Saggio altamente sensibile per la misura dell'attaccamento Arenavirus-cell

L'obiettivo generale di questo protocollo è misurare quantitativamente l'attaccamento delle particelle di arenavirus alle cellule ospiti. Il vantaggio principale di questa tecnica è la sua elevata sensibilità. Può anche essere adattato per misurare l'endocitosi del virione, nonché il rilascio del genoma nel citoplasma dopo la fusione.

Per iniziare, per fare il DMEM completo, a un flacone da 500 millilitri di DMEM, aggiungere 50 millilitri di siero fetale bovino inattivato a calore e cinque millilitri ciascuno di penicillina-streptomicina 100X e tampone HEPES 100X. Alla fine della giornata, seminare 2,5 volte 10 al 4° Vero E6 cellule per pozzetto, in triplicato per ogni virus, in una piastra di coltura tissutale da 48 pozzetti in un volume finale di 500 microlitri di DMEM completo. Incubare la piastra a 37 gradi Celsius in un'incubatrice umidificata con il 5% di anidride carbonica per 10-18 ore.