sezioni di un cuore mouse con infarto miocardico (mouse 1). Le immagini sono state acquisite 3 ore dopo LAD coronarica occlusione dell&#39;arteria e 10 minuti dopo la somministrazione di contrasto. Il contrasto negativo notato da frecce gialle è dovuto alla mancanza di opacizzazione contrasto nella regione infartuata. /53603/53603fig2.jpg &quot;/&gt; Figura 2. Rappresentante sangue-piscina a breve assiale fine diastole (A) e di fine-sistolico (B) sezioni di un cuore del mouse senza infarto miocardico (mouse 4). Le immagini sono state acquisite 3 ore dopo sham-operation e 10 minuti dopo la somministrazione di contrasto. Contrasto opacizzazione è uniformemente presente in tutte le sezioni del miocardio. <img alt="Figura 3" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig3.jpg" /> Figura 3. Rappresentante end-sistolica circonferenza viene creato il diagramma polare (Bulls Eye diagrammi polari) di perfusione miocardica in un mouse con infarto miocardico (mouse 1) end-diastolica e. (A) Il ventricolo sinistro è suddiviso in basale, a metà della cavità, e apicali quote a breve assiale secondo la 17-segmento AHA modello 25. perfusione dissimile è chiaramente visibile a metà anteriore, metà inferolaterale, metàantero-laterale, anteriore apicale, e segmenti laterali apicali. I valori indicati rappresentano la segmentale significa in unità Hounsfield ± deviazioni standard. (B) le mappe di perfusione miocardica sono mostrati senza suddivisione in 17 segmenti. Il centro della trama corrispondente apice cardiaco (segmento 17) non è mostrato. <img alt="Figura 4" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig4.jpg" /> Figura 4. Rappresentante end-sistolica circonferenza viene creato il diagramma polare (Bulls Eye diagrammi polari) di perfusione miocardica in un mouse senza infarto miocardico (mouse 4) fine diastole e. (A) Il ventricolo sinistro è suddiviso in basale, a metà della cavità, e apicali quote a breve assiale secondo la 17-segmento AHA modello 25. perfusione simile è presente in tutti i segmenti. I valori indicati rappresentano la segmentale significa in unità Hounsfield ± deviazioni standard. (B) le mappe di perfusione miocardica sono mostrati senza suddivisione in 17 segmenti. Il centro della trama corrispondente apice cardiaco (segmento 17) non è mostrato. <img alt="Figura 5" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig5.jpg" /> Figura 5. Rappresentante metabolica uptake breve assiale telediastolica (A) e telesistolico (B) sezioni trasversali di un cuore mouse con infarto miocardico (mouse 1). Le immagini sono state acquisite 6-7 ore dopo LAD coronarica occlusione dell&#39;arteria e 3-4 ore dopo la somministrazione del contrasto. Il contrasto negativo notato da frecce bianche è dovuto alla mancanza di contrasto metabolica assorbimento nella regione infartuata. <img alt="Figura 6" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig6.jpg" /> Figura 6. assorbimento rappresentante metabolica breve assiale fine diastole ( <strong&gt; A) e telesistolico (B) sezioni trasversali di un cuore di mouse senza infarto miocardico (mouse 4). Le immagini sono state acquisite 6-7 ore dopo sham-operation e 3-4 ore dopo la somministrazione di contrasto. Miocardica assorbimento metabolico di contrasto è uniformemente presente in tutte le sezioni. <img alt="Figura 7" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig7.jpg" /> Figura 7. rappresentativi end-diastolica e sistolica-end circonferenza trama display polari (Bulls Eye diagrammi polari) di infarto assorbimento metabolico in un mouse con infarto del miocardio. (A) Il ventricolo sinistro è suddiviso in basale, a metà della cavità, e apicale breve porzioni -axial secondo il 17-segmento AHA modello 25. Dissimile assorbimento metabolico è chiaramente visibile a metà antero-laterale, anteriore apicale, apicale inferiore, e segmenti laterali apicali. I valori indicati rappresentano i mezzi segmentale in Hounsfield units ± deviazioni