Microscopia di lievito di fissione del ciclo di vita sessuale

L'obiettivo generale di questo metodo è quello di monitorare l'intero processo di riproduzione sessuale nel lievito di fissione mediante microscopia ottica. Questo metodo descrive la preparazione di cellule di lievito a fissione per l'imaging time-lapse di varie fasi del ciclo di vita sessuale, come la scelta del partner di accoppiamento, la crescita polarizzata, la fusione cellula-cellula, la miosi e la sporulazione. Il vantaggio principale di questa tecnica è che fornisce la visualizzazione di una singola cellula e quindi supera il problema che le cellule non entrano nella differenziazione sessuale in modo sincrono.

Questo metodo è molto semplice, ma la dimostrazione visiva è utile per mostrare come montare diversi ceppi in parallelo per la microscopia. A dimostrare la procedura con la mia dottoranda Omaya Dudin, sarà Laura Merlini, una postdoc nel mio laboratorio. Esistono diverse varianti di questo protocollo che possono essere adattate per studiare le varie fasi del ciclo di vita sessuale, utilizzando ceppi omotallici o eterotallici.