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DOI: 10.3791/53645-v
William L. Slone*1, Blake S. Moses*1, Rebecca Evans1, Debbie Piktel1, Karen H. Martin1,2, William Petros1, Michael Craig1, Laura F. Gibson1,3
1Alexander B. Osborn Hematopoietic Malignancy and Transplantation Program of the Mary Babb Randolph Cancer Center, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 2Department of Neurobiology and Anatomy, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine, 3Department of Microbiology, Immunology and Cell Biology, Robert C. Byrd Health Sciences Center,West Virginia University School of Medicine
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Il presente rapporto riassume un protocollo che può essere utilizzato per modellare l'influenza della nicchia del microambiente del midollo osseo sulle cellule leucemiche con particolare attenzione all'arricchimento della sottopopolazione più chemioresistente.
L'obiettivo generale di questa procedura è quello di modellare meglio la leucemia linfoblastica acuta resistente, o ALL, in vitro. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel trattamento della LLA refrattaria su come il microambiente del midollo osseo influenzi la resistenza chemioterapica delle cellule LLA. I principali vantaggi di questa tecnica sono che è considerevolmente più economica e richiede meno tempo rispetto all'utilizzo di modelli animali tradizionali per esaminare l'advocacy dei farmaci sulle cellule refrattarie di LLA.
Iniziare seminando da cinque a 20 volte da 10 a seste cellule leucemiche in 10 millilitri di terreno di coltura specifico per il tumore su una piastra da 100 millimetri di cellule stromali confluenti del midollo osseo all'80-90% o osteoblasti. Ogni quattro giorni, inclinare la piastra di lato e aspirare tutto tranne un millilitro del terreno, facendo attenzione a non disturbare lo strato cellulare aderente. Quindi, aggiungere con cautela nove millilitri di terreno di coltura cellulare leucemica fresca goccia a goccia nell'angolo della piastra lungo il lato per garantire una rottura minima delle cellule aderenti.
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