standard. (B) mappe metaboliche di assorbimento miocardico sono mostrati senza suddivisione in 17 segmenti. Il centro della trama corrispondente apice cardiaco (segmento 17) non è mostrato. <img alt="Figura 8" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig8.jpg" /> Figura 8. Rappresentante end-diastolica e sistolica-end circonferenza trama display polari (Bulls Eye diagrammi polari) di infarto assorbimento metabolico in un mouse senza infarto miocardico. (A) Il ventricolo sinistro è suddiviso in basale, a metà della cavità, e apicale breve porzioni -axial secondo il 17-segmento AHA modello 25. Dissimile assorbimento metabolico è chiaramente visibile a metà antero-laterale, anteriore apicale, apicale inferiore, e segmenti laterali apicali. I valori indicati rappresentano la segmentale significa in unità Hounsfield ± deviazioni standard. (B) Metaboli miocardicomappe c assorbimento sono mostrati senza suddivisione in 17 segmenti. Il centro della trama corrispondente apice cardiaco (segmento 17) non è mostrato. <img alt="Figura 9" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig9.jpg" /> Figura 9. Rappresentante movimento della parete miocardica (mm), ispessimento della parete (%), e la frazione di eiezione regionale (%) circonferenziali viene creato il diagramma polare (Bulls Eye diagrammi polari) di un mouse con infarto del miocardio. (A) Il ventricolo sinistro è suddiviso in basale, a metà della cavità, e apicali quote a breve assiale secondo la 17-segmento AHA modello 25. La presenza di ipocinetiche, acinetici, e le regioni discinetici a metà della cavità e le porzioni apicali denotano ampio difetto del miocardio. (B) Le mappe di misura miocardici regionali sono mostrati senza suddivisione in 17 segmenti. Il centro della trama corrispondente apice cardiaco (segmento 17) ènon mostrato. <img alt="Figura 10" src="/files/ftp_upload/53603/53603fig10.jpg" /> Figura 10. Rappresentante movimento della parete miocardica (mm), ispessimento della parete (%), e la frazione di eiezione regionale (%) circonferenziali viene creato il diagramma polare (Bulls Eye diagrammi polari) di un mouse senza infarto miocardico. (A) Il ventricolo sinistro è suddiviso in basale, a metà della cavità, e apicali quote a breve assiale secondo la 17-segmento AHA modello 25. viene rilevata alcuna anomalia evidente. (B) Le mappe di misura miocardici regionali sono mostrati senza suddivisione in 17 segmenti. Il centro della trama corrispondente apice cardiaco (segmento 17) non è mostrato. <img alt="Tabella 1" src="/files/ftp_upload/53603/53603table1.jpg" /> Tabella 1. volumi del ventricolo sinistro e globali indici funzionali di misura. rato in tre topi 3 ore dopo l&#39;occlusione LAD coronarica e in un topo sham-operated * BPM, battiti al minuto; LVEDV, lasciò volume telediastolico ventricolare; LVESV, lasciò volume telesistolico ventricolare; LVSV, gittata sistolica del ventricolo sinistro; FEVS, frazione di eiezione ventricolare sinistra; CO, gittata cardiaca; LVMV TOTALE, il volume del ventricolo sinistro del miocardio totale; LVMM, ventricolare sinistra di massa del miocardio; LVMMI, ventricolare sinistra indice di massa del miocardio; LVMV MI, il volume del ventricolo sinistro infarto del miocardio; % LVMIS,% del ventricolo sinistro del miocardio dimensione dell&#39;infarto.

Questo metodo delinea l'uso della tomografia micro-computerizzata quantistica (MicroCT) per valutare la morfologia cardiaca, la funzione, la perfusione, il metabolismo e la vitalità con l'agente di contrasto iodato nei topi con ischemia miocardica indotta sperimentalmente. La tecnica può essere applicata per l'imaging longitudinale in vivo non distruttivo ad alto rendimento di vari modelli animali di cardiopatia umana.

In Vivo quantitativa valutazione della struttura del miocardio, la funzione, la perfusione e sostenibilità Utilizzando cardiaca micro-tomografia computerizzata

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that ...

L'obiettivo generale di questo procedimento è dimostrare l'uso della micro-tomografia computerizzata ad alta velocità nell’imaging della sincronizzazione cardiorespiratoria intrinseca per valutare le funzioni miocardiche globali e regionali in un modello murino di ischemia cardiaca. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande fondamentali nella fisiopatologia cardiaca, come ad esempio quali sono gli effetti della patologia o di trattamenti inadeguati sulla funzione miocardica globale e regionale? Il principale vantaggio di questa tecnica è che consente una valutazione rapida, longitudinale e non invasiva dei parametri cardiaci più importanti, facilmente eseguibile anche da personale non specializzato.Le implicazioni di questa tecnica si estendono alla terapia delle malattie cardiovascolari. Può essere utilizzata come strumento preclinico per ottenere informazioni avanzate sullo sviluppo delle malattie cardiache. A mostrare la procedura saranno Nicole van Vliet, una tecnica, nonché Elza van Deel, che è un post-doc, e Yanto Ridwan, un altro tecnico del nostro laboratorio.Iniziare praticando una piccola incisione nella pelle di un topo di 12 settimane tra la seconda e la terza costola. Successivamente, utilizzando piccoli uncini, spostare i muscoli toracici per esporre i muscoli intercostali. Poi usare forbici a molla con lama curva da due millimetri per tagliare con attenzione il terzo muscolo intercostale senza danneggiare i polmoni.Quindi, utilizzando una pinzetta, rompere il pericardio e usare un pezzo di garza bagnata per spostare i polmoni. Riposizionare i ganci all'interno del torace in modo da rendere visibile una vasta parte della parete libera del ventricolo sinistro e una porzione dell'atrio sinistro. Successivamente, utilizzando l'atrio come riferimento per individuare l'arteria coronaria sinistra, inserire un filo di sutura chirurgica in seta sette zero sotto l'arteria coronaria sinistra e annodare il filo a due millimetri al di sotto del margine dell'atrio sinistro per standardizzare le dimensioni dell'infarto.Dopo aver confermato visivamente il successo dell'induzione dell'infarto mediante lo sbiancamento della parete libera del ventricolo sinistro, reinflare con attenzione il polmone e chiudere saldamente il torace con un punto chirurgico in seta sei zero. Pulire la ferita con soluzione fisiologica e utilizzare ulteriori punti in seta per chiudere la cute, quindi applicare uno spray per ferite per stimolare la guarigione e prevenire infezioni. Successivamente, posizionare il topo in una gabbia su un tappetino riscaldante fino a quando non si sarà completamente ripreso.Tre o quattro ore dopo l'intervento chirurgico, accendere lo scanner microCT, aprire il software di controllo microCT e riscaldare il tubo a raggi X. Quindi trattare il tappo in gomma del contenitore di un agente di contrasto iodinato con alcol al 70% ed utilizzare una siringa a basso spazio morto per prelevare da cinque a dieci microlitri di agente per grammo del peso corporeo dell'animale. Dopo aver eliminato le bolle d'aria, disinfettare la coda del topo anestetizzato con alcol al 70% e dilatare mediante calore le vene della coda.Iniettare l'agente di contrasto in una vena laterale della coda. Quando il pulsante della modalità live appare nel software di controllo, il tubo a raggi X è pronto. Inserire il coperchio per piccolo foro e il lettino per piccoli animali.Fare clic sul pulsante del nuovo database nella finestra del database e inserire un nome per il nuovo database. Quando appare la finestra di dialogo, fare clic sul pulsante Sfoglia e spostarsi sul disco in cui il database verrà salvato. Quindi fare clic su OK e osservare il nuovo database nella finestra del database.Per impostare le condizioni di scansione, selezionare i parametri appropriati. Posizionare ora il topo iniettato e anestetizzato sul lettino per animali all'interno dello scanner e scorrere la porta dello strumento verso destra per attivare il blocco di sicurezza. Fare clic sul pulsante della modalità live per visualizzare in tempo reale il soggetto e osservare la finestra di acquisizione dei raggi X e l'animale.Premendo i pulsanti di controllo dell'asse Z della piattaforma in avanti e indietro, spostare il lettino animale finché il torace del topo non si trova all'interno del campo visivo. Quindi utilizzare le frecce sinistra e destra del controllo del lettino animale per posizionare l'animale all'interno del riquadro blu. Selezionare 90 dall'elenco a discesa del controllo di rotazione nella finestra del software di controllo e fare clic sul pulsante impostato per ruotare il sistema, assicurandosi che l'animale rimanga all'interno del riquadro blu della finestra di acquisizione X.Nella finestra di acquisizione X, fare clic con il pulsante sinistro del mouse per ridimensionare la regione di interesse cardiorespiratoria. Trascinare i bordi in modo che i tracciati cardiorespiratori siano chiaramente visibili nella vista di sincronizzazione. Premere la posizione iniziale e ridimensionare la regione di interesse per la funzione cardiorespiratoria.Assicurarsi che l'area di interesse copra il diaframma e la porzione apicale del cuore in tutte le posizioni del gantry. Quindi ruotare il gantry di 90 gradi per verificare che i tracciati cardiorespiratori siano ancora chiaramente visibili. Quando l'animale è posizionato, fare clic sul pulsante di scansione TC per avviare l'acquisizione.Apparirà il messaggio di conferma della scansione TC. Fare clic su sì. L'indicatore rosso di attivazione dei raggi X si accenderà, l'apparecchio si attiverà e la scansione avrà inizio.Al termine della scansione, osservare le viste trasversali, coronali e sagittali delle ricostruzioni mediante un software di visualizzazione 2D. Infine, rimuovere l'animale dallo scanner e monitorarlo fino a quando non si sarà completamente ripreso. Di seguito sono mostrate sezioni trasversali endo-diastolica ed endo-sistolica rappresentative del compartimento ematico di un cuore di topo con infarto miocardico.In queste immagini, sezioni trasversali assiali corte in fase di fine diastole e di fine sistole di un cuore di topo senza infarto miocardico mostrano una delimitazione eccellente della cavità del ventricolo sinistro con poco rumore di fondo. Si noti come le aree di rarefazione del contrasto, corrispondenti all'infarto miocardico, siano state ben delimitate nelle immagini assiali corte del cuore di topo sottoposto alla legatura dell'arteria coronaria discendente anteriore sinistra. Ma non nell'animale sottoposto a intervento fittizio.Secondo il modello dell'American Heart Association a 17 segmenti, il ventricolo sinistro può essere suddiviso in porzioni assiali brevi basali, medie e apicali. In questi rappresentativi grafici polari circonfereziali, si osserva chiaramente una perfusione disomogenea nei segmenti medio-anteriore, medio-inferolaterale, medio-anterolaterale, apicale anteriore e apicale laterale nel topo con infarto miocardico rispetto all'animale sottoposto a intervento fittizio. Una volta acquisita padronanza della tecnica, l'induzione di infarto miocardico può essere completata in 45 minuti, mentre l'imaging successivo mediante microCT richiede quattro ore.Nel corso di questa procedura, è importante ricordare che le prestazioni funzionali cardiache dipendono dal tipo e dal grado di anestesia. Pertanto, per ottenere misurazioni accurate, la frequenza cardiaca deve essere mantenuta il più possibile fisiologica durante l'acquisizione delle immagini. Dopo il suo sviluppo, questa tecnica ha aperto la strada ai ricercatori nel campo della farmacologia per esplorare strategie di intervento nei topi e analizzare l'impatto di diverse strategie terapeutiche sull'evoluzione della malattia.Dopo aver visto questo video, si dovrebbe avere una buona comprensione dell'intervento chirurgico per infarto miocardico e sapere come utilizzare il sistema microCT ad alta velocità in combinazione con l'agente di contrasto a base di iodio per il pool sanguigno. Non dimenticare che lavorare con l'isoflurano può essere pericoloso e che precauzioni come un'adeguata ventilazione devono essere sempre adottate durante l'esecuzione di questa procedura.

